RNA萃取实验前必读成功经验法则大公开

Lab 的经验和客户的难题以华联基因体实验室的长期以来承接客户 RNA 检体的经验来说,我们经常遇到的问题:(1)RNA 的总量不够;(2)RNA 有严重的盐类污染;(3)RNA 有严重的有机溶剂污染;(4)DNA 污染;(5)样品降解严重。前四项问题都还好解决,只需要再次萃取或进行纯化即可解决,但是样品降解就较为棘手,常常因重新准备检体一来一往, 耗掉不少心力和时间,最后也拿不到好的结果。客户经常会问为什么执行芯片实验会如此要求RNA 质量呢? 而其他的检测方法如实时定量聚合连锁反应(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction, Q-PCR)却不需要?回答这个问题前就要从实验的原理说起,简单 的讲 Q-PCR 的检测原理是针对要检测的基因,设计一对基因特异性的引子,透过反转录反应(RT)配合PCR 的放大方式和及时侦测放大的产物量,藉以回推原始的RNA ......阅读全文

萃取实验

现用CCl4从溶有碘的氯化钠溶液中萃取碘并用分液漏斗分离两种溶液。其实验操作可分解为如下几步:A.把盛有溶液的分液漏斗放在铁架台的铁圈中;B.把50 mL混合溶液和15 mL CCl4加入分液漏斗中,并盖好玻璃塞;C.检查分液漏斗活塞和上口的玻璃塞是否漏夜;D.倒转漏斗用力振荡,并不时旋开活塞放气,

萃取法

利用溶质在互不相溶的溶剂里溶解度的不同,用一种溶剂把溶质从另一溶剂所组成的溶液里提取出来的操作方法。例如,用四氯化碳从碘水中萃取碘,就是采用萃取的方法。萃取分离物质的操作步骤是:把用来萃取(提取)溶质的溶剂加入到盛有溶液的分液漏斗后,立即充分振荡,使溶质充分转溶到加入的溶剂中,然后静置分液漏斗。待液

微波萃取

微波萃取又称微波辅助提取( Microwave -assisted Extraction,MA E),是指使用适当的溶剂在微波反应器中从植物 、矿物 、动物组织等中提取各种化学成分的技术和方法 [1]  。微波是指频率在 300 MHz至300 GHz 的电磁波,利用电磁场的作用使固体或半固体物质中

固相微萃取直接萃取法介绍

  直接萃取方法中,涂有萃取固定相的石英纤维被直接插入到样品基质中,目标组分直接从样品基质中转移到萃取固定相中。在实验室操作过程中,常用搅拌方法来加速分析组分从样品基质中扩散到萃取固定相的边缘。对于气体样品而言,气体的自然对流已经足以加速分析组分在两相之间的平衡。但是对于水样品来说,组分在水中的扩散

萃取精馏原理及萃取剂的选择

萃取精馏是向混合液中加入第三组分(称为萃取剂或溶剂)以改变原组分的挥发度而得以分离。此处要求萃取剂的沸点较组分的沸点高得多,且不与组分形成恒沸液。萃取精馏常用于分离各组分沸点(挥发度)差别很小的溶液。 对于萃取精馏来说,萃取剂常常可以选择出许多种。一般说来,选择萃取剂的主要依据如下: (1)萃取剂的

液液萃取常用什么仪器进行萃取

超临界CO2萃取作为一种单元技术,兼有高产率和高效率的特性。超临界CO2萃取中药,提取率高,有效成分不被破坏;并且最大限度地获取有用成分的同时,能选择性地萃取与分离。通过选择萃取压力等条件可以将需要的某一类成分选择性地萃取出来,也可以通过优化分离条件选择性地将目标成分与杂质进行初步分离,从而富集目标

中性萃取剂中性含硫萃取剂

中性含硫萃取剂中性含硫萃取剂对一些贵金属有很强的萃取能力,而对它们的选择萃取性能也较好。根据皮尔逊(Pearson)的硬软酸碱原理,萃取剂中作为电子给予体的硫是软碱,而汞、铂、钯、金、银、铊、碲等作为电子接受体则是软酸,按硬软酸碱原则中硬亲硬,软亲软的规律,含硫类萃取剂可与贵金属形成稳定的配合物而被

固相萃取正相固相萃取

正相固相萃取所用的吸附剂都是极性的.取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用,其中包括了氢键,π—π键相互作用,偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极相互作用以及其他的极性-极性作用。

液液萃取常用什么仪器进行萃取

萃取又称溶剂萃取或液液萃取(以区别于固液萃取,即浸取),亦称抽提(通用于石油炼制工业),是一种利用相似相溶原理,用液态的萃取剂处理与之不互溶的双组分或多组分溶液,实现组分分离的传质分离过程。萃取又称溶剂萃取或液液萃取(以区别于固液萃取,即浸取),亦称抽提(通用于石油炼制工业),是一种利用相似相溶原理

固相萃取小柱可提高萃取效率

 萃取柱的活化处理:选一种溶剂通过SPE小柱,以润湿和活化SPE填料,试分析物能与固相表面紧密接触,易于发生吸附作用,还可除去柱内可能存在的杂质,减少污染;之后还须选择一种极性和pH值与样品基体相似的溶液替换溶剂,以使样品溶液与吸附剂表面良好接触,提高萃取效率。SPE的一般做法是:利用选择性吸附与选

微波萃取与其它萃取方法的比较

 微波萃取技术与现有其他的萃取技术相比有明显的优势。化学溶剂萃取法耗能大、耗材多,耗时长,提取效率低,工业污染量大。超临界流体提取在提取效率上得到大大提高,但其方法要求的装备复杂,溶剂选择范围窄,需高压力容器和高压泵,故投资成本较高,建立大规模提取生产线有工程难度。 国外有关科研人员研究了从

如何使用索氏萃取法进行萃取

就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶利萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,置于提取器中,提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过提取器的支管上升,被冷凝后滴入提取器

萃取精馏原理及萃取剂的选择

萃取精馏是向混合液中加入第三组分(称为萃取剂或溶剂)以改变原组分的挥发度而得以分离。此处要求萃取剂的沸点较组分的沸点高得多,且不与组分形成恒沸液。萃取精馏常用于分离各组分沸点(挥发度)差别很小的溶液。 对于萃取精馏来说,萃取剂常常可以选择出许多种。一般说来,选择萃取剂的主要依据如下: (1)萃取剂的

如何使用索氏萃取法进行萃取

就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶利萃取效率又高。萃取前先将固体物质研碎,以增加固液接触的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,置于提取器中,提取器的下端勺盛有溶剂的圆底烧瓶相连,上面接回流冷凝管。加热圆底烧瓶,使溶剂沸腾,蒸气通过提取器的支管上升,被冷凝后滴入提取器

萃取仪的射流萃取器相关介绍

  ①萃取效率高≥95%  ②萃取速度快,几分钟可以萃取一个样品  ③重现性高(回收率95-100%)  ④无劳动强度  ⑤操作简单  ⑥工作噪音低,省时、省力  ⑦清洗方便  萃取效率:≥95%  萃取效率波动:不超过±5%  最佳取样量:CQQ-500型为200 mL  使用电源:交流220V

微波萃取的微波萃取的制备系统

微波的发生和试样的萃取都是在微波试样的制备系统中进行的,故微波萃取装置一般要求为带有功率选择和控温、控压、控时附件的微波制样设备。微波萃取罐结构组成:内萃取腔、进液口、回流口、搅拌装置、微波加热腔、排料装置、微波源、微波抑制器。CEM MARS是具备精确化学反应过程控制的微波加速反应系统,控制, 显

固相萃取固相萃取柱

固相萃取柱(英文, 简称SPE column,或Solid Phase extraction Cartridges,简称SPE cartridges)是从层析柱发展而来的一种用于萃取、分离、浓缩的样品前处理装置。主要应用于各种食品、农畜产品、环境样品以及生物样品中目标化合物的样品前处理。固相萃取技术

固相萃取与固相微萃取

固相萃取(Solid Phase Extraction  SPE)就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的。  与液-液萃取相比固相萃取有很多优点:固相萃取不需要大量互不相溶的溶剂,处理过程中不会产生

萃取钒用工艺及离心萃取设备

钒萃取工艺流程:1、 浸出矿石中的钒主要以(Ⅲ)形式与6次配位的三价铝呈类质同象存在于云母晶格中,云母的分子式为K(Al,V)2(OH)2AlSi3O10。将钒从云母中浸出需破坏云母结构,在一定温度和酸度下,氢离子进入云母中置换Al3+,使离子半径发生变化,从而把钒释放出来并氧化成高价被酸溶解。2、

液相萃取法和气相萃取法

相同:兼具分离和分析功能,均可以在线检测主要差别:(1)操作条件差别(2)进样方式差别(3)检测器差别(4)流动相差别(5)分析对象差别详细:(1)操作条件差别 GC:加温操作 HPLC:通常室温操作,高压泵操作(2)进样方式差别 GC:样品需加热气化或裂解 HPLC:样品制成溶液即可(3)检测器差

萃取精馏原理及萃取剂的选择

萃取精馏是向混合液中加入第三组分(称为萃取剂或溶剂)以改变原组分的挥发度而得以分离。此处要求萃取剂的沸点较组分的沸点高得多,且不与组分形成恒沸液。萃取精馏常用于分离各组分沸点(挥发度)差别很小的溶液。 对于萃取精馏来说,萃取剂常常可以选择出许多种。一般说来,选择萃取剂的主要依据如下: (1)萃取

萃取器的萃取塔的分类介绍

  萃取塔的作用是实现两液相之间的质量传递,其作用是使萃取系统的两液相之间能充分混合、紧密接触并伴有高强度的湍动,获得较高的传质效率;同时完成萃取相与萃余相较好的分开。常见的萃取塔有搅拌式萃取塔、喷洒式萃取塔、填充式萃取塔和振动板式萃取塔等。  1、搅拌式萃取塔  搅拌式萃取塔塔内装有叶轮搅拌器,用

超临界流体萃取、双水相萃取、反胶束萃取的异同点

超临界流体萃取技术是以超临界状态下的流体作为溶剂,利用该状态下流体所具有的高渗透能力和高溶解能力萃取分离混合物的过程。常用的是CO2超临界萃取法。 CO2是安全、无毒、廉价的液体,超临界CO2具有类似气体的扩散系数、液体的溶解力,表面张力为零,能迅速渗透进固体物质之中,提取其精华,具有高效、不易e7

固相萃取仪萃取效率的影响因素

固相萃取仪萃取效率的影响因素我们用固相萃取仪,Z关心的就是萃取效果。然而影响萃取效率的因素有以下几种:(1)填料(固定相)-核心选择合适的SPE柱填料是保证理想结果的前提。(2)洗脱溶剂的强度1.采用正相固定相,溶剂强度随其极性增强而增强。2.采用反向固定相,溶剂强度随其机性减弱而增强。(3)PH值

固相萃取离子交换固相萃取

离子交换固相萃取离子交换固相萃取是靠目标化合物与吸附剂之间的相互作用是静电吸引力。

关于萃取剂的反萃取的基本介绍

  用反萃取剂使被萃取物从负载有机相返回水相的过程。为萃取的逆过程。反萃取剂主要起破坏有机相中被萃组分结构的作用,使被萃组分生成易溶于水的化合物,或生成既不溶于水也不溶于有机相的沉淀。反萃取过程具有简单、便于操作和周期短的特点,是溶剂萃取分离工艺流程中的一个重要环节。反萃取可将有机相中各个被萃组分逐

超临界萃取和亚临界萃取的区别

超临界CO2流体萃取的原理是利用超临界流体的溶解能力与其密度的关系,即利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响而进行的。在超临界状态下,将超临界流体与待分离的物质接触,使其有选择性地把极性大小、沸点高低和分子量大小的成分依次萃取出来。所以超临界CO2流体萃取过程是由萃取和分离过程组合而成的。亚临界萃

影响萃取的萃取效率的因素有哪些

萃取温度,被提取物的溶解度与温度有关2.固相物质与萃取剂的接触面积(通常将固体碾碎)3.溶剂的理化性质4.萃取过程中条件的维持,如加热或冷水浴,趁热过滤等。zd固-液萃取,也叫浸取,用溶剂分离固体混合物中的组分,如用水浸取甜回菜中的糖类;用酒精浸取黄豆中的豆油以提高油产量;用水从中药中浸取有效成分以

大流量离心萃取机的萃取原理简介

  用溶剂从液体混合物中提取其中某种组分的操作称为液/液萃取。萃取是利用溶液中各组分在所选用的溶剂中溶解度的差异,使溶质进行液液传质,以达到分离均相液体混合物的操作。萃取操作全过程可包括:  1.原料液与萃取剂充分混合接触,完成溶质传质过程;  2.萃取相和萃余相的分离过程;  3.从萃取相和萃余相

简述超声波萃取机的萃取原理

  超声波萃取(UE),亦称为超声波辅助萃取、超声波提取,是利用超声波辐射压强产生的强烈空化作用、扰动效应、高加速度、击碎和搅拌作用等多级效应,增大物质分子运动频率和速度,增加溶剂穿透力,从而加速目标成分进入溶剂,促进提取的进行。   通过超声波换能器产生快速机械振动波,利用超声波的能量,超声波作用