CosmidCloning:Cellpreparation,DNApackaging,andCellTransfection
Cosmid Cloning: Cell preparation, DNA packaging, and Cell TransfectionProtocol taken from Stratagene's Gigapack packaging extracts instruction manualHost bacteria (E. coli LE392)preparation:Pick one colony from fresh overnight culture on NZY agar plate and inoculate 50 ml NZY broth supplemented with 0.2% maltose and 10 mM MgSO4.Grow at 37C, shaking, 4-6 h (do not grow past OD600 1.0/ml).Pellet bacteria 2000 rpm f......阅读全文
Cell子刊颠覆发现：癌细胞可从健康细胞获取线粒体DNA
左图：暗场图像凸显了被荧光染色的线粒体的传递。右图：明场下，有足够的光线可以看到连接的纳米级管道。 新西兰马拉格汉研究中心的迈克•贝里奇教授（Mike Berridge）领导的小组是世界上第一个发现线粒体DNA能在动物肿瘤细胞间移动的团队。他们的文章上周发表在《细胞》杂志的子刊《细胞-代谢》（Ce
两篇Cell文章发现精子的作用远不止DNA遗传
一般认为胚胎早期发育过程中，精子仅仅提供DNA遗传信息，其它方面主要由卵细胞决定，然而最新一期(5月10日)Cell杂志上接连公布了两项研究成果，指出精子的表观遗传学信息也会影响子代胚胎发育，这颠覆了传统上认为早期胚胎发育主要是由卵子决定的观念，也对于发育生物学和癌症生物学具有重要的意义。
Cell子刊：帮助修复致癌DNA缺陷的酶Cdc14
最近，普渡大学的研究人员确定了一个重要的酶途径，可有助于防止新细胞接收过多或过少的染色体——与癌症和其他疾病有直接关系的一种情况。相关研究结果发表在2014年4月份的国际著名生物学期刊、细胞杂志子刊《分子细胞》(Molecular Cell)。 普渡大学生物化学副教授Mark
病毒冷冻保藏技术
实验概要Snap freezing, or flash freezing, is the process by which samples are lowered to temperatures below -70°C very rapidly using dry ice or liquid
xCELLigence系统实时监测低毒性XtremeGENE－DNA转染实验（二）
■ 终点法分析，转染约72h后通过细胞增殖试剂盒WST-1分析确定细胞活性（图3）。与X-tremeGENE 9和X-tremeGENE HP Transfection Reagent相比，其他试剂转染细胞后，显著降低代谢活力，显示出细胞毒性效应。图3：比较罗氏X-tremeGENE 9和X-tr
实验室自动化与筛选协会2013亚洲会展Tecan展商技术论坛
Tecan专场时间：2013年6月6日下午13:45-14:30 Tecan Exhibitor Tutorial：Day 1 ( 6 June,2012) 13:45-14:30 Tecan专场地点：上海金茂君悦大酒店宴宾厅 II Location： Drawing Room
BrdU－Labeling－Protocol
实验概要The thymidine analog, 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU),is a common reagent used for cell proliferation assays and for the detection of apoptotic
SQ－Blood－DNA－Mini－Protocol－for－Buffy－Coat
实验概要The buffy coat fraction of whole blood is enriched with WBC, and usually gives at least 5-fold more DNA than the same volume of blood. To prep
SQ－Blood－DNA－Maxi－Protocol－for－410－ml－whole－blood
实验概要The E.Z.N.A.® SQ Blood DNA Kit is designed for isolating high molecular weight genomic DNA from fresh, frozen or anticoagulated whole blood. The
SQ－Blood－DNA－Midi－Protocol－for－500l3ml－whole－blood
实验概要The E.Z.N.A.® SQ Blood DNA Kit is designed for isolating high molecular weight genomic DNA from fresh, frozen or anticoagulated whole blood. The
噬粒（phagemid）
Phagemid Related Protocol (Erik)provides procedures for phagemid lysate preparation, titering phagemid, determining uracil incorperation and SS DNA pr
Cell－Stem－Cell
|泛素连接酶HECTD1通过协调核糖体大小亚基的组装来调控造血干细胞的再生能力 造血干细胞（Hematopoietic stem cell， HSC）具有自我更新和分化的功能。在正常生理状态下，HSC处于休眠状态，其蛋白合成速度受到严格地调控并维持在较低水平。当机体受到损伤时，HSC 能够迅速
Identification－of－a－Mutant－Kinase/ATP－Analog－Pair2
Cellular Transfection and Immunoprecipitation Before proceeding with the experiments outlined below, all kinase pocket mutants should be characterize
Chemical－Induction－of－Apoptosis
Chemical Induction of Apoptosis - 1 May 2001p53, p21WAF1, Myc, Bcl-2, Bax, Bcl-x and bak are among the proteins involved in the regulation of apoptosi
黏粒的定义组成和功能
黏粒英文cosmid，指带有黏端位点(cos)的质粒。黏粒是由人工构建的含有λ噬菌体DNA的cos序列和质粒复制子的载体。黏粒的组成包括质粒复制起点（ColE1）、氨苄青霉素抗性标记、cos位点。
IL22－Soluble－Receptor－Signaling－Pathway
IL-22 is an inflammatory cytokine related to IL-10 that is produced by T cells and that induces a response in cells through a heterodimeric cell surfa
QUALITATIVE－ANALYSIS－OF－DNA－FRAGMENTATION－BY－AGAROSE－GEL－ELECTROPHORESIS
1. IntroductionNuclear morphology changes characteristic of apoptosis appear within the cell together with a distinctive biochemical event: the endonu
磷酸钙细胞转染技术
[实验目的] 1 了解细胞转染技术原理和基本方法 2 磷酸钙沉淀法的基本技术要点 [实验原理] 磷酸钙沉淀法是基于磷酸钙-DNA复合物的一种将DNA导入真核细胞的转染方法，磷酸钙被认为有利于促进外源DNA与靶细胞表面的结合。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮作用进入靶细胞，被
An－Integrative－Procedure－for－Apoptosis－Identification－and－Measurement2
TroubleshootingCritical Steps(1) Don’t trypsinize cells for too long when collecting them.(2) Rotation speed should be no more than 1500 rpm during ce
CO2恒温摇床解决人胚肾－293－(HEK293)－细胞结团问题（二）
Lysate preparation and western blottingProtein lysates were created by harvesting the cells from confluent T-flasks or from suspension cultures at h
Cell：揭示DNA柔性在抗体基因超突变中的生理功能
4月24日，《细胞》（Cell）以Research Article的形式，在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心孟飞龙研究组等撰写的题为Mesoscale DNA Feature in Antibody-Coding Sequence Facilitates Somatic Hypermu
Cell－Reports报道一种切断DNA重要酶的新机制
来自约翰霍普金斯大学的研究人员发现了一种关键酶为何会过度剪切DNA的作用机制，由于这种剪切对于特殊免疫系统蛋白具有重要意义，因此这一发现也将有助于解释这种酶的突变形式为何会引发免疫缺陷和癌症。 这一研究成果公布在12月24日的Cell Reports 杂志上。 免疫系统依赖于形成特殊的蛋白质
Cell：科学家开发出线粒体DNA编辑技术，再度引发争议
细胞编辑技术已成为学术热点。近日，这一领域又有了新进展。来自美国索尔克研究所（Salk Institute）的科学家利用一种专门设计的分子剪刀剪掉了小鼠胚胎中的线粒体突变部分，留下了健康的DNA。他们希望将来能够用这项技术防治人类线粒体疾病。这项研究发表在近期的Cell上。 新技术可对线粒体D
Cell子刊：根除癌细胞的利器：双重靶向DNA修复机制
发表在Cell Reports上的一篇论文将这种新方法称为“双重合成致命性”（dual synthetic lethality）。之所以这样命名，是因为癌细胞死亡是由两种同时靶向不同DNA修复途径的药物诱导的。作者之一、美国坦普尔大学（Temple UniversityLKSOM）Fels癌症所
Gateway克隆技术BP反应构建入门载体与LR反应构建表达载...
Gateway克隆技术-BP反应构建入门载体与LR反应构建表达载体的区别 提到克隆、重组载体，就想到5字金言：分、切、连、转、筛，“分”是指分离制备合格的待操作的DNA；“切”是指用序列特异的限制性内切酶切开载体DNA，或者切出目的基因；“连”是指用DNA连接酶将目的DNA同载体DN
细胞组分和细胞器——细胞器分离
Labeling Microtubules (Molecular Dynamics Inc. )Microtubules are involved in many aspects of cell motion including propulsion, mitosis, growth, and o
Experimental－Protocol－for－cDNA－Library－Construction
Experimental Protocol for cDNA Library ConstructionIdentify appropriate celltype over-expressing corresponding gene.Find out if transcription can be s
RNAi－protocol
siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
NAi－protocol
siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western
蛋白质提取与制备(Protein－Extraction－and－Preparation)2
三、蛋白质提取与制备具体操作方法1、原料的选择早年为了研究的方便，尽量寻找含某种蛋白质丰富的器官从中提取蛋白质。但至目前经常遇到的多是含量低的器官或组织且量也很小，如下丘脑、松果体、细胞膜或内膜等原材料，因而对提取要求更复杂一些。原料的选择主要依据实验目的定。从工业生产角度考虑，注意选含量高、来源丰