CosmidCloning:Cellpreparation,DNApackaging,andCellTransfection
Cosmid Cloning: Cell preparation, DNA packaging, and Cell TransfectionProtocol taken from Stratagene's Gigapack packaging extracts instruction manualHost bacteria (E. coli LE392)preparation:Pick one colony from fresh overnight culture on NZY agar plate and inoculate 50 ml NZY broth supplemented with 0.2% maltose and 10 mM MgSO4.Grow at 37C, shaking, 4-6 h (do not grow past OD600 1.0/ml).Pellet bacteria 2000 rpm f......阅读全文
Cell子刊：DNA甲基化的不完全重置
Babraham研究所的科学家们揭示了生殖细胞(卵子和精子)发育时DNA重置的机制。众所周知，表观遗传学修饰是指不改变DNA序列的DNA修饰，DNA上添加这样的小基团会改变基因的活性。在人们的一生中(包括在子宫内的发育)，表观遗传学修饰都在不断积累和变化，环境也能够对表观遗传学修饰发生影响。
陈柏仰博士Cell揭示DNA去甲基化动态
精子和卵子融合是动物个体发育的起点，不过这一过程并不仅仅是简单的融合。人们发现，在哺乳动物胚胎的早期发育中，全基因组的甲基化模式会发生明显的变化。在小鼠胚胎受精之前，雌雄生殖细胞具有较高的甲基化水平，受精后父源基因组迅速的发生主动去甲基化，而母源基因组发生被动的去甲基化。 为了了解人类生殖细胞
《Cell》付巧妹：细数古DNA技术发展史
在过去的10年里，中国科学院古脊椎动物与古人类研究所的付巧妹领导的研究人员利用古DNA (aDNA)技术，挖掘出了古人类，尤其是东亚古人类的历史。作为他们工作的一部分，研究人员重建了两个已经灭绝的古人类群体——尼安德特人和丹尼索瓦人的整个基因组;绘制了全球人口迁移和相互作用的历史地图;揭示了最古老的
Cell－Rep：DNA序列重复会引发遗传性疾病
近日，来自塔夫斯大学的研究人员通过研究揭示，DNA链中长的核苷酸重复会导致基因组的不稳定，最终会引发遗传性疾病的发生，比如Freidreich征和亨廷顿病等，相关研究刊登于国际杂志Cell Reports上。 研究者认为，当细胞分裂或细胞中DNA修复机制激活时就会在DNA复制过程中形成长的重复
中科院Cell－Res揭示DNA修复新机制
来自中科院北京基因组研究所、清华大学的研究人员证实，Ago2通过同源重组促进了Rad51招募以及DNA双链断裂修复。这一研究发现发表在3月25日的《细胞研究》(Cell Research)杂志上。 中科院北京基因组研究所的杨运桂 (Yun-Gui Yang)研究员和清华大学的戚益军(Y
Cell－Death果蝇DNA损伤后细胞增殖与凋亡的协调
暴露于遗传毒性应激可促进细胞周期停滞和DNA修复或凋亡。这些“生”或“死”细胞命运的决定通常取决于肿瘤抑制基因53的活性。因此，对p53的精确调控对于维持组织内环境平衡和防止肿瘤的发展至关重要。然而，细胞周期进程是如何影响p53细胞命运的，目前尚不清楚。 已经提出了几种机制来解释dna损伤细胞
韩敬东研究员Cell子刊探讨“垃圾”DNA
人类基因组上含有大量的反转录元件，其中Alu序列的拷贝数最多，在灵长类基因组上有超过100万份拷贝，约占到人类基因组总长度的10%，仍然目前对于Alu元件的功能仍知之甚少。来自中科院上海生命科学研究院的研究人员在新研究中证实，一些Alu元件朝着增强子方向发生了演化。这一研究发现发表在《Cell
Cell－Rep：DNA序列重复会引发遗传性疾病
近日，来自塔夫斯大学的研究人员通过研究揭示，DNA链中长的核苷酸重复会导致基因组的不稳定，最终会引发遗传性疾病的发生，比如Freidreich征和亨廷顿病等，相关研究刊登于国际杂志Cell Reports上。 研究者认为，当细胞分裂或细胞中DNA修复机制激活时就会在DNA复制过程中形成长的重复
通过细胞受体代谢生物素化进行图像分析
Metabolic biotinylation of mammalian cell receptors for imagingBakhos A. Tannous , btannous@hms.harvard.edu, Massachusetts General Hospital and Harvar
细胞组分和细胞器——细胞骨架
Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton (Mitchison Lab) Recycling Tubulin (Mitchison Lab) Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi
BAC－DNA分离方法－Isolation－of－BAC－DNA－from－Largescale－Cultures
Isolation of BAC DNA from Large-scale CulturesJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. Russe
siRNA体外转染——GenMuteTM－siRNA体外转染的优化
GenMuteTM siRNA转染试剂（Cat#SL100568）是市场上最有力的siRNA传递工具之一。最佳的siRNA浓度范围是1.0nM到10nM，过多的siRNA可能导致沉默效果差的“洪水效应”。我们实验室已经使用GenMuteTM转染试剂成功敲除了内源表达的生长因子。以24孔板为例，如下步
AKAP95－role－in－mitosis－and－chromosome－dynamics
The chromatin packaging of the genome is dynamic, changing with the cell cycle and with transcriptional regulation. During mitosis, chromatin is conde
Protocol－to－Count－Cell－Number－of－Preimplantation－Embryos
Protocol to Count Cell Number of Preimplantation Embryos using Nuclear Staining with Hoechst 33342 or DAPI Introduction The following is a simple pro
关于黏性质粒载体的简介
由于真核基因的结构与功能研究的需要，人们发展出比λ噬菌体载体具有更大克隆能力的新型的载体——柯斯质粒载体(cosmid vectors，cosmid是COS site—carrying plasmid的缩写)，也称为黏陛质粒或黏粒。这是一类人工构建的含有抗性基因、单一克隆位点以及λDNACOS位
显微镜技术——电子显微技术
The Transmission Electron Microscope (TEM) (HEI)An explanation of how the TEM works. TEM Specimen Preparation (HEI) Serial Sectioning (Walter Steffe
Lambda噬菌体
· Lambda DNA Preparation (Stanford DNA Sequence & Technology Center)Detailed protocol for lambda DNA preparation with recipes· Isolati
BioTechniques：2015最受欢迎的技术文章
BioTechniques杂志日前评出了2015年最受欢迎的十篇技术文章，涵盖了对PCR、DNA提取、无细胞蛋白表达等常规技术的改良，以及CRISPR/Cas9、Hi-Plex、微图案化等新技术的应用。 1. Visual detection of isothermal nucleic aci
核蛋白基因组指纹技术
Fine Mapping of Genomic Targets of Nuclear Proteins in Cultured CellsAchim Breiling and Valerio OrlandoDulbecco Telethon Institute, Institute of Genet
DNA微序列技术
· Protocols for Making Drosophila Arrays (Stanford U.)Detailed protocol for making arrays including PCR Amplification of cDNAs for Printing,
其它PCR方法
· Standard PCR Protocol (Molecular Biology Techniques Manual)The followings are described in detailRecommended Reagent ConcentrationsRecommend
DNA抽提
DNA抽提（主要内容如下）· Working with DNA· DNA Extraction from Bacteria and Other Organisms· DNA Extraction from Cell and Tissue· Mitochondria DNA Isola
常用试剂配制－2
Acetone / Formaldehyde FixativeAcrylamide Gel, denaturingAcrylamide Gel, nondenaturingAlkaline Phosphatase Buffer 1 (Glycine Buffer, 0.1 M, pH 10.4)Al
T载体的制作和应用
Also see DNA Cloning§ Making TA Vector (Crawford Lab)T-vectors are linear-blunt-ended plasmids with a few dT's added on by Taq polymerase.
酵母人工染色体
· Easy YAC Preparation Method (Andrew Davies,Shaw lab)· Screening YAC libraries (Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
Preparation－of－cytoplasmic－extracts－forthe－application－in－acellfree－system
DescriptionCells are grown to 80% confluency, then harvested, washed and disrupted in KPM buffer by freezing-thawing cycles with liquid nitrogen essen
Protocols－for－the－preparation－of－tumour－cells－for－s.c.－injections－in－mice
For the establishment of solid tumour in nude mice, tumour cells are treated in a sterile environment under a cell culturing hood. Disposable sterile
Protocols－for－the－preparation－of－tumour－cells－for－s.c.－injections－in－mice
For the establishment of solid tumour in nude mice, tumour cells are treated in a sterile environment under a cell culturing hood. Disposable sterile
基于epMotion－5075t系统与KPPA－HyperPlus试剂盒的全自动测序..1
基于epMotion 5075t系统与KPPA HyperPlus试剂盒的全自动测序前文库制备方案Automated KAPA HyperPlus DNA Library Preparation for Illumina® Sequencing on the Eppendorf epMotion®
Cell：DNA重组在人类基因组中广泛存在
日本理化研究所综合医学科学中心的科学家与世界各地的其他研究人员合作发现，在我们每个细胞的基因组中重复数百万次的特定基因组序列重组，在正常和疾病状态下都普遍存在。确定导致这种无数次重组的机制，包括曾经被认为是“垃圾”的DNA序列，可能对理解我们的细胞如何发育以及什么会使它们不健康至关重要。随着DNA的