激光扫描共焦显微镜技术

l 样品要求:1.经荧光探剂标记(单标、双标、三标)2.固定的或活的组织3.固定的或活的贴壁培养细胞(Confocal专用小培养皿,盖玻片)4.悬浮细胞,甩片或滴片后,用盖玻片封一. 组成倒置或直立荧光显微镜、扫描头(照明针孔、探测针孔、荧光滤片系统、镜扫描系统和光电倍增管)、扫描头控制电路、计算机和图像输出设备二. 原理Confocal 利用放置在光源后的照明针孔和放置在检测器前的探测针孔实现点照明和点探测,来自光源的光通过照明针孔发射出的光聚焦在样品焦平面的某个点上,该点所发射的荧光成像在探测针孔上,该点以外的任何发射光均被探测针孔阻挡。照明针孔与探测针孔对被照射点或被探测点来说是共轭的,因此被探测点即共焦点,被探测点所在的平面即共焦平面。计算机以像点的方式将被探测点显示在计算机屏幕上,为了产生一幅完整的图像,由光路中的扫描系统在样品焦平面上扫描,从而产生一幅完整的共焦图像。只要载物台沿着Z轴上下移动,将样品新的一个层面移动......阅读全文

为什么激光共聚焦显微镜拍出来的是灰度图

真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同。1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光。其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的。由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,

激光共聚焦显微镜与真实色共聚焦显微镜的区别

真实色共焦显微镜与激光扫描共焦显微镜,二者在成像原理上基本是一样的,最大不同之处是照明光源不同。1、激光扫描共焦显微镜激光扫描共焦显微镜的照明光源是激光,即单色光。其实际成像过程是根据被观察物体对该单色激光的反射光的强弱来成像的。由于是单色光照明,不能分辨颜色,对于在同一试样的同一视场内,颜色不同,

激光显微共焦拉曼光谱仪的激光器相关介绍

  激光器主要提供激发光源。激光器用作拉曼光谱的激发光源对拉曼光谱术的快速发展起到了至关重要的作用。由于拉曼散射很弱,要求的光源强度大,而激光器提供的激发光源具有极高的亮度、方向性强、谱线宽度十分狭小以及发散度极小,可传输很长的距离而保持高亮度。因此,一般用激光器提供激发光源。  激光器种类很多,常

聚焦激光扫描显微镜

聚焦激光扫描显微镜(confocallaser scanning microscopy,CLSM)是生物医学实验室中重要的仪器设备,可以检测细胞甚至分子水平的改变,1995年美国学者在传统共聚焦激光扫描显微镜基础上加上在体扫描装置,实现了皮肤上的在体共聚焦成像,这是一种在皮肤原位、无创、细胞水平的成

激光显微共焦拉曼光谱仪的样品装置

  样品装置包含在外光路系统中。样品架的设计要保证使照明最有效和杂散光最少,尤其要避免入射激光进入光谱仪的入射狭缝。为此,对于透明样品,最佳的样品布置方案是使样品被照明部分呈光谱仪入射狭缝形状的长圆柱体,并使收集光方向垂直于入射光的传播方向。  拉曼样品主要有:透明液体、透明固体、不透明固体、加温样

激光扫描共聚焦显微镜.技术发展优势

.技术发展优势 2.1 更高的清晰度和分辨率      LSCM 最基本的优势在于利用激光代替传统场光源,通过空间过滤技术消除了聚焦平面以外的次级荧光等信号干扰,可对较厚的样本进行显微 CT,整体对比度提高,从而使得分析区域内的图像更为清晰。同时,ZOOM 功能可使其在不改变物镜的前提下对样本进行放

当共焦显微镜横向扫描间距为1nm时能否实现横向超分辨

共聚焦技术主要是在光路中引入了针孔。针孔可以有效的控制聚焦深度,防止杂质信号的干扰。我觉得问题应该在题主想的太理想了,正如题主所说“ 但是共焦是分时扫描的,就是说我先观察到艾里斑A,扫描到下一处时就对应艾里斑B”;也许实际测量过程中并不一定像题主所说的通过扫描从艾里斑A到艾里斑B,很有可能这两个艾里

显微激光共焦拉曼光谱仪的结构和应用

  通常来说显微激光共焦拉曼光谱仪能够在紫外到近红外的光谱范围内测量物质的拉曼光谱,具有超高的灵敏度,分辨率和重复性,能保证高空间分辨率,是一种非破坏性的微区分析手段,拉曼光谱可以单独和其他技术结合起来使用,方便地确定离子、分子种类的物质结构。  激光共焦拉曼光谱是用来分析物质组分结构等的一种有效光

简介激光显微共焦拉曼光谱仪的滤光器

  激光波长的散射光(瑞利光)要比拉曼信号强几个数量级,必须在进入检测器前滤除,另外,为防止样品不被外辐射源(例如:房间的灯光,激光等离子体)照射,需要设置适宜的滤波器或者物理屏障。安置滤光部件的主要目的是为了抑制杂散光以提高拉曼散射的信噪比。在样品前面,典型的滤光部件是前置单色器或干涉滤光片,它们

激光显微共焦拉曼光谱仪的拉曼效应

  光散射是自然界常见的现象。晴朗的天空之所以呈蓝色、早晚东西方的空中之所以出现红色霞光等,都是由于光发生散射而形成了不同的景观。拉曼光谱是一种散射光谱。在实验室中,我们通过一个很简单的实验就能观察到拉曼效应。在一暗室内,以一束绿光照射透明液体,例如戊烷,绿光看起来就像悬浮在液体上。若通过对绿光或蓝

简介激光显微共焦拉曼光谱仪拉曼位移

  在透明介质散射光谱中,入射光子与分子发生非弹性散射,分子吸收频率为ν0 的光子,发射ν0-ν1的光子,同时电子从低能态跃迁到高能态(斯托克斯线);分子吸收频率为ν0的光子,发射ν0+ν1的光子,同时电子从高能态跃迁到低能态(反斯托克斯线)。靠近瑞利散射线的两侧出现的谱线称为小拉曼光谱;远离瑞利散

激光扫描荧光显微镜

探测装置比较典型。方法是将杂交后的芯片经处理后固定在计算机控制的二维传动平台上,并将一物镜置于其上方,由氩离子激光器产生激发光经滤波后通过物镜聚焦到芯片表面,激发荧光标记物产生荧光,光斑半径约为5-10μm。同时通过同一物镜收集荧光信号经另一滤波片滤波后,由冷却的光电倍增管探测,经模数转换板转换为数

激光片层扫描显微镜

激光片层扫描显微镜(Light SheetFluorescence Microscopy)是一种新型显微系统,具有成像速度快、多视角成像、成像视野大、观察时间长等优点,可以对斑马鱼、果蝇、线虫、拟南介等荧光标记的模式生物进行长时间观察;同时,该设备具有光损伤小、光毒性和光漂白性小等特点,适合胚胎形成

激光共聚焦扫描显微镜

对比激光共聚焦扫描显微镜与传统光学显微镜在高放大倍率下的成像效果。结果显示,激光共聚焦扫描显微镜在高放大倍率下,其成像景深大的优点对于获取高质量的图像有很大的帮助。同时通过激光共聚焦扫描显微镜的激光光源实现单色光成像,可以清晰观察到溅镀了消影层的ITO玻璃。

激光扫描共聚焦显微镜

激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning ConfocalMicroscopy,简称LSCM),在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光,利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,捕捉到微弱的信号或追踪高效的进程以及在亚细胞水平上观察诸如

激光扫描共聚焦显微镜的扫描模块

  扫描模块主要由针孔光栏(控制光学切片的厚度)、分光镜(按波长改变光线传播方向)、发射荧光分色器(选择一定波长范围的光进行检测)、检测器(光电倍增管)组成。荧光样品中的混合荧光进入扫描器,经过检测针孔光栏、分光镜和分色器选择后,被分成各单色荧光,分别在不同的荧光通道进行检测并形成相应的共焦图象,同

共聚焦的共焦显微

共焦显微技术是由美国科学家M.Minsky在1957年提出的,当时的主要目的是消除普通光学显微镜在探测样品时产生的多种散射光。20世纪60年代通过提高扫描精度突破了普通宽场成像的分辨率限制,在20世纪80年代研制成商用共焦显微镜。共焦显微镜分为普通光照明激发和激光照明激发两种类型,而以后者应用最为广

激光扫描共聚焦显微镜现有技术存在的问题

现有技术存在的问题  3.1 快速扫描与高分辨率之间的矛盾      LSCM 通过单个像素扫描获取图像,点扫描特性所依赖的机械构造注定该技术是部相对缓慢的扫描仪器,对于一幅典型的 1024*1024 像素的图像,用一个常用的 2 微秒每个像素点停留时间,仅形成一幅图像的时间就长达超过 2秒。其检测

激光扫描共聚焦显微镜技术的主要应用范围

  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,CLSM)是近代最先进的细胞生物医学分析仪器之一。目前,激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、立体结构重组、动态变化过程等研究,并提供定量荧光测定、定量图像分析等实用研究手段,结合其他相关生物技术,在

激光扫描共聚焦显微镜技术的主要应用范围

三者都是点源逐点扫描成像,通过控制扫描驱动范围,调节放大倍数,主要区别1、极限分辨率不同,缘于放大信号源的差异激光共聚焦:极限分辨率150nm.扫描电镜:20nm~0.8nm.原子力显微镜:极限分辨率0.1nm2、扫描驱动方式不同激光共聚焦:激光转镜控制激光扫描范围和扫描速度。扫描电镜:电磁线圈控制

激光器应用——激光扫描共聚焦显微

iFLEX激光器应用——激光扫描共聚焦显微1,什么是激光扫描共聚焦显微共聚焦显微技术是近十几年迅速发展起来的一项高新研究技术,目前应用领域扩展到细胞学、微生物学、发育生物学、遗传学、神经生物学、生理和病理学等学科的研究工作中,成为现代生物学微观研究的重要工具。激光扫描共聚焦显微镜的主要是利用激光扫描

MEMS激光扫描投影技术

你能想象现在的科学技术已经可以把之前几十公斤重的激光雷达塞进一块比指甲盖还小的芯片中而且还能完成同样的工作吗?利用新世纪的集成电路和 3D 加工技术,一块小小的芯片能够承载比我们以往任何时代都多的功能,而这一技术的潜在应用领域也让芯片业巨头挤破了头去收购相关技术。  2012 年,微机电系统(MEM

激光共聚焦显微镜技术的应用

最近需要做成骨细胞培养的实验,师兄给个建议,说是可以做激光共聚焦显微镜 检测。关于这个我还真不知道该如何下手设计这个实验,网上搜集了一些资料,分享给大家,供参考。激光扫描共聚焦显微镜(laser scanning confocal microscope LSCM )是20世纪80年代发展起来的一项具

激光共焦显微拉曼光谱仪相比传统有什么优势

激光共焦显微拉曼光谱仪比传统的色散型拉曼光谱仪在工作效率,运行速度、分辨率、灵敏度和微量样品分析诸方面都有了很大的提高。它采用先进的光学系统设计及全息滤光片,CCD探测器等先进技术,使仪器的灵敏度及数据采集速度大大提高,总效率(信号/功率!时间)比传统仪器提高了近3个数量级。利用共焦显微拉曼光谱仪作

激光扫描共聚焦显微镜简介

  激光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscope,简称CLSM)是近代生物医学图象仪器。它是在荧光显微镜成象的基础上加装激光扫描装置,使用紫外光或可见光激发荧光探针。  利用计算机进行图象处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图象,以及在亚细胞水平上

激光扫描共聚焦显微镜共享

仪器名称:激光扫描共聚焦显微镜仪器编号:A23000005产地:日本生产厂家:Olympus型号:FV3000RS出厂日期:20230216购置日期:20230216所属单位:化学系>分析中心>光学显微成像放置地点:清华大学生命科学馆141固定电话:01062771139固定手机:131216495

激光扫描共聚焦显微镜背景

  激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope)是20世纪80年代中期发展起来并得到广泛应用的新技术 ,它是激光、电子摄像和计算机图像处理等现代高科技手段渗透,并与传统的光学显微镜结合产生的先进的细胞分子生物学分析仪器,在生物及医学等领域的应用越来越广

Lightsheet激光片层扫描显微镜

Lightsheet激光片层扫描显微镜是一种适用于对大型样品长时间成像的新型显微系统。本次新装机的是蔡司的 Lightsheet Z.1,它既能提供大型样品的光学切片,又几乎无光毒性或光漂白性,同时还有非常高的时间分辨率。它具有出众的多视角激光片层成像系统,能够记录大型活体样品的发育过程,对样品低损

激光扫描共聚焦显微镜展望

LSCM 有着独特的激光扫描成像方式及精确的计算机测量定位系统,是普通显微镜和电子显微镜的飞跃和补充,加上高分辨率、高灵敏度和灵活性空间结构观察的独特优势,其成为生命科学、医学以及材料科学相关的诸多重要分支领域的全新科研实验手段和必备研究工具之一,为许多研究者提供了有力的技术支持和新的探索思路。目前

激光共聚焦显微镜与传统光学显微镜的区别

 激光扫描共聚焦荧光显微镜是一种利用计算机、激光和图像处理技术获得生物样品三维数据、目前较先进的分子细胞生物学的分析仪器。主要用于观察活细胞结构及特定分子、离子的生物学变化,定量分析,以及实时定量测定等。  激光共聚焦显微镜原理:利用放置在光源后的照明针孔,和放置在检测器前的探测针孔,实现点照明和点