免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)的化学性质,并根据需要来选择适宜的固定剂(或固定方法)以及改进固定条件。 目前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂,其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此,简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。 1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3) 试剂:多聚甲醛 40g 0.1mol/L磷酸缓冲液 至1000ml 配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加......阅读全文

实验常用试剂的制备与储藏(二)

100×Denhardt试剂(Denhardt's regent)        依照上表称取各组分,溶于水中定容。过滤除菌及杂质,分装成小份于-20℃贮存。  10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接)       将配制好的缓冲

常用染料和试剂的配制与使用

1. 碘-硫酸法植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素被硫酸水解后,遇碘呈蓝色反应。因此用碘-硫酸法可鉴定细胞壁的成分。试剂配制方法:1% 碘液 将1.5 克碘化钾溶于100 毫升的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1 克碘,震荡溶解。66.5% 硫酸 7 份浓硫酸加入3 份蒸馏水配制而成。配制时要将浓

常用化学试剂分类及用途解析

  1.HPLC级高纯液相色谱溶剂   HPLC试剂具有以下优点:   • 低紫外吸收;   • 非挥发性物质、游离酸、游离碱和水份含量低;   • 可用于荧光检测;   用途:用于液相色谱(LC)样品制备、LC样品分析、LC-MS分析。   2.农残级试剂   农残级试

实验常用试剂的制备与储藏(一)

一.常用贮液与溶液  1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。  1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。  10mol/L乙酸胺(amm

实验常用试剂的制备与储藏(四)

三.常用培养基  LB培养基  将下列组分溶解在0.9L水中:    如果需要用1N NaOH(~1ml)调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。  SOB培养基  将下列组分溶解在0.9L水中:      用水补足体积到1L。分成100

常用试剂的性质与制备纯化(二)

9.N,N-二甲基甲酰胺(DMF)  沸点149~156℃,密度d=0.9487,折光率n 20D =1. 4305,无色液体,能与多数有机溶剂和水互溶,是优良的有机溶剂。市售的DMF含有少量水、胺和甲醛等杂质。在常压蒸馏时有些分解,产生二甲胺与一氧化碳,若有酸或碱存在时,分解加快,在加入固体氢氧化

免疫细胞化学法的简介

  肽类与蛋白质种类繁多,均具有抗原性,当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种动物体内,则产生与该抗原相应的特异性抗体(免疫球蛋白);将抗体从血清中提出后,结合上某种标记物,即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片标本孵育,抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合,结合部位被标记物显示,则在显微镜下

免疫细胞化学法的分类

  ①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标

分泌肿瘤免疫细胞化学(3)

  三、甲状腺髓样癌  由甲状腺滤泡旁细胞(C细胞)产生的恶性肿瘤。此瘤在光镜下与甲状腺非典型腺瘤、未分化癌及转移癌有时难以鉴别。免疫细胞化学染色可见瘤细胞降钙素阳性反应,降钙素免疫反应物常聚积于瘤细胞核周胞浆中,此项检查具有诊断意义。电镜下,瘤细胞中可见二种分泌颗粒,I型颗粒直径约280nm,含有

免疫细胞化学与图像分析

在细胞生物学中,一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多,只要有一个环节 失误就会影响实验结果,除了需要精制的药品外,还需要熟练的技术。那么,做成了理想的标本后,如何进行观察,才能获得尽量多的的各种定量信息,而且使这些

免疫细胞化学与图像分析

在细胞生物学中,一个常见的问题是如何获取与细胞功能相关的各种定量测量信息。在免疫细胞化学中也存在同样的问题。制作免疫细胞化学标本环节 较多,只要有一个环节 失误就会影响实验结果,除了需要精制的药品外,还需要熟练的技术。那么,做成了理想的标本后,如何进行观察,才能获得尽量多的的各种定量信息,而且使这些

分子生物学常用试剂配置

一、分子生物学常用贮存液的配制1、30%丙烯酰胺溶液【配制方法】将29g丙烯酰胺和1g N,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml.用滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于室温。【注意】丙烯

常用化学试剂保存注意事项总结

化学试剂在贮存时常因保管不当而变质,有些试剂容易吸湿而潮解或水解;有的容易跟空气里的氧气、二氧化碳或扩散在其中的其他气体发生反应,还有一些试剂受光照和环境温度的影响会变质。因此,现根据不同的生物试剂的物理性质和化学性质的不同,我司技术人员对常用化学试剂保存注意事项进行以下总结: 一、防挥发:

实验室常用有机试剂的回收利用

  在环境监测和实验室分析测定时,常常使用三氯甲烷、四氯化碳和石油醚等有机溶剂。这些试剂化学性质不活泼、不助燃,与酸、碱不起作用,处理起来比较困难。其易挥发,具有一定的毒性,污染环境。本文根据实验室试验及使用试剂的要求,探讨有机试剂的回收和循环利用。  一、回收方法:  1.活性碳吸附法  活性碳吸

常用化学试剂保存注意事项总结

ELISA试剂盒,化学试剂在贮存时常因保管不当而变质。有些试剂容易吸湿而潮解或水解;有的容易跟空气里的氧气、二氧化碳或扩散在其中的其他气体发生反应,还有一些试剂受光照和环境温度的影响会变质。因此,现根据不同的生物试剂的物理性质和化学性质的不同,我司技术人员对常用化学试剂保存注意事项进行以下总结:一、

实验常用试剂的几种制备与储藏方法

一.常用贮液与溶液    1mol/L亚精胺(Spermidine):溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。    1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。    10mol/L乙酸

ELISA试剂盒常用的几种方法

ELISA常用的几种方法是:一、双抗体夹心法测定抗原将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面;加抗原,形成抗原-抗体复合物; 加抗原免疫第二种动物获得的抗体,形成抗体抗原抗体复合物;加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体); 加底物。底物的降解量=抗原量。二、直接法测定抗原 将抗原吸附在载体表面;加酶标

病理制片技术——常用试剂及染液的配制

1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。2.配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。(2)将200 ml无水乙醇注入一只30

【体外诊断试剂】化学发光常用的化学试剂及其原理

化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。因此,一个化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:第一:反应必须提供足够的能量( 170 ~ 300KJ / mol ) ,第二,这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并

免疫细胞化学法的技术特点

免疫细胞化学是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术,根据抗原与抗体特异性结合的特点,检测细胞内某种多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。

免疫细胞化学与图像分析2

 六、实例介绍  因为将免疫细胞化学方法与图像分析结合起来进行研究的论文在国内国外都还不多。在第六届国际学术会议上发表的90多篇论文中只有1篇,因此在实例介绍中,包括一部分不是免疫细胞化学方法,而是用其他组织学方法与图像分析结合起来研究,但这种方法对研究免疫细胞化学标本也可借鉴,从中可得到一些启发的

免疫细胞化学染色操作规程

一、材料和试剂1、玻片:须用免疫组化专用玻片,或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液,用PBS配。3、3%牛血清白蛋白(BSA),用PBS配。4、0.01M  PH7.4  PBS5、1% BSA-PBS(含0.05% Tween20)6、AEC底物(1)底物缓冲液(20X

免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术的分类

  1)按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。  2)按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法)。与直接法相比,间接法的灵敏度提高了许多。  3)按结合方式

免疫细胞化学法的技术分类

①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标记物

常用不稳定试剂盒的要求

ELISA试剂盒提示您常用不稳定试剂盒的要求:A、易挥发、低燃点的试剂盒要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。B、与水蒸气、水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。C、与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。D、易与氧气作用的试剂盒应将其固体或晶体密封保存

分子生物学实验常用试剂配置

常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。10mol/L乙酸胺(ammonium ac

教你如何对常用有机试剂进行回收再利用

  在环境监测和实验室分析测定时, 常常使用三氯甲烷、四氯化碳和石油醚等有机溶剂。这些试剂化学性质不活泼、不助燃,与酸、碱不起作用,处理起来比较困难。其易挥发,具有一定的毒性,污染环境。本文根据实验室试验及使用试剂的要求, 探讨有机试剂的回收和循环利用。   回收方法   1.活性碳吸附法

实验室常用化学试剂有效期

  化学试剂是进行化学研究、成分分析的相对标准物质,是化学实验课程重要的消耗性物资,广泛用于物质的合成、分离、定性和定量分析。试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。在实际使用过程中,人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性,其实大谬不然。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期,化学试剂还

分子生物学实验常用试剂配置

一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammo

收藏丨实验室常用试剂管理及分类!

一、实验室试剂安全管理 1、所有药品、标样、溶液都应有标签,绝对不要在容器内装入与标签不相符的药品。2、禁止使用实验室的器皿盛装食物,也不要用茶杯、食具盛装药品,更不要用烧杯等当茶具使用。3、浓酸、烧碱具有强烈的腐蚀性,切勿溅到皮肤和衣服上,稀释硫酸时,必须用硬质耐热的烧杯或锥形瓶中进行,只要将浓硫