哺乳动物中制备基因组DNA实验
制备DNA 实验材料 动物组织 试剂、试剂盒 PBS 乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 异戊醇 TE 仪器、耗材 离心机 摇床 研钵 实验步骤 1. 切下组织并立即剪成小块,置于......阅读全文
新基因筛选工具能绘制“垃圾DNA”
据英国《每日邮报》官网报道,美国科学家近日开发了一种新的基因筛选工具,能绘制引起癌症、糖尿病和痴呆症的基因突变,或有助于开发新疗法,进而拯救每年因此丧生的数百万人。新成果发表在《公共科学图书馆》杂志上。 领导这次研究的哥伦比亚大学教授大卫·戈尔茨坦说,现在的基因测序只能在不超过三分之一的遗传病
关于DNA重组的基因转换的介绍
在基因转换中,一条染色体上部分遗传物质被复制到另一条染色体,而提供这部分遗传物质的染色体序列并没有被改变。在减数分裂DNA重组发生位点,基因转换高频率发生。通常在真菌杂交中研究基因转化 [2] ,其中可以方便地观察到单个减数分裂的4种产物。
SDS法提取植物基因组DNA
本方法由Dellaporta,Wood和Hicks(1983)的方法修改而成。其基本原理是研磨的组织细胞用热的SDS裂解后,加入高浓度的KAc,0℃放置以除去蛋白和多糖类杂质,最后用乙醇或异丙醇沉淀。一 材料、试剂和仪器1 材料 新鲜的组织材料或-80℃冻存的材料2 试剂(1)提取缓冲液Tris-H
-Nature:DNA讲述历史-基因中发掘细节
英德研究人员在14日出版的美国《科学》杂志上报告说,丝绸之路的贸易、成吉思汗的西征乃至欧洲的殖民扩张等重大历史事件的影响,都反映在现代人类的基因中。 研究人员利用世界各地95个民族近1500人的DNA(脱氧核糖核酸)数据,绘制出一幅过去4000年中的人类基因交流地图,为人类通过基因分析的方
DNA突变按照基因功能改变分类
功能丧失突变也称失活突变,导致基因产物具有较少或完全没有功能(部分或完全失活)。当等位基因完全丧失功能(无效等位基因)时,它通常被称为无定形突变,与此类突变相关的表型通常是隐性的。功能获得性突变也称为激活突变,改变的基因产物,使其功能变强(增强激活),甚至被不同的异常功能所取代。当新等位基因被创建时
怎样对基因组DNA质量检测
怎样对基因组DNA质量检测用凝胶电泳看,有没有质白质和RNA等物质的污染,还可以测OD,用OD260/280来判断,当OD260/OD280< 1.8,表示蛋白质含量较高当OD260/OD280> 2.0,表示RNA含量较高当OD260/OD280=1.2.0,表示DNA较纯
质粒dna的提取与基因组dna的提取有何异同
质粒DNA提取一般用沸水浴法和碱裂解法,现在一般都采用碱裂解法,并有试剂盒可用。它主要是将细胞内的环状质粒提取出来,一般需要用SDS裂解,RNA酶降解,然后过柱,再进行洗脱.过程比较简单。 而基因组DNA提取则较为复杂,也需要用SDS裂解和RND酶降解,但降解时间较长,同时对有些革兰氏阳性细菌
DNA扩增标准化操作规范(DNA基因分型实验室)
1 目的:DNA 扩增标准化操作规范适用于HLA试验中的DNA 扩增操作。2 适用范围:DNA 基因分型实验室。3 依据:DNA 扩增标准化操作规范4 引用文件:德国BAG公司(以下简称BAG)《Instructions for use Instructions for use HISTO TYPE
由染色质调控的基因隐秘转录参与哺乳动物干细胞衰老
细胞老化有其独特而明显的分子表型特征,但其诱导机制尚不完全清楚,基因隐秘转录 (cryptic transcription) 便是其中之一。基因隐秘转录现象是指基因在某些突变体中或应激情况下,开始从本应该被抑制的下游“类启动子 (promoter-like) ”区域起始转录,并产生与基因原功能不
由染色质调控的基因隐秘转录参与哺乳动物干细胞衰老
细胞老化有其独特而明显的分子表型特征,但其诱导机制尚不完全清楚,基因隐秘转录 (cryptic transcription) 便是其中之一。基因隐秘转录现象是指基因在某些突变体中或应激情况下,开始从本应该被抑制的下游“类启动子 (promoter-like) ”区域起始转录,并产生与基因原功能不
科学家首次利用CRISPR来加速特定基因在哺乳动物中遗传
在经典遗传学理论中,通过孟德尔定律,亲代等位基因有50%的机会被下一代遗传。2003年,进化生物学家Austin Burt提出了基因驱动(gene drive)理论【1】。一些基因具有自我复制功能,如转座子等,可以利用具有这些功能的元件对目的基因进行改造,这样可以使得后代可以以大于50%的机会偏
用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
实验方法原理 这一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法(Blin and Stanfford 1976)。 当需要大量哺乳动物 DNA,如用于 Somhern 杂交或者用噬菌体 λ 载体构建基因组文库时,应选用这一方法。从 5X107 培养的非整倍体细胞 ( 如
用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
这一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法(Blin and Stanfford 1976)。 当需要大量哺乳动物 DNA,如用于 Somhern 杂交或者用噬菌体 λ 载体构建基因组文库时,应选用这一方法。从 5X107 培养的非整倍体细胞 ( 如 HeLa 细胞)中可获
用蛋白酶K和苯酚从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA
实验方法原理 这一程序改自最先由 Daryl Stafford 及其同事描述的方法(Blin and Stanfford 1976)。 当需要大量哺乳动物 DNA,如用于 Somhern 杂交或者用噬菌体 λ 载体构建基因组文库时,应选用这一
胚胎发育之谜?刘江揭开面纱
DNA甲基化是一种重要的表观遗传修饰。以高等动物为例,个体从受精卵发育成成体的过程中,DNA甲基化图谱都是动态变化的,会调控不同的细胞往不同的方向分化。因此,建立DNA甲基化图谱对理解生殖细胞形成和胚胎发育至关重要。刘江(中)团队合影 在基金委“细胞编程和重编程的表观遗传机制”重大研究计划中,
单一氨基酸替换增强了Dnmt3b甲基化基因组DNA的能力
进化过程中单一氨基酸替换增强了哺乳动物Dnmt3b甲基化基因组DNA的能力 近期,国际学术期刊Nucleic Acids Res发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所裴钢研究组最新研究成果:进化过程中的单一氨基酸替换增强了哺乳动物Dnmt3b甲基化基因组DNA的能力。 旁系
研究发现仅8.2%人类DNA“有用”:余为进化残余物质
研究人员运用计算方法,比较了从老鼠、豚鼠、兔子到狗、马和人类的各种哺乳动物的完整DNA序列。 研究报告资深作者之一、英国牛津大学韦尔科姆基金会人类遗传学中心的格顿·伦特博士说:“这些拥有共同祖先的物种在进化过程中,DNA出现变异,而自然选择抵制了这些变化,以确保有用的DNA序列完好无损。”
人类DNA仅8.2%“有用”
研究人员运用计算方法,比较了从老鼠、豚鼠、兔子到狗、马和人类的各种哺乳动物的完整DNA序列。 研究报告资深作者之一、英国牛津大学韦尔科姆基金会人类遗传学中心的格顿·伦特博士说:“这些拥有共同祖先的物种在进化过程中,DNA出现变异,而自然选择抵制了这些变化,以确保有用的DNA
遗传发育所在G蛋白提高水稻氮利用率的研究中取得进展
哺乳动物受精后由一个受精卵发育成一个完整的个体,DNA甲基化则是指导受精卵发育成早期胚胎、进而发育成完整个体的最重要表观遗传调控方式之一。中国科学院北京基因组研究所刘江团队2013年揭示模式生物斑马鱼继承父代精子的甲基化图谱,但哺乳动物子代如何继承表观遗传信息仍知之甚少。刘江团队与南京大学黄行许
DNA修饰ARID2基因信号通路介绍
该基因编码一个富含AT的相互作用域(ARID)的DNA结合蛋白家族成员。 ARID家族的成员在胚胎模式,细胞谱系基因调控,细胞周期控制,转录调控和染色质结构修饰中发挥作用。 该蛋白作为多溴和BRG1相关因子或PBAF(SWI / SNF-B)染色质重塑复合物的亚基,通过核受体促进配体依赖性转录激活。
关于DNA重组的基因工程的介绍
基因工程中的DNA重组指的是人为地将来自不同的生物体的DNA片段进行重组,产生所谓的重组DNA。基因工程可用于添加、删除或以其它方式改变生物体的基因,主要用于生物医学研究,研究特定基因的功能。基因工程也广泛应用于转基因生物特别是转基因植物和转基因动物及转基因微生物新品种的培育。基于基因工程的技术
关于DNA重组的基因表达载体的介绍
将目的基因与运载体结合的过程,实际上是不同来源的DNA重新组合的过程。如果以质粒作为基因表达运载体, 首先要用一定的限制酶切割质粒,使质粒出现一个缺口,露出黏性末端。然后用同一种限制酶切断目的基因,使其产生相同的黏性末端(部分限制性内切酶可切割出平末端,拥有相同效果)。将切下的目的基因的片段插
DNA修饰EWSR1基因信号通路介绍
该基因编码一种多功能蛋白,参与多种细胞过程,包括基因表达、细胞信号传导、RNA加工和转运。该蛋白包括一个N末端转录激活域和一个C末端RNA结合域。该基因与编码转录因子的各种基因之间的染色体易位导致参与肿瘤发生的嵌合蛋白的产生。这些嵌合蛋白通常由该蛋白的N末端转录激活域与转录因子蛋白的C末端DNA结合
DNA修饰TOP2A基因信号通路介绍
这个基因编码一种DNA拓扑异构酶,这种酶在转录过程中控制和改变DNA的拓扑状态。这种核酶参与诸如染色体凝聚、染色单体分离以及DNA转录和复制过程中发生的扭转应力的减轻等过程。它催化双链DNA的两条链的瞬间断裂和重新结合,使双链彼此穿过,从而改变DNA的拓扑结构。这种酶有两种形式,可能是基因复制事件的
动物细胞基因组DNA提取实验
实验原理真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,制备DNA将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,同时保持DNA分子的完整。提取DNA的过程是指将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从
DNA修饰MEN1基因信号通路介绍
这个基因编码脑膜,一种与多发性内分泌肿瘤1型综合征相关的假定的肿瘤抑制因子。体外研究表明,脑膜定位于细胞核,具有两种功能性核定位信号,并通过JUND抑制转录激活,但这种蛋白的功能尚不清楚。在Northern blots上检测到两条信息,但未对较大的信息进行描述。选择性剪接导致多个转录变体。
动物细胞基因组DNA的制备
实验概要本实验介绍了动物细胞基因组DNA的制备原理及操作流程。本方法一般可从5×107培养的非整倍体细胞(如HeLa细胞)中获得大约200μg DNA。DNA的长度可达到100~150kb。20ml正常血的DNA产量约为250μg。实验原理真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组
基因组DNA文库构建必备实验技巧
基因组DNA文库用途十分广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析、分离特定的基因片段等。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为四大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无
“基因魔剪”携手AI提升DNA编辑精度
来自瑞士苏黎世大学、苏黎世联邦理工学院以及比利时根特大学的科学家合作开发出一种创新的基因编辑方法,将先进的“基因魔剪”技术与人工智能(AI)相结合,显著提升了DNA编辑的精确度。这项技术为更真实地模拟人类疾病机制提供了有力工具,也为未来精准基因疗法的发展奠定了基础。目前,确保“基因魔剪”在切割目标D
DNA修饰SMARCD1基因信号通路介绍
该基因编码的蛋白质是SWI / SNF蛋白质家族的成员,其成员具有解旋酶和ATPase活性,被认为可以通过改变那些基因周围的染色质结构来调节某些基因的转录。 编码的蛋白质是大型ATP依赖的染色质重塑复合体SNF / SWI的一部分,并且与酵母Swp73蛋白具有序列相似性。 已经发现该基因的两个编码不