免疫细胞化学常用试剂介绍

一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性,在用于免疫细胞化学研究之前,常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同,因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此,在进行免疫细胞化学研究之前,很有必要了解所要研究的物质(蛋白质或肽类)的化学性质,并根据需要来选择适宜的固定剂(或固定方法)以及改进固定条件。 目前,免疫细胞化学研究中常用的固定剂仍为醛类固定剂,其中以甲醛类和戊二醛最为常用。在此,简要介绍几种目前较为常用和推荐的固定剂,以供读者选用。 1.4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3) 试剂:多聚甲醛 40g 0.1mol/L磷酸缓冲液 至1000ml 配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加......阅读全文

Absin-细胞生物学常用试剂——细胞染料

IP(碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测。碘化丙啶是一种核酸染料呈红色,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红,用PI 单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡。 Annexin

化学发光常用的化学试剂及其原理

化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。因此,一个化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:第一:反应必须提供足够的能量( 170 ~ 300KJ / mol ) ,第二,这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并

分子生物学常用试剂的配制

1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制  配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:  细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g  细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g  NaCl 10g  摇动容器直至溶质完全溶解,用5mo

分子生物学常用试剂的配制

1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract)5g细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10gNaCl10g摇动容器直至溶质完全溶解,用5mol/LNaOH(约0.2

分子生物学实验常用试剂配置

一. 常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammon

生物化学实验常用试剂的配制方法

  1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。   2、0.5mol/L盐酸溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离

常用不稳定试剂的分类及要求

① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较

实验室常用于萃取的试剂有哪些

用于萃取的溶剂要求:  两种液体互不相溶,需要萃取的物质在两液体中溶解度差别很大的时候可以进行萃取。如四氯化碳加入溴水,溴单质就会从水中溶解入四氯化碳。  选用的萃取剂的原则:  ①和原溶液中的溶剂互不相溶;  ②对溶质的溶解度要远大于原溶剂;  ③易于挥发;  ④萃取剂不能与原溶液的溶剂反应。常见

化学发光常用的化学试剂及其原理

  化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤,即化学激发和发光。因此,一个化学反应要成为发光反应,必须满足两个条件:第一:反应必须提供足够的能量( 170 ~ 300KJ / mol ),第二,这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态,并且有足

神经内分泌肿瘤免疫细胞化学

人体存在两种形式分布的内分泌细胞,一种是内分泌细胞群集形成内分泌器官,如垂体等,另一种是内分泌细胞单个散在于其它组织细胞之间,形成弥散的内分泌系统(diffuse en-docrine system)。通过免疫细胞化学方法及超微结构观察,人们对内分泌细胞的分布形态与功能等不断有新的发现。1968年,

内分泌肿瘤免疫细胞化学(2)

 (三)促甲状腺激素瘤  甚为少见,约占1%,常发生于长期甲状腺功能低下的病人,由于缺乏甲状腺素,通过负反馈作用刺激其细胞增生。光镜下常为嫌色性细胞腺瘤,胞浆含少量PAS阳性物质。电镜下分泌颗粒稀疏。  (四)促肾上腺皮质激素腺瘤  此瘤能合成促肾上腺皮质激素(ACTH)和其它肽类如内啡肽等,可引起

酶免疫细胞化学染色操作指南1

一、材料和试剂1、玻片:须用免疫组化专用玻片,或用2%多聚赖氨酸包被处理玻片。2、5-10%正常山羊血清封闭液,用PBS配。3、3%牛血清白蛋白(BSA),用PBS配。4、0.01M pH7.4 PBS5、1% BSA-PBS(含0.05% Tween20)6、AEC底物(1)底物缓冲液(20X)

酶免疫细胞化学染色操作指南2

2、加3% H2O2,细胞片20ul/孔,培养板100ul/孔,使充分覆盖住细胞。3、室温10分钟后,甩掉 H2O2,用PBS轻轻淋洗2分钟。用滤纸吸干细胞周围水份,96孔在滤水纸上扣干,但注意保持细胞湿润。三、封闭细胞片用5-10%正常山羊血清(20ml/孔),细胞板用2-5%BSA(PBS配制)

免疫细胞化学技术观察细胞成分实验

实验方法原理免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上,吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术,其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体,通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合,形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物,因此可用荧光显微镜或普通光学显微镜观察到复合物的存在,达到检测

免疫细胞化学和免疫荧光实验

载玻片/盖玻片处理聚醚酰亚胺或多聚赖氨酸在室温下包被盖玻片1小时。无菌水冲洗盖玻片(3次 ,每次5分钟)。可将盖玻片干完全干燥,并在紫外光下消毒至少4小时。在玻片上种植细胞,或准备细胞离心涂片器,或做好涂抹准备。磷酸盐缓冲液( PBS )进行简短的冲洗。第一步:细胞固定用预冷的甲醇、丙酮( 1-10

免疫细胞化学技术观察细胞成分实验

            实验方法原理 免疫细胞化学是在细胞化学技术的基础上,吸收免疫学的理论和技术发展起来的一项技术,其基本原理是用荧光素或酶等标记物或显色物标记特异性抗体,通过免疫学中的抗原抗体反应与细胞内的相应抗原结合,形成带有荧光素或显色物的抗原抗体复合物,因

细胞化学技术2

二、 免疫细胞化学技术 免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)是根据免疫学原理,利用抗原抗体特异结合的特性定位组织和细胞中特异大分子的一类技术。它包括光镜水平(简称免疫组化)和电镜水平(简称免疫电镜)的免疫细胞化学技术。应用免疫细胞化学技术可在原位检测细胞的各种大分子,

常用层析方法介绍

◆吸附层析吸附剂的吸附力强弱,是由能否有效地接受或供给电子,或提供和接受活泼氢来决定。被吸附物的化学结构如与吸附剂有相似的电子特性,吸附就更牢固。常用吸附剂的吸附力的强弱顺序为:活性炭、氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙、磷酸钙、石膏、纤维素、淀粉和糖等。以活性炭的吸附力最强。吸附剂在使用前须先用加热脱水

EMC常用天线介绍

天线在EMC、RF测试,测量中运用相当普遍,常用天线如下:1、双锥天线:常用于RSE替代法测试。常用工作频段:30MHz~300MHz2、对数天线:常用于辐射场地NSA校准。常用工作频段:30MHz~1GHz3、对数周期天线:常用于辐射骚扰/辐射杂散低频测试。常用工作频段:30MHz~3GHz4、三

常用生物软件介绍

一、Microarray软件1. Array Designer 4.25 Build 42501,为微阵列批量设计cDNA引物和寡核苷酸引物的工具,适用于Windows和Linux系统。斯坦福编写的软件系列:2. ScanAlyze,Microarray图像分析软件,从单一或双色荧光杂交产生的荧光图

常用模式生物介绍

模式生物是可用于研究与揭示生命体某种具有普遍规律的生物现象的一类生物。有3大特点:有利于回答研究者关注的问题,生理特征能够代表生物界的某一大类群;世代短、子代多、易于在实验室内饲养繁殖、遗传背景清楚;容易进行实验操作,特别是遗传操作以及表型分析下面我们来看看有哪些经典的模式生物:大肠杆菌 Esche

常用浓缩方法介绍

在一些实验中,一些被测物经分离、净化后,样液的量比较多,被测定成分含量极其微小。例如痕量测定实验,在测定前需要浓缩样液,提高浓度,这样能提高分析的灵敏度。但是存在于这些被测物中的污染物存在性质不稳定,易氧化分解,浓缩过程一定应注意防止氧化分解,尤其是在浓缩至近干的时候,极易发生氧化、分解,这时需要在

常用采样方法介绍

1、三层五点法:按堆形和面积大小采用分区设点,或按食品堆高度采用分层采样、分区设点,每区面积不超过50m2,各设中心四角共五点;区数在两个以上的两区界线上的两个点为共有点。将样品分为上、中、下三层,在各层的四角和中间各取等量样本混合后,再取检验所需样本。2、刮涂法:在酒精灯火焰下燃烧灭菌的小刀(放凉

免疫检测试剂中常用的防腐剂

免疫检测试剂中常用的防腐剂有硫柳汞、叠氮钠、抗生素等。1.        叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;2.        硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;3.        市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。4.       

原位杂交组织化学常用试剂及处理

一、杂交前准备  (一)DEPC水是经DEPC处理过的灭菌蒸馏水。  DEPC即二乙基焦碳酸酯(diethylprocarbonate),可灭活各种蛋白质,是RNA酶的强抑制剂。原位杂交在杂交及其以前的各步处理中,所有液体试剂都应经DEPC处理。方法是:取市售DEPc 1ml,加入1L待处理水(蒸馏

生物化学实验常用试剂的配制方法二

11、20%乙酸溶液 □组份浓度 20% □配制量 1.2L □配置方法 量取冰乙酸300mL,用去离子水稀释至1200mL。 12、30%(W/V)Acrylamide □组份浓度 30%(W/V)Acrylamide 0.05% □配制量 1L □配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中

最常用却最毒的七种化学试剂!

  DMSO是二甲基亚砜,用途广泛。用作乙炔、芳烃、二氧化硫及其他气体的溶剂以及腈纶纤维纺丝溶剂。是一种即溶于水又溶于有机溶剂的极为重要的非质子极性溶剂。对皮肤有极强的渗透性,有助于药物向人体渗透。也可作为农药的添加剂。也是一种十分重要的化学试剂。   DMSO也是一种渗透性保护剂,能够降低细

免疫检测试剂中常用的防腐剂

免疫检测试剂中常用的防腐剂有硫柳汞、叠氮钠、抗生素等。1. 叠氮钠是HRP的抑制剂,凡是和HRP接触的试剂,一定不能用;2. 硫柳汞在ELISA试剂中可普遍使用,但因其有毒,较少使用;3. 市面许多试剂盒产品,用抗生素做防腐剂较多,如庆大。4. 如果试剂仅在实验室短期使用,其实并不需加防腐剂,常规试

分子生物学常用试剂的配制(一)

  1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制   配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:   细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g   细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g   NaCl 10g   

生物化学实验常用试剂的配制方法三

21、45%乙醇溶液 □组份浓度 45% □配制量 1L □配置方法 量取无水乙醇450mL,加入去离子水550mL,混匀。 22、5%的十二烷基硫酸钠溶液 (W/V) □组份浓度 5% □配制量 0.1L □配置方法 称取5.0g十二烷基硫酸钠,溶于100mL4%的乙醇溶液中。 23、三氯甲烷-异