病理制片技术——常用试剂及染液的配制

1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。2.配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。(2)将200 ml无水乙醇注入一只300 ml的三角烧瓶内,加入10 g苏木精摇动使之完全溶解。(3)将已完全溶解于无水乙醇的苏木色精液体缓缓注入已完全溶解的2000 ml硫酸铝钾液体中,继续加热至液体沸腾关闭电源。此时液体应呈透明的玫瑰红色。(4)将3 g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓(一定要缓慢)方入未被氧化的苏木精液体中,边加氧化汞边搅拌。此时苏木精被氧化,液体的颜色会迅速地变成深蓝紫色。(5)氧化汞加完后用玻棒充分的搅拌液体并继续加热至液体再度沸腾关闭电源。(6)用湿毛巾保护,将装有停止沸腾的热苏木精的三角烧瓶转移至冷水中迅速降温至室温。(7)密封瓶口室温避......阅读全文

病理制片技术——常用试剂及染液的配制

1.试剂准备:苏木精10 g,硫酸铝钾80 g,无水乙醇200 ml,蒸馏水2000 rnl,氧化汞3 g,冰乙酸40ml。2.配制步骤(1)将2000 ml蒸馏水注入一只3000 的大号三角烧瓶内,加入80 g硫酸铝钾后置电炉或电磁炉上加热硫酸铝钾完全溶解。(2)将200 ml无水乙醇注入一只30

病理制片技术——常用特殊染色

1.第一步准备工作:配制六胺银染液,将10%硝酸银2.5ml倒入干净的染色缸内,加入2%硼砂5ml,液体呈乳白色,再加入3%乌洛托品40ml,染液逐渐呈透明状。2.第二步染色过程:事先把温箱调至60℃备用,切片经脱蜡至水,用1%过碘酸氧化10 min,水洗,然后切片放人六胺银染液放置60℃温箱1

病理制片技术取材

一、概念取材是将送检标本进行客观描述并将病变部位组织切成厚薄适度的小片后装入小盒(进入组织脱水程序),取材至关重要。二、取材环境取材室由取材台、记录桌、标本陈列架、电脑查询等组成;取材台应有良好的排风、进出水系统,配备齐全的刀、剪、镊、尺等基本工具和备用固定剂,记录桌应备 有打号机(无时应用铅笔

病理制片技术——封片

封片是将组织切片封固保存于载玻片与盖玻片之间,使之不与空气发生接触,防止其氧化、褪色,利于镜检观察及保存。一、手工封片手工封片应注意以下七点。(1)所用树胶浓度要适中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀时易溢出玻片,当二甲苯挥发后,组织切片就会收缩产生胶不匀并出现大片气泡。太浓时,滴在玻片上树胶不易

病理制片技术——包埋

一、意义组织块经过固定、脱水、透明、浸蜡等处理后,用包埋剂(如石蜡、树脂、塑料等)将其包制成含组织块的蜡块或塑料块等的过程称为包埋。不同的包埋方法有不同的要求,经包埋后,组织可达到一定的硬度和韧度,有利于切成理想的薄片。二、包埋步骤先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具),而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱

病理制片技术——常规染色

苏木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,简称HE染色方法,是生物学、细胞学与组织学最广泛应用的染色方法。在病理科称为常规染色 方法。病理学的诊断都是以HE方法为基础的。染色的目的是把组织切片或细胞涂片等浸入染料及其他染色剂配成的染色液中,经过适当的时间和处理,

病理制片技术——组织脱水

组织经固定后会有大量水分,组织脱水是用某些溶剂逐渐将组织内的水分置换出来,以利于透明剂和石蜡的渗入。 一、手工脱水 1.器械准备:大标本缸6个,浸蜡用金属缸3个,脱水篮,恒温烤箱。 2.日常工作程序见表5.1。 表5.1 手工脱水日常工作程序

常用试剂配制-4

Phytohemaglutinin (PHA)Available as kidney bean lectin. It is typically used as a stock solution of 10-20 g/ml in balanced salt solution. For tissue c

常用试剂配制-3

Magnesium chloride (MgCl MW 95.23)1 mMDissolve 95.2 mg of magnesium chloride per final volume of 1 liter.4 mMDissolve 0.381 grams of magnesium chlorid

常用试剂配制-2

Acetone / Formaldehyde FixativeAcrylamide Gel, denaturingAcrylamide Gel, nondenaturingAlkaline Phosphatase Buffer 1 (Glycine Buffer, 0.1 M, pH 10.4)Al

常用试剂配制-5

Sodium citrate (MW 294.10)0.09 MDissolve 2.65 grams of sodium citrate to a final concentration of 100 ml with water.Sodium citrate/formaldehyde (for s

病理制片技术——组织石蜡切片

组织经石蜡包埋后制成的蜡块,用切片机制成切片的过程为石蜡切片法。石蜡切片法现使用的切片机有平推式切片机、轮转式切片机两种。一、平推式切片机石蜡切片法1.切片前的准备:清洗过的载物片(或免清洗的),毛笔,铅笔,小竹片,水槽,雾化器,摊片器,切片刀,刀架。2.切片制作步骤:刀架的粗削部放在头端,在切片机

病理制片技术——冷冻切片的制作

一、概述 冷冻切片是利用物理降温的方法将新鲜的组织标本冷冻使其产生一定的硬度进行切片的技术方法。与石蜡切片相比,由于冷冻切片不需脱水包埋因此制片速度 快,是为手术进行中的临床医师提供病理诊断的良好方法。此外由于冷冻切片的标本是未经固定的新鲜组织,因此冷冻切片也是脂肪染色、酶

常用试剂配制小常识

实验室常用试剂配制有要求,70%的酒精杀菌力最强,,它能使蛋白质脱水和变性,在3~5分钟内杀死细菌。高浓度的酒精杀菌能力反而减弱。天平的保持、清洗有要求。 1、哪种浓度的酒精消毒效果最好?70%酒精杀菌力最强,它能使蛋白质脱水和变性,在3~5分钟内杀死细菌。因此,它用于消毒和防腐,适用于皮肤和器械、

常用HE染色试剂配制方法

 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。  一、苏木素  (1) Harris苏木素液  配方: labdd.com  苏木精1 g ;无水乙醇10 ml;蒸馏水200 ml;钾明矾20g;HgO 0.5 g  

常用HE染色试剂配制方法

苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先将苏木精溶于无水乙醇中,备

常用染色液和试剂的配制

一、埃利希(Ehrlich)氏苏木精染液 先将苏木精2g溶于100mL乙醇中,再加冰醋酸10mL,混合后加蒸馏水100mL和100mL甘油,然后加硫酸铝钾(约10g)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。

DNA探针标记常用试剂的配制

  (1)10 ×缺口平移缓冲液:200mmol/l Tris-HCl,pH7.4含50mmol/L MgCl2;100mmol/Lβ-巯基乙醇、1mg/ml BSA。   (2)缺口平移反应终止液:200mmol/L NaCl;10mmol/l Tris-HCl,pH7.4; 11mmol/L

吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液的配制

吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液   A液:美蓝(methylene blue) 0.6g  95%酒精 30ml  B液:KOH 0.01g  蒸馏水 100ml  分别配制A液和B液,配好后混合即可。

常用染料和试剂的配制与使用

  1. 碘-硫酸法   植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素被硫酸水解后,遇碘呈蓝色反应。因此用碘-硫酸法可鉴定细胞壁的成分。   试剂配制方法:   1% 碘液 将1.5 克碘化钾溶于100 毫升的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1 克碘,震荡溶解。   66.5% 硫酸 7 份

常用染料和试剂的配制与使用

1. 碘-硫酸法植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素,纤维素被硫酸水解后,遇碘呈蓝色反应。因此用碘-硫酸法可鉴定细胞壁的成分。试剂配制方法:1% 碘液 将1.5 克碘化钾溶于100 毫升的蒸馏水中,待完全溶解后,加入1 克碘,震荡溶解。66.5% 硫酸 7 份浓硫酸加入3 份蒸馏水配制而成。配制时要将浓

免疫共沉淀试剂配制及技术路线

实验概要本实验介绍了免疫共沉淀所需试剂配制及操作步骤。主要试剂1. RIPA Buffer配制基础成分: Tris-HCl(缓冲液成分,防止蛋白变性) NaCl(盐份,防止非特异蛋白聚集) NP-40(非离子去污剂,提取蛋白;用H2O配制成10%储存液) 去氧胆酸钠(离子去污剂,提取蛋白;用H2O配

免疫共沉淀试剂配制及技术路线

实验概要本实验介绍了免疫共沉淀所需试剂配制及操作步骤。主要试剂1. RIPA Buffer配制基础成分: Tris-HCl(缓冲液成分,防止蛋白变性) NaCl(盐份,防止非特异蛋白聚集) NP-40(非离子去污剂,提取蛋白;用H2O配制成10%储存液) 去氧胆酸钠(离子去污剂,提取蛋白;用H2O配

美蓝(LevowitzWeber)染液的配制方法

美蓝(Levowitz-Weber)染液 (实验62)在52ml95%酒精和44ml四氯乙烷的三角烧瓶中,慢慢加入0.6g氯化美蓝(met hylene blue chloride),旋摇三角烧瓶,使其溶解。放5—10℃下,12—24小时,然后加入4ml冰醋酸。用质量好的滤纸如Whatman

全血细胞培养染色体技术常用试剂配制

一、国内实验室应用试剂配制(一)培养液(1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。(2)小牛血清商品:成都生物制品厂。(3)植物凝集素(PHA):自制或成品(重庆药检所)。(4)p

全血细胞培养染色体技术常用试剂配制

 (一)培养液    (1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。    (2)小牛血清商品    (3)植物凝集素(PHA)    (4)pH调整液:5% NaHCO3溶液高压灭

常用HE染色试剂配制方法临检基础

常用HE染色试剂配制方法: 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先

生物化学实验常用试剂的配制方法

  1、0.5mol/L氢氧化钠溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确称取氢氧化钠40g。 2.用去离子水溶解并稀释至2L。   2、0.5mol/L盐酸溶液 □组份浓度 0.5mol/L □配制量 2L □配置方法 1.准确量取盐酸83.4mL。 2.用去离

分子生物学常用试剂的配制

1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract)5g细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10gNaCl10g摇动容器直至溶质完全溶解,用5mol/LNaOH(约0.2

分子生物学常用试剂的配制

1.LB(Luria-Bertani)培养液、平板的配制  配制每升LB培养液,应在950ml去离子水中加入:  细菌培养用酵母提取物(bacto-yeastextract) 5g  细菌培养用胰化蛋白胨(bacto-tryptone)10g  NaCl 10g  摇动容器直至溶质完全溶解,用5mo