常用荧光染料的激发及发射波长
Fluorescent Dye （荧光染料）Excitation （激发波长， nm ）Emission （发射波长， nm ）Cy2 TM489506GFP(Red Shifted)488507YO-PRO TM -1491509YOYO TM -1491509Calcein494517FITC494518FluorX TM494519Alexa TM 488490520Rhodamine 110496520ABI,5-FAM494522Oregon Green TM 500503522Oregon Green TM 488496524RlboGreen TM500525Rhodamine Green TM502527Rhodamine123507529Magnesium Green TM506531Calcium Green TM506533TO-PRO ......阅读全文
原子荧光的类型
原子荧光可分共振荧光、非共振荧光与敏化荧光等三种类型。图为原子荧光产生的过程。其中，对（a）～（d）的详解见下表。(a) (b) (c) (d) A 起源于基态的共振荧光 起源于基态 正常阶跃荧光 起源于亚稳态B 热助共振荧光 起源于亚稳态 热助阶跃荧光 起源于基态⑴ 共振荧光气态原子吸收共振线被激
原子荧光的类型
原子荧光可分共振荧光、非共振荧光与敏化荧光等三种类型。图为原子荧光产生的过程。其中，对（a）～（d）的详解见下表。(a) (b) (c) (d) A 起源于基态的共振荧光 起源于基态 正常阶跃荧光 起源于亚稳态B 热助共振荧光 起源于亚稳态 热助阶跃荧光 起源于基态⑴ 共振荧光气态原子吸收共振线被激
原子荧光的类型
原子荧光可分共振荧光、非共振荧光与敏化荧光等三种类型。图为原子荧光产生的过程。其中，对（a）～（d）的详解见下表。(a) (b) (c) (d) A 起源于基态的共振荧光 起源于基态 正常阶跃荧光 起源于亚稳态B 热助共振荧光 起源于亚稳态 热助阶跃荧光 起源于基态⑴ 共振荧光气态原子吸收共振线被激
改善检测性能的衍生化试剂分类
常用紫外衍生化试剂⑴2,4-二硝基氟苯（最大吸收波长350nm，摩尔吸收系数>104）⑵对硝基苯甲酰氯（最大吸收波长254nm，摩尔吸收系数>104）⑶ 对甲基苯磺酰氯（最大吸收波长224nm，摩尔吸收系数=104）⑷异硫氰酸苯酯（最大吸收波长244nm，摩尔吸收系数=104）⑸ 对硝基苯基溴（最大
紫外分析仪原理及应用
紫外分析仪有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列，不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测，PCR产物检测，DNA指纹图谱分析，纸层分析或薄层分析等。 紫外分析仪是荧光技术的应用，荧光技术是什么呢？首先了解一下什么是荧光，荧光又作“萤光”，是指一种
紫外分析仪原理及应用
紫外分析仪有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列，不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测，PCR产物检测，DNA指纹图谱分析，纸层分析或薄层分析等。 紫外分析仪是荧光技术的应用，荧光技术是什么呢？首先了解一下什么是荧光，荧光又作“萤光”，是指一种
生物医学研究新工具：FLIMFRET生物传感器
荧光寿命成像（FLIM）与Förster共振能量转移（FRET）相结合，已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离，所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用，如配体-受体复合物，蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与
FLIMFRET生物传感器介绍
荧光寿命成像（FLIM）与Förster共振能量转移（FRET）相结合，已被证明非常有利于生物医学研究中各种结构和细胞动态变化的研究。因为FRET信号强烈依赖于FRET配体和受体的距离，所以FRET允许监测分子相互作用。这允许研究分子的相互作用，如配体-受体复合物，蛋白质-蛋白质相互作用、效应蛋白与
受激发射中跃迁和能级的定义
原子中的电子与外界交换能量而改变其运动状态，称为跃迁。在孤立原子中，这些能量是分立的，称为能级。对于同一元素的原子，能级的情况完全相同。 受激发射是电子受到光的激发，自高能态跃迁到低能态，同时发射与激发光的相位、偏振方向和传播方向都相同的光。
怎么确定一个新物质的激发波长
光的波长越小,光子能量越大。 荧光是由激发光激发的。激发光的光子打到荧光物质上,经过一系列变化,激发出荧光。
如何用酶标仪检测荧光
通过光谱扫描功能可以确定未知荧光染料分子的绝佳激发波长和发射波长。美谷荧光酶标仪优势： ①SpectraMax Gemini EM双光栅型，可以检测各种新颖的荧光染料分子而无须另外购买昂贵的滤光片。 ②具有单孔多点扫描模式，每孔可测读多个点，应用于细胞实验可获得更高等级的灵敏度。Auto-PMT可以
荧光显微镜与普通显微镜的区别
荧光显微镜与普通光学显微镜不同，它不是通过普通光源的照明观察标本，而是利用定波长的光(通常是紫外光、蓝紫光)激发显微镜下标本内的荧光物质，使之发射荧光，所以，荧光显微镜的光源所起的作用不是直接照明，而是作为种激发标本的内荧光物质的能源。我们之所以能观察标本，不是由于光源的照明，而是标本内荧光物质吸收
生物荧光显微镜的技术操作
荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。 •原理 •荧光显微镜标本制作要求 •使用荧光显微镜的注意事项 •荧光图像的记录方法 原理 某些物质经一定波长的光（如
生物荧光显微镜的技术操作
荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。是利用一定波长的光激发标本发射荧光，通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。 •原理 •荧光显微镜标本制作要求 •使用荧光显微镜的注意事项 •荧光图像的记录方法 原理 某些物质经一定波长的光（如紫外光）照射
激光激发肯定比汞灯激发荧光强吗？
激光激发肯定比汞灯激发荧光强吗？ 不是。 很多人认为，激光共聚焦显微镜作为科研界的美图秀秀，一定会比普通显微镜排出更美丽的图片。但实际上，并非如此。 共聚焦的激发光源为单色光，某一特定波长，如488nm，而普通显微镜的激发光源为混合光，在某一特定区段波长，如470
双光子共聚焦显微镜
双光子共聚焦显微镜是为了解决生物检测中样品染料标记的光漂白现象而提出的，因为共焦孔径光阑必须足够小以获得高分辨率的图像，而孔径小又会挡掉很大部分从样品发出的荧光，包括从焦平面发出的荧光，这样就要求激发光必须足够强以获得足够的信噪比；而高强度的激光会使荧光染料在连续扫描过程中迅速褪色（即光漂白现象），
如何进行免疫荧光三标？
做免疫荧光实验中，经常要进行免疫荧光的双标记实验，也就是在同一个样本上同时进行两种蛋白的免疫荧光检测。具体的实验时，可以选择不同来源的一抗，然后再选择分别针对一抗的二抗，同时二抗上标记有不同的荧光团。 一般的双标记实验里，都会选择一个绿色的（如FITC、Cy2、Dylight 488等）荧光标
荧光pH探针于细胞内pH检测的使用（二）
pH 6.0 pH 8.5 图2. 用RatioWorks™BCFL，AM标记的Hela细胞。将Hela细胞与5 µM RatioWorks™BCFL，AM（Cat# 21190）在37°C 下孵育30分钟
生物医学研究新工具：FLIMFRET
目前，大多数生物探针都是基于荧光。荧光探针亮度的增加或减少取决于其浓度。但是，荧光强度不仅受研究对象浓度的影响，还受照明强度、光漂白以及基质吸收和阴影效应等。为了尽量避免这些问题，科学家倾向于优先选择比率染料（ratio-dyes），因为其允许对背景的干扰进行校准。尽管如此，基于荧光强度的测量并不是
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达（一）
简介在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
荧光光谱分析的原理及方法
荧光分析法是指利用某些物质被紫外光照射后处于激发态，激发态分子经历一个碰撞及发射的去激发过程所发生的能反映出该物质特性的荧光，可以进行定性或定量分析的方法。由于有些物质本身不发射荧光（或荧光很弱），这就需要把不发射荧光的物质转化成能发射荧光的物质。例如用某些试剂（如荧光染料），使其与不发射荧光的
荧光染料Real－Time－PCR的引物设计
引物的设计相对于普通的PCR来说，还是有一些更为严格的要求：1、引物的退火温度要高，一般要在60度以上；2、引物的产物大小不要太大，一般在80-250bp之间都可；3、引物一般要设计在目的基因中跨内含子的位置，这样可以避免在存在DNA污染的情况下，对目的片断的额外的扩增；4、对于定量PCR来说，特别
荧光染料使用时应该注意的问题
荧光染料是一种能吸收部分子外光，将紫外光转化为可见光，从而增加亮度的着色剂，从而使颜色极为鲜明。荧光燃料使用的问题有两个：一个就是迁移性，使用时要严格控制用量，以避免产生迁移现象；二是荧光染料使用有一个极限值，如果超量使用，导致荧光线被吸收，使吸收和发光成叠所致。
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强
荧光染料CFSE活细胞标记的特点
荧光染料CFSE(CFDA-SE)，是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料，可以标记活体细胞。其基本原理如下：CFSE能够轻易穿透细胞膜，在活细胞内与胞内蛋白共价结合，水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中，它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减，标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，因此其荧光强
ELISA检验常用的波长是多少
用酶标仪在450nm波长测量各孔的光密度（ 值）。
超分辨率显微镜发展历程和技术原理
超分辨率显微镜发展历程 毫无疑问，自16世纪以来，光学显微镜已经历漫长的旅程。首次被知晓的复合显微镜是由Zacharias和Hans Janssen构造的。尽管这些显微镜没有保存下来，但人们确信这些显微镜已能够将放大倍率从3倍提高到9倍。17世纪末期，Leeuwenhoek首次将放大倍率和分辨率提高
紫外分析仪荧光技术原理、用途
紫外分析仪分为很多系列，有三用紫外分析仪、暗箱式紫外分析仪、可照相紫外分析仪等系列，不同的紫外分析仪有不同的用途。紫外分析仪采用不同波长引进电泳分析、检测，PCR产物检测，DNA指纹图谱分析，纸层分析或薄层分析等。图片仅介绍了三用紫外分析仪的外形。 紫外分析仪是荧光技术的应用，那么荧光技术是
共聚焦激光扫描显微镜的应用及荧光探针
一、LSCM常用的检测内容及其荧光探针 LSCM检测内容和应用范围非常广泛，以下仅简单介绍LSCM常用的检测内容及其荧光探针。 1．细胞内游离钙 共聚焦激光扫描显微镜常用的有Fluo-3、Rhod-1、Indo-1、Fura-2等，前两者为单波长激光探针，利用其单波长激发特点可直接测量细胞内Ca
流式技术中的APC，pure－标记是什么意思？
荧光物质通常是指那些在受到一个波长激发后，处于一个能量不稳定的状态，能发射一个波长比激发波长长的光的一类物质。当然荧光并不都是受激发后发射的，如一些生物可以发射荧光，如荧火虫，发光细菌等，他们发出的光是通过体内的酶促反应而产生的，这个酶通常被称为荧光素酶.EB是一种荧光物质，它在受到紫外线照射后可以