利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达（一）
简介在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众多的细胞和组织中被克隆复制，从细菌到酵母，从植物到哺乳动物。这些荧光蛋白稳定、细胞毒性小、而且不需要额外的辅助也能在体内产生可见的荧光。因此，它们可以被用作分子靶标或者独立的报告因子去视化、追踪和定量多种不同的细胞进程，包括细胞合成与代谢，蛋白转运，基因诱导和细胞谱系。不同的荧光蛋白具有不同的颜色，因此也可被用于多重检测。这些荧光蛋白都能被荧光显微镜和流式细胞仪检测到。但是相应的，如果我们不做细胞分选或监测细胞内迁移，具有荧光功能的微孔板读板机将是一个更好、更方便和更高通量的选择。下面，我们将会向大家展示Molecular D......阅读全文
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达（一）
简介在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达（二）
结果波长优化用GeminiEM对DsRed进行波长扫描，以此举例如何进行波长优化。为了检测最大激发波长，我们首先固定发射波长为600nm，然后对发射波长进行扫描。扫描结果显示最大激发波长为556nm(图1)。同样为了检测最大发射波长，我们固定激发波长为535nm，然后扫描发射波长，从而得到584nm
利用“无创”技术检测活细胞中荧光蛋白表达（三）
细胞混合结果在本次实验中，我们在一个96孔板里混合了多种细胞，保证每个孔大约50,000个细胞。因此，如果是1:1混合，那么每种细胞会有25,000个。如果是1:1:1混合，那么每种细胞将有16,700个。实验板分别用480/510nm(AsGFP和ZsGreen的优化结果)和550/588nm(D
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白（一）
简介在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是最早被我们应用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋白。它们都可以在众
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白
在过去的五年中，荧光蛋白在监测体内生物学研究中，起到越来越重要的作用。源于维多利亚多管发光水母中的绿色荧光蛋白(GFP)是zui早被我们应 用的荧光蛋白，但是随着时间的推移，现在我们可以使用的荧光蛋白种类也越加丰富，包括加强型的变异GFP蛋白、从其他种类水母中发现的荧光蛋白和珊瑚礁蛋 白。它们都可以
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白（三）
在本次实验中，ZsGreen和DsRed细胞系在底读模式都有着相似的检测限，而且两者都比AcGFP细胞系的检测下限低3到4倍。本次实验一共重复了三次，但是DsRed实验结果并不是每次都能表现的足够好。在一次实验中，它的检测下限近似于AcGFP，但是在另一次实验中，它的检测下限又会很高。我们将这些区别
酶标仪利用”无创”技术检测活细胞荧光蛋白（二）
下一步就是要结合信号/背景优化结果确定最佳激发和发射波长。因为初步检测结果的斯托克顿位移偏小(22nm)，显然是要通过降低激发波长和增大发射波长来扩大两者之间的差异，其次还需要找到合适的发射光阻隔滤片优化最佳灵敏度。最终，我们使用5 5 0nm的激发波长来激发， 同时使用570nm的发射光阻
无细胞蛋白表达技术介绍
无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分（核糖体，转运RNA，氨酰合成酶，启动/延伸/终止因子，三磷酸鸟苷，ATP，Mg2+和K+）的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达系统相比较，无细胞蛋白表达系统具有独特的优势，包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的
NanoString技术检测微创穿刺样品蛋白表达
NanoString技术由于其高灵敏度，高重复性并且检测过程中不需要进行反转录和扩增，一经推出便受到了广泛的关注和认可。现在这项技术广泛的应用在基因表达（mRNA），小RNA（miRNA），拷贝数变异（CNV），长链非编码RNA（lncRNA）等方面的检测，但是这些检测的对象都是核酸，对于细胞蛋白的
利用石墨烯无创检测癌症
不同的细胞与石墨烯之间有着不同的相互作用。正常细胞和癌症细胞分别与石墨烯发生相互作用，通过拉曼成像技术，可以分辨两种细胞的不同活性。（图片来源：UIC/Vikas Berry） 有什么是石墨烯办不到的？检测癌症？不，石墨烯现在可以用于检测癌症了。 伊利诺伊大学芝加哥分校（University
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河，这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此，体外蛋白表达开始为科学界所关注，不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差，使其未能得到进一步发展。 到80年代中期Sp
无细胞表达系统——难度蛋白表达的福音
1964年有两个人开创了体外蛋白表达的先河，这两个人的名字大家必定不会陌生—马太和尼伦伯格。因为他们的创新思维让人类破译了编码氨基酸的64种翻译密码子。从此，体外蛋白表达开始为科学界所关注，不过彼时这个系统蛋白表达量低、持续时间短、稳定性差，使其未能得到进一步发展。到80年代中期Spirin等对其进
无创产前技术概述（一）
什么是无创产前基因检测无创产前基因检测技术全球统称为NIPT（Noninvasive prenatal test），主要是通过采集5毫升的孕妇外周血，从血浆中把游离的DNA提取出来，经过高通量的测序和生物信息学的分析，得出胎儿患染色体异常的疾病风险率的一项技术。这项检测技术可以检测胎儿全部的
肿瘤无创诊断技术在癌症检测中应用
肿瘤无创诊断技术即液体活检（liquid biopsies）的出现，标志着人类在攻克肿瘤的道路上又前进了一大步。2015年液体活检技术被MIT科技综述杂志（MIT Technology Review）评为年度十大突破技术之一；2017年6月，世界经济论坛与《科学美国人》杂志的专家委员会联合选出的2
肿瘤无创诊断技术在癌症检测中应用
肿瘤无创诊断技术即液体活检（liquid biopsies）的出现，标志着人类在攻克肿瘤的道路上又前进了一大步。2015年液体活检技术被MIT科技综述杂志（MIT Technology Review）评为年度十大突破技术之一；2017年6月，世界经济论坛与《科学美国人》杂志的专家委员会联合选出的
无创血糖检测技术面世
糖尿病的发病率逐渐增加，中国糖尿病的患者数量早就超过1亿人，对糖尿病患者来说，测定血糖是一个必须经常进行的检测，而常规的血糖检测方法必须采集血液，采血一般通过手指针刺或静脉穿刺，毕竟会给患者带来一定伤害。另外常规血糖检测难以进行实时分析，这给通过药物控制血糖带来一定局限。那么有没有办法采用更简单
无细胞蛋白表达系统的选择
图1. 与细胞内蛋白表达相比，无细胞蛋白表达系统能够显著地节约时间。 与基于细胞的蛋白表达系统相比较，无细胞蛋白表达系统具有独特的优势，包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的总体产量。本文介绍了根据模板类型、期望产率以及下游实验等因素来选择无细胞蛋白表达系统的标准。
无创血糖检测技术面世(图)
糖尿病的发病率逐渐增加，中国糖尿病的患者数量早就超过1亿人，对糖尿病患者来说，测定血糖是一个必须经常进行的检测，而常规的血糖检测方法必须采集血液，采血一般通过手指针刺或静脉穿刺，毕竟会给患者带来一定伤害。另外常规血糖检测难以进行实时分析，这给通过药物控制血糖带来一定局限。那么有没有办法采用更简单的方
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变，会影响其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如镰状细胞贫血，就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸，从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸，降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度，使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变，会影响其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如镰状细胞贫血，就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸，从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸，降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度，使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变，会影响其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如镰状细胞贫血，就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸，从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸，降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度，使
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量
如何检测一个细胞中的蛋白质表达量蛋白质分子中关键活性部位氨基酸残基的改变，会影响其生理功能，甚至造成分子病（molecular disease）。例如镰状细胞贫血，就是由于血红蛋白分子中两个β亚基第6位正常的谷氨酸变异成了缬氨酸，从酸性氨基酸换成了中性支链氨基酸，降低了血红蛋白在红细胞中的溶解度，使
－无创性肺癌检测技术即将登陆中国
最新一项研究成果可以帮助医生从患者的唾液中检测肺癌的生物标志物，从而方便早期诊断。 这项无害的技术能够从唾液中检测肿瘤特异性DNA，相比传统的诊断手段，该方法能够大幅缩短等待结果的时间，以及降低成本与提高便利程度。 在2016年美国科学促进会年会上，来自加州洛杉矶分校的牙科学院副院长Davi
高通量测序技术在无创产前检测中的应用
染色体非整倍体是胎儿出生缺陷最常见病因之一，其中以21-三体综合征、18-三体综合征最为常见，占所有足月妊娠的0.2%~0.3%。对先天性遗传病进行产前筛查和产前诊断是优生优育的重要保证。自1970年以来，针对上述胎儿染色体疾病的产前筛查和产前诊断已逐渐应用到临床上，并在降低出生缺陷方面得到了良好的
一文读懂：无创产前检测
无创产前检测（NIPT）越来越受到大家的重视，检验科在无创产前检测方面的工作也越来越多。 什么是无创产前检测？ 1997 年香港中文大学的卢煜明（Dennis L）教授发现在母体外周血浆中存在胎儿游离 DNA。这种胎儿游离 DNA 来自于胎盘滋养层细胞，在怀孕后 5 周就可
无创产前检测
无创产前检测（NIPT）越来越受到大家的重视，检验科在无创产前检测方面的工作也越来越多。什么是无创产前检测？1997 年香港中文大学的卢煜明（Dennis L）教授发现在母体外周血浆中存在胎儿游离 DNA。这种胎儿游离 DNA 来自于胎盘滋养层细胞，在怀孕后 5 周就可检测到，怀孕 10 周
我国团队研发出一种胃癌早期无创检测技术
中新社合肥8月4日电(记者吴兰)记者4日从中国科学院合肥肿瘤医院获悉，该院王宏志、聂金福、洪波课题组与中国医学科学院肿瘤医院山西医院(山西省肿瘤医院)生物样本库团队近日在肿瘤早筛领域取得新进展，研发了一种胃癌早期无创检测技术。据介绍，这种基于血液游离DNA(cfDNA)甲基化和人工智能(AI)识别技
U糖停售无创血糖检测设备－无创检测难过审批
近日，伴随着声势浩大的新闻发布会上市的，号称“中国首台无创血糖检测”，并希望以此为基础建设第三方数据开放平台及智能硬件生态链的无创血糖检测设备——U糖被暂缓销售，其主要原因为U糖无创血糖检测设备仍未获医疗注册许可，且获批难度很大，因此暂缓上市。 据U糖官网显示，就在首批设备预定时间即将终止的时
利用鼻子来急救，无创更安全
一项新的研究结果显示，现如今越来越多的美国急救室选择利用鼻子来急救，或将取代普通打针或者静脉注射。日前，来自美国洛约拉大学健康系统的研究人员发表报告称，利用鼻子来急救不仅简单，快速而且还是无创的。 在急救过程中，医生或者护士只需要把雾化器连接到患者的鼻孔中，接着，他们通过推动活塞使雾化药物进入
无创DNA检测的“创口”：真能保证“无创”吗
近日，一篇《华大癌变》的文章在微信朋友圈流传，让无创DNA产前检测技术（NIPT）再次进入公众视野。低风险、高筛查率，这项让医疗机构、商业公司乃至患者“推崇”的新技术，却依然无法避免唐氏综合征患儿的诞生。 由此，曾经“包打天下”的产前检测技术遭到质疑：“无创”的DNA检测真的能保证“无创”吗？