石蜡切片的酶免疫组化注意事项
一. 石蜡切片在染色过程中出现脱片现象？一般来说，如果用多聚赖氨酸包被过的片子做正常免疫组织化学染色的话是不会掉片子的。但如果要做抗原修复的话，如果片子处理不好的话是有可能掉片子的。你可以试试一下的方法：1.一般用APES：丙酮=1:50的处理液来处理片子，处理5min左右，然后水洗，烘干既可用于贴片。如果把水滴再处理好的片子上，水比较聚的话说明片子处理的好。2.贴片子的时候，展片的时间要把握好，不要太长，否则不利于贴牢。3.烤片子也很重要，切好的片子最好先不要马上收起来，而是水平至于烘片台上37度两个小时以上，一是水分彻底烘干。然后做染色前最好再在60度烘箱烘1个小时。4.再补充一点 ，石蜡包埋时，酒精梯度脱水以及浸蜡等一点要充分，这对贴片也有影响。如果这些导致掉片的因素都已经排除但是片子还是掉的厉害，那么也可能是以下原因造成的：1、多聚赖氨酸玻片质量的问题。我原先是买的，迈新按说也是不错的，可是都脱成什么样子了。后面补做第二......阅读全文
做石蜡切片用的材料，该如何保存
FAA 里面有福尔马林，你放在4度或者室温放两个星期应该没关系
石蜡切片或细胞的原位杂交实验
细胞RNA的原位杂交实验用于在混杂的细胞群体和组织中、定位特异的mRNA在细胞中的存在位置。实验材料石蜡切片试剂、试剂盒HCl二甲苯乙醇SSCPBS链霉蛋白酶甘氨酸DTTRNA酶消化液乙酸铵仪器、耗材染色盘加湿盒载玻片烘箱水浴锅培养箱实验步骤1. 准备脱蜡/再水化系统（可重复使用数次）及0.2 m
关于石蜡切片的抗原修复及方法介绍
石蜡切片标本均用甲醛固定，使得细胞内抗原形成醛键、羧甲键而被封闭了部分抗原决定簇，同时蛋白之间发生交联而使抗原决定簇隐蔽。所以要求在进行IHC染色时，需要先进行抗原修复或暴露，即将固定时分子之间所形成的交联破坏，而恢复抗原的原有空间形态。 常用的抗原修复方法有微波修复法，高压加热法，酶消化法，
光学显微镜的石蜡切片制作过程
I.将组织块放入带标记的盒子内，光学显微镜置于200m1液体中; 2.按选定的温度加热;测定温度。 3.光学显微镜3%戊二醛预固定15秒钟;缓冲液冲洗3次，光学显微镜每次3分钟;1 %OsO;固定15秒钟。如中断操作，预固定后仍需在4℃下保存. 用微波脱水、浸透每一步骤只需
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸；染色架；保湿盒；晾片盘；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟；2. 脱蜡和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
石蜡切片免疫荧光如何消除自发荧光
可以用远红外波长的荧光范围内的二抗，在此范围内基本看不到自发荧光的信号；也可以用丙酮固定不用醛类物质。都可以减少自发荧光的产生
石蜡切片制作(苏木精伊红对染法)
石蜡切片制作可以用于：（1）保持细胞间的正常的相互关系，能较好和较长时间地保留细胞的原貌。（2）是光学显微镜的主要制片方法。实验方法原理石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称 H.E. 对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法
海水鱼卵石蜡切片组织破碎的原因
本人觉得是脱水这个环节有问题，事先应当做一个预备试验，看怎样的酒精梯度比较合适。有时候脱水过度会造成组织脆弱，切片的时候就容易破碎。这里有个参考值，但是建议搂主最好作些修改：小老鼠内脏脱水程序：固定液30分钟85%酒精30分钟95%酒精30分钟100%酒精30分钟100%酒精30分钟二甲苯15分钟二
石蜡切片制作(苏木精伊红对染法)（一）
实验方法原理 石蜡切片是最基本的切片技术，冰冻切片和超薄切片等都是在石蜡切片基础上发展起来的。苏木素与伊红对比染色法（简称 H.E. 对染法）是组织切片最常用的染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可
石蜡切片制作(苏木精伊红对染法)（二）
5．透明纯酒精、二甲苯等量混合液15min，二甲苯Ⅰ15min、Ⅱ15min（至透明为止）。由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。透明注意事项（1）使用透明剂时，要随时盖紧盖子，
石蜡切片组织有横向裂纹是怎么回事
组织的形态不是很清晰，可能没有固定好。 建议： 1、取材要快，离体5分钟内修整好组织块，放入固定液，越快越好，减少组织自溶； 2、组织固定时体积要小，不大于5mm； 3、固定液充分，固定液与组织的体积比10-20：1。 石蜡切片（paraffin section）组织学常规制片技术中最
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修复工作液（pH8.0，稀释50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀释10倍使用） DAB显色液（临用前配制：试剂盒A、B、C各50ul，于1ml水中混匀）。方法1. 石蜡切片置60℃烘箱中烘烤过夜 2.
小鼠组织切片免疫组化实验步骤
实验概要免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学
免疫组织化学的常见问题有哪些
免疫组化实验所用的抗体 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。 免疫组化实验所用的组织和细胞
免疫组织化学的常见问题
免疫组化实验所用的抗体 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。 免疫组化实验所用的组织和细胞
关于免疫组织化学实验的相关问题
免疫组化实验所用的抗体 免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。 免疫组化实验所用的组织和细胞
石蜡切片效果不佳的八大补救措施
之前和大家分享了如何切出符合自己需求的石蜡切片，那切片不佳是什么原因造成的？常见切片问题有哪些？如何补救？ 一、蜡带侧弯——问题分析及补救措施 1、刀口锋利不一，局部产生差异。可移动刀片或改用新刀口。2、切片刀未覆盖整个蜡块。需调整刀口位置至刀片能切到整个蜡块。3、蜡块左右硬度不一致。尽量使用锋
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色
石蜡切片免疫荧光TUNEL和NEUN双标染色曾经作过脑组织的TUNEL，也指导过别人做心肌的TUNEL，谈谈我的意见：蛋白酶K37度30min，好像有点偏长，我是10min。你是NBT/BICP显色的话，这说明你用的是AP系统，而不是HRP这样的话就不是用3%H2O2来去除内源性酶的了，（H2O2是
石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂盒
石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂盒产品说明书（中文版） 主要用途 YIJI石蜡切片黑色素去色（bleach）试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法的基础上，通过氧化剂处理，使黑色素由棕色变成无色，来识别存档中的石蜡包埋组织切片中黑色素成分的权威而经典的技术方法。该技术经过精
植物石蜡切片之溶液配制、实验用品和操作步骤
说到便于观察和保存的组织切片方法，我们的脑海里很容易就闪出四个字来：石蜡切片，不过，你掌握了吗?还是……听说过而已?本文主要对石蜡切片法的主要实验用品、实验步骤、溶液配制这几方面对这一实验方法作介绍。 一、实验目的 1.熟练掌握石蜡切片的方法。 2.掌握永久制片的制作过程，为研究植物
大规模细胞培养需要什么耗材和原料
免疫组化（包括冷冻切片和石蜡切片）免疫组化：免疫组化石蜡切片（ihc-p）：石蜡包埋，优点是可以保持组织细胞的形态结构，且容易存放在室温，常用。免疫组化冰冻切片（ihc-fr）：优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性，做免疫组化时不需抗原修复这一步。一定要存在-80度的低温冰箱中。要求做冰冻切片的不
免疫组织化染色
实验材料 新鲜组织试剂、试剂盒 二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材 恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤 一．石蜡切片免疫组化染色实验步骤：1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置
多聚螯合物酶组化实验——UIP－法
实验方法原理UIP（universal immuno-enzyme polymer）法，即通用免疫酶复合物法，是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似，不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物（N-Histo
免疫组化的作用介绍
标本 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类，前者包括石蜡切片（病理切片和组织芯片）和冰冻切片，后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。 其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究；石蜡切片制作过程对组
电脑冷冻石蜡切片机常见问题及保养说明
对于电脑冷冻石蜡切片机的使用要做好日常检查和维护。平时应经常检查传动机械部件连接是否牢固，螺丝有无松动，机器运转是否流畅，如发现问题要及时解决。刀片使用一段时间后，直径会变小，当刀口离定尺板大时，需松开定尺板背面的紧固螺钉，朝刃口移动定板尺，距刃口2mm间隙为宜，然后拧紧螺钉。注意当刀片直径小时
石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine－T）荧...
石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）荧光染色试剂盒使用说明主要用途YIJI石蜡切片淀粉样蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）荧光染色试剂是一种旨在使用标准化的化学分离石蜡方法和硫磺素T染色技术，与淀粉样蛋白结合，来分析存档中的石蜡包埋
电脑冷冻石蜡切片机常见问题及保养说明
对于电脑冷冻石蜡切片机的使用要做好日常检查和维护。平时应经常检查传动机械部件连接是否牢固，螺丝有无松动，机器运转是否流畅，如发现问题要及时解决。刀片使用一段时间后，直径会变小，当刀口离定尺板大时，需松开定尺板背面的紧固螺钉，朝刃口移动定板尺，距刃口2mm间隙为宜，然后拧紧螺钉。注意当刀片直径小
免疫组织化染色
验材料新鲜组织试剂、试剂盒二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤一．石蜡切片免疫组化染色实验步骤：1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置60℃ 1
用于PCR的模板DNA制备实验——改进的石蜡切片－DNA－提取方法
实验步骤1. 5 μm 厚的石蜡切片 5 至 10 张贴在干净的载玻片上，常规烘片，脱蜡，水化，蒸馏水清洗，无菌蒸馏水浸泡，取出晾至半干。2. 无菌尖头刀片刮下，放入 300～900 μl 组织裂解液中，并加入 20 mg/ml 蛋白酶 K（PK）10～15 μl，封口膜封口，置 55℃ 3 h 以