流式细胞仪标本制备1
流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。其中检测人白细胞表面标志可对白血病、淋巴瘤作用迅速正确的诊断，对淋巴细胞群和亚群进行精确分类，还能分离纯化某一群或亚群细胞。活细胞免疫荧光技术是用于FCM检测的标本准备，染色后也能在荧光显微镜下进行观察，在某些实验条件下，活细胞免疫荧光染色后的特异性和敏感性要优于滴片固定的常规间接免疫荧光的结果。(一) 原理活细胞表面保留有较完整的抗原或受体，先用特异性鼠源性单克隆抗体与细胞表面相应抗原结合，再用荧光标记的第二抗体结合，根据所测定的荧光强度和阳性百分率即可知相应抗原的密度和分布。(二) 操作步骤制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法)↓用10％FCS RPMI1640调整细胞浓度为5×106～1×107／ml......阅读全文
应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本
实验概要通过细胞融合技术，初步了解染色体提前凝集标本制备原理、方法及间期细胞三种时相的提前凝集染色体特点。实验原理在自然条件下或用人工的方法(物理、化学或生物)将两个或两个以上的同种或不同种细胞融合成一个细胞的过程称为细胞融合。七十年代初，由于发现M 期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异
组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备
实验材料 组织试剂、试剂盒 PBS仪器、耗材 剪刀尼龙网实验步骤 1. 取材后立即放入盛少许 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小烧杯，杯口用 300 目尼龙网盖住，用线绳固定好，并用 PBS 液湿润，取新鲜组织标本置尼龙网上；因标本量较少，尤其是内镜取材至少要取 3 块以上。3. 在操作前，
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
实验材料黑麦(Secalecereale)、大麦(Hordeumvulgare)种子或洋葱(Alliumcepa)鳞茎试剂、试剂盒对二氯苯饱和溶液甲醇冰醋酸70%酒精纤维素酶果胶酶Giemsa原液磷酸缓冲液(pH6.8～7.2)KCl仪器、耗材恒温培养箱显微镜载玻片酒精灯实验步骤1.取材:先将种子浸
组织活检、内镜取材标本单细胞悬液的制备
实验材料组织试剂、试剂盒PBS仪器、耗材剪刀尼龙网实验步骤1. 取材后立即放入盛少许 PBS 液的青霉素小瓶中。2. 另取一只小烧杯，杯口用 300 目尼龙网盖住，用线绳固定好，并用 PBS 液湿润，取新鲜组织标本置尼龙网上；因标本量较少，尤其是内镜取材至少要取 3 块以上。3. 在操作前，先将剪刀
去壁低渗法制备植物染色体标本实验
一、实验目的： 1、掌屋植物染色体标本的去壁低渗方法 2、了解中期染色体的形态结构 二、实验原理： 植物细胞有很坚实的细胞壁，染色体很难像动物染色体那样平整地贴在载玻片上，可通过纤维素酶和果胶酶处理去掉细胞壁；用低渗溶液处理可以提高染色体的分散程度。陈瑞阳等（1979，19
应用细胞融合技术制备染色体提前凝集标本
一、原理 两个或两个以上的同种或不同种细胞可以在诱导物的作用下融合成一个细胞。 七十年代初，由于发现M期细胞内有某种促进染色体凝集因子，它无种属特异性，所以在细胞融合和染色体技术的基础上，建立了制备染色体提前凝集标本的方法。即让M期细胞与间期（I期）细胞融合，从而诱导I期细胞染色质提前
病毒透射电镜病毒标本制备实验——负染色技术
实验方法原理病毒研究中用磷钨酸染色后发现在黑色背景中病毒粒子如同一个亮晶晶的「空洞」。尔后用磷钨酸对飞噬菌体染色也见到同样的现象，即将这种现象称为「负染色」。负染色是一种反衬染色，即高密度物质如重金属磷钨酸、醋酸铀等在透射电镜下形成黑色的背景反衬低密度的标本如病毒为白色透亮，从而清楚地显示出被衬物的
洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察实验
实验方法原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程，是体细胞分裂的主要方式.在有丝分裂过程中，细胞内每条染色体都能复制一份，然后分配到子细胞中，因此两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上均是相同的，在各种生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂。分生组织→固定→解离→染色→压片→观察（间期、早期、中
人外周血染色体制备和体外培养细胞的染色体标本制备2
⑦ 再固定：加固定液8ml，混匀，固定10min。⑧ 离心：同上，吸去上清液。⑨ 制细胞悬液：根据细胞量多少，加入适量固定液，充分混匀，制成细胞悬液。⑩ 滴片：取出预先经冰水浸泡的载玻片，用吸管吸取混匀的细胞悬液在离冰片约30cm距离进行滴片，每片约滴2～3滴细胞悬液，使细胞较好分散。一般每一培养瓶
流式细胞仪的简要介绍（质量控制、样品制备）
一、流式细胞仪 的检测范围1、流式细胞仪 可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2、流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原 、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式
酵母菌DNA制备实验1
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD破菌缓冲液酚氯仿异戊醇LB仪器、耗材玻璃珠试管摇床培养箱离心机实验步骤1. 注盛于一个13 mm×100 mm 无菌玻璃试管中的2 ml 培养基接种含有带目的基因的质粒的酵母单菌落，在转动或摇动培养箱中30℃过夜培养到静止期。 2. 将1.5 ml 的过夜培养物转移
OsCCT1b抗体的制备
实验概要本实验构建了含OsCCTlb的原核表达载体，获阳性克隆。诱导表达纯化后免疫兔子，制备了OsCCT1b抗体。实验步骤1. 载体构建将高保真PCR扩增的OsCRYlb基因的C末端OsCCTlb克隆到pET-21a( )载体中，得到的阳性克隆转化如大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。2.
1溴丁烷的制备实验
仪器、耗材 半微量有机制备仪圆底烧瓶球形冷凝管导气管小玻璃漏斗量筒250 mL烧杯75°弯管直形冷凝管接尾管真空塞筒形分液漏斗圆底烧瓶30 mL锥形瓶蒸馏头温度计套管温度计实验步骤 药品：4 mL浓H2SO4，2.5 mL n-C4H9OH；3.3 g NaBr；饱和NaHCO3 溶液仪器：半微量有
抗肽抗体的制备实验1
实验材料抗体试剂、试剂盒磷酸钠缓冲液MBS二甲基酰胺EDTAPBS仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中，置于一个2 ml 的玻璃试管，加50 μl MBS/DMF溶液，于室温下温和搅拌30 min。 2. 加
1溴丁烷的制备实验
仪器、耗材半微量有机制备仪圆底烧瓶球形冷凝管导气管小玻璃漏斗量筒250 mL烧杯75°弯管直形冷凝管接尾管真空塞筒形分液漏斗圆底烧瓶30 mL锥形瓶蒸馏头温度计套管温度计实验步骤药品：4 mL浓H2SO4，2.5 mL n-C4H9OH；3.3 g NaBr；饱和NaHCO3溶液仪器：半微量有机制备
多克隆抗血清的制备1
首要的问题是需要制备多克隆抗体还是单克隆抗体。多克隆抗体的优势在于可在多种不同生物种系中制备，花费精力较少。另外 ，多克隆抗体特别适用于分析变性蛋白质以及免疫沉淀法和免疫印迹法。作者：J.E.科利跟等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」—使用弗氏佐剂制备多克隆抗体的免疫接种法实验步骤材
OsCCT1b抗体的制备
实验概要本实验构建了含OsCCTlb的原核表达载体，获阳性克隆。诱导表达纯化后免疫兔子，制备了OsCCT1b抗体。实验步骤1. 载体构建将高保真PCR扩增的OsCRYlb基因的C末端OsCCTlb克隆到pET-21a( )载体中，得到的阳性克隆转化如大肠杆菌E. coli BL21 (DE3)。2.
流式细胞仪的简要介绍
一、流式细胞仪的检测范围1、流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2、流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪
流式细胞仪的简要介绍与注意事项
一、流式细胞仪的检测范围1．流式细胞仪可以检测细胞结构，包括：细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白质含量。2．流式细胞仪可以检测细胞功能，包括：细胞表面/ 胞浆/ 核的特异性抗原、细胞活性、细胞内细胞因子、酶活性、激素结合位点和细胞受体。二、流式细胞仪
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份，而保留膜的脂类成分，其结果，细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除，增加了标本的透明度，同时内质
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
基本方案 实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份，而保留膜的脂类成分，其结果，细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除，增加了标本的透明度，同时内质
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
实验方法原理 高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份，而保留膜的脂类成分，其结果，细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除，增加了标本的透明度，同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中，能形成二氧化锰，可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉
电子显微镜生物标本的制备及观察实验
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，
临床基因扩增检验实验室标本制备区的污染防治
下述操作在该区进行:临床标本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。要正确使用加样器。由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。可通过在本区内设立正压条件避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。为避免样本间的交叉污染,加入
整装培养细胞生物膜系统的标本制备及观察实验
实验方法原理高锰酸钾固定液能除掉细胞内的蛋白质成份，而保留膜的脂类成分，其结果，细胞骨架和细胞内可溶性蛋白质等被去除，增加了标本的透明度，同时内质网、线粒体、高尔基体、溶酶体等生物膜系统被完整地保存下来。高锰酸钾固定剂在固定标本的过程中，能形成二氧化锰，可在细胞的各种膜结构的脂类亲水端形成微细的沉淀
电子显微镜生物标本的制备及观察实验
透射电子显微镜 扫描电子显微镜 实验方法原理 电子显微镜是细胞生物学研究的重要工具，它以电子束为照明源，利用电子流具有波动的性质，在电磁场的作用下，
病毒透射电镜病毒标本制备实验——免疫吸附法
实验方法原理有时由于病毒量少，用普通悬滴法在电镜下难以发现稀少散在的病毒粒子，则可用免疫吸附电镜法。主要是利用相应的病毒抗血清来吸附病毒，用本法检测病毒，快速、灵敏、特异性强，是可靠的电镜病毒诊断技术之一，也可用于病毒快速诊断。实验材料病毒试剂、试剂盒磷钨酸仪器、耗材透射电镜实验步骤将抗病毒血清分别
临床物理检查方法介绍流式细胞DNA分析介绍
流式细胞DNA分析介绍: 流式细胞DNA分析是可以研究间期细胞,并不受细胞增殖状态的影响,对检测胸腔积液中的恶性细胞的有重要意义的一种检查方法。 流式细胞仪的检测范围: (1) 流式细胞仪可以检测细胞结构,包括:细胞大小、细胞粒度、细胞表面面积、核浆比例、DNA含量与细胞周期、RNA 含量、蛋白
基因扩增检验标本的处理保存及核酸提取方法(1)
应用聚合酶链反应（PCR）技术测定临床标本中的病原体核酸成分，是一种高度敏感，且最为直接的检测手段。由于临床标本中含有蛋白质、脂类等物质，可干扰PCR反应，故在做PCR反应前必须进行核酸提取。经典的核酸提取方法通常是加去污剂（SDS等）裂解细胞，经蛋白酶处理、有机溶剂提取及乙醇沉淀等步骤。由于样本的
人工免疫原的制备1
半抗原是指本身无免疫原性，只具有反应原性的物质。半抗原物质多数为低分子量的化学，例如多糖、多肽、甾体激素、脂肪胺、类脂质、核酸、某些药物（包括抗生素）以及其他化学物品等。半抗原不能直接用作免疫原，只有把这些半抗原和大分子物质结合后，才具有免疫原性，刺激机体产生抗体或致敏淋巴细胞。这种经过人工修饰的半