哺乳动物中制备基因组DNA实验

制备DNA 实验材料 动物组织 试剂、试剂盒 PBS 乙酸铵 乙醇 酚 氯仿 异戊醇 TE 仪器、耗材 离心机 摇床 研钵 实验步骤 1. 切下组织并立即剪成小块,置于......阅读全文

DNA(基因)检测-Southern-Blot

DNA(基因)检测-Southern BlotDNA吸印转移1.室温下将电泳后的琼脂糖凝胶浸入500ml溶液A中,摇动30分钟后换500ml新鲜溶液A再摇30分钟,使DNA双链碱变性。溶液A:5M NaCl     300.0ml10M NaOH    50.0mlH2O         650.0

将大片段插入-DNA-导入哺乳动物细胞和胚胎实验1

基本方案1 通过质体融合将完整的 YAC 导入哺乳动物细胞实验材料靶细胞:培养的贴壁生长的哺乳动物细胞带有以neo(G418-resistance)为筛选标记的 YAC 的酵母菌株试剂、试剂盒山梨糖醇SCE 溶液ST 溶液EDTA小鼠 Cot-1 DNA仪器、耗材SD dropout 培养基和培养板

将大片段插入-DNA-导入哺乳动物细胞和胚胎实验2

基本方案2 将细菌人工染色体(BAC或PAC)引入到哺乳动物细胞和小鼠胚胎中实验材料纯化的 BAC DNA试剂、试剂盒RNase A原核的注射缓冲液透析缓冲液I乙醇小鼠胚胎哺乳动物细胞灭菌素仪器、耗材含有合适的抗生素的LB培养基Qiagen Midi-prep 试剂盒培养箱高速离心机高速离心管玻璃离

基因疗法治愈哺乳动物肌营养不良症

  英法合作团队在7月25日出版的《自然·通讯》杂志发表论文称,他们以狗为动物试验模型开发的基因疗法,成功治好了杜氏肌营养不良症(DMD),为下一步开展人类临床试验铺平了道路,向治愈人类DMD患者迈出重要一步。  DMD患儿均为男性。在新出生的男婴中,每5000人就有一人会患上此病。这些患儿在几岁时

哺乳动物基因组三维结构首次确定

  英国医学研究理事会网站日前报道称,英国科学家从单个细胞中确定出完整保存的哺乳动物基因组的首个3D结构,显示了细胞核内所有染色体中的DNA是如何复杂地折叠在一起的。该项研究成果发表在近日出版的《自然》杂志上。  很多人对于呈现“X”形状的染色体十分熟悉,但事实上,染色体仅在细胞分裂时呈现这种形态。

哺乳动物基因组三维结构首次确定

  英国医学研究理事会网站日前报道称,英国科学家从单个细胞中确定出完整保存的哺乳动物基因组的首个3D结构,显示了细胞核内所有染色体中的DNA是如何复杂地折叠在一起的。该项研究成果发表在近日出版的《自然》杂志上。  很多人对于呈现“X”形状的染色体十分熟悉,但事实上,染色体仅在细胞分裂时呈现这种形态。

纯化DNA实验_基因组DNA的快速纯化

试剂、试剂盒尾部缓冲液蛋白酶 K仪器、耗材离心管玻璃棒实验步骤第 1 天1. 大约 1.5 cm 长的尾部活检样品放在一个 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部缓冲液的小离心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振摇温育过夜。尾部缓冲液(配 25 ml)50 mmol/L

挑战生物学以往观点-哺乳动物细胞可将RNA序列写入DNA

  美国费城托马斯杰斐逊大学的研究人员首次发现,哺乳动物细胞可以将RNA序列转换回DNA,这在病毒中比真核细胞更常见。这一发现可能会挑战生物学长期以来的观点,并可能对生物学的众多领域产生广泛影响。相关研究发表在6月11日的《科学进展》杂志上。  细胞含有一种机制,它可以将DNA复制成一组新的DNA,

用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA

本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织,用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物(染色质用火棉胶袋充分透析去除蛋白酶和有机溶剂等过程。甲酰胺是一种离子化溶剂,能分离蛋白质-DNA 复合物并使蛋白变性和释放,但他并不明显影响蛋白酶 K 的活性。本实

从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA

实验方法原理 本方案由 Ramirez-solis 等的方法 1992,1993 改进而成,是一种从微培养板的每个孔生长的真核细胞抽提基因组 DNA 的简便有效的方法。每个孔产生的基因组 DNA 足以做数次聚合酶链反应(PCR) 或者一次 Southern 杂交。对于制备用于 PCR 反

从96孔微培养板生长的哺乳动物细胞中分离DNA

本方案由 Ramirez-solis 等的方法 1992,1993 改进而成,是一种从微培养板的每个孔生长的真核细胞抽提基因组 DNA 的简便有效的方法。每个孔产生的基因组 DNA 足以做数次聚合酶链反应(PCR) 或者一次 Southern 杂交。对于制备用于 PCR 反应的基因组 DNA 的最佳

用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA

            实验方法原理 本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织,用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物(染色质用火棉胶袋充分透析去除蛋白酶和有机溶剂等过程。甲酰胺是一种离子化溶剂,能分离蛋白质

用甲酰胺从哺乳动物细胞中分离高分子质量DNA

实验方法原理 本方案是 Kupiec 等所述方法(1987) 的改良版本,包括用蛋白酶 K 消化细胞和组织,用高浓度甲酰胺分离 DNA-蛋白质复合物(染色质用火棉胶袋充分透析去除蛋白酶和有机溶剂等过程。甲酰胺是一种离子化溶剂,能分离蛋白质-DNA 复合物并使蛋白变性和释放,但他并不明显影

基因组DNA的提取

基因组DNA的提取概 述   基因组DNA的提取通常用于构建基因组文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分

外源DNA的基因特点

基因有两个特点,一是能忠实地复制自己,以保持生物的基本特征;二是基因能够“突变”,突变绝大多数会导致疾病,另外的一小部分是非致病突变。非致病突变给自然选择带来了原始材料,使生物可以在自然选择中被选择出最适合自然的个体。含特定遗传信息的核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位。除某些病毒的基因由核糖核酸(

基因组DNA的定义

中文名称基因组DNA英文名称genomic DNA定  义组成生物基因组的所有DNA。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

Science:新基因来自“垃圾”DNA

  “新基因从何而来?”是遗传学和进化生物学中长期存在的一个问题。来自加州大学戴维斯分校的研究人员证实,一些新基因是由非编码DNA以比预想更快的速度生成。这一研究发现发表在1月23日的《科学》(Science)杂志上。   论文的资深作者、加州大学进化和生态学教授David Begun说:“研究清

基因重组和DNA重组区别

基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。 在人类的生殖细胞中发现的46条染色体发生在生物体内基因的交换或重新组合。基因重组是生物遗传变异的一种机制,包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。DNA重组指DNA分子内或分子间发生的遗传

DNA基因突变的类别

按照基因结构改变分类小规模突变小规模突变影响基因中的一个或几个核苷酸 (只影响到一个核苷酸的突变称为点突变)。小规模突变包括:插入:将一个或多个额外的核苷酸添加到DNA中。它们通常由转座因子引起,或由重复元件错误复制所致。位于基因编码区的插入可改变mRNA的剪接(剪接位点突变)或引起阅读框架的移位(

基因组DNA的提取

第一节 概 述DNA的提取通常用于构建文库、Southern杂交(包括RFLP)及PCR分离基因等。利用DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。加入一定量的异丙醇或乙醇,的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中,可用玻棒将其取出,而小分子DNA则只形成颗粒状沉淀附于壁上及底部,

线粒体基因组的植物细胞和哺乳动物相关介绍

  植物细胞  植物细胞的线粒体基因组的大小差别很大,最小的为100kb左右,大部分由非编码的DNA序列组成,且有许多短的同源序列,同源序列之间的DNA重组会产生较小的亚基因组环状DNA,与完整的“主”基因组共存于细胞内,因此植物线粒体基因组的研究更为困难。  哺乳动物  哺乳动物的线粒体基因DNA

科学家发现控制哺乳动物组织再生关键基因

单个基因原来是控制哺乳动物组织再生的关键调控因子,图为小鼠组织再生过程。  与海绵、扁形虫、水螅和蝾螈这些动物界的肢体再生冠军不同,哺乳动物缺乏附肢再生的能力。如今,一项在实验室小鼠中进行的新研究,利用这项“绝技”的一个罕见例外证明了一种肿瘤抑制因子能够作为哺乳动物体内的再生能力关键

基因在哺乳动物器官发育中的表达谱竟是这样?!

  研究人员首次破译了控制人类和其他选定哺乳动物(恒河猴、老鼠、大鼠、兔子和负鼠)在出生前后主要器官发育的基因程序。利用下一代测序技术,海德堡大学的分子生物学家分析了大脑、心脏、肝脏、肾脏、睾丸和卵巢。他们的大规模研究表明,所有被研究的器官都显示出基本的和原始的基因活动网络,这些基因活动网络一定起源

科学家发现开启哺乳动物生命旅程的关键基因

  人类胚胎的形成都开始于受精卵的结合,受精卵作为原始的细胞能够携带来自母亲和父亲细胞基因组的一个拷贝,然而受精卵的遗传信息仅会在其进行数次分裂后开始表达,但目前研究人员并不清楚诱发受精卵基因组激活的分子机制,近日,一项刊登在国际杂志Nature Genetics上的研究报告中,来自瑞士洛桑联邦理工

癌基因转化细胞:基因组DNA转染法

实验概要 癌基因转化细胞实验步骤1.提取基因DNA(含癌基因)。2.DNA准备:取供体DNA50~100微克,加3M NaCl或醋酸钠使最终浓度至0.3M混匀。3.再加2倍体积无水乙醇,3000转/分离心10分钟,去上清。4.加入转染缓冲液,待DNA充分融解后,再加入2.5M CaCl2,令最终浓度

血基因组DNA提取实验——血基因组DNA-试剂盒提取法

血基因组DNA提取可用于:(1)从冻全血、血浆、血清、骨髓、其他体液、淋巴细胞、培养细胞、病毒和线粒体中提取DNA;(2)用于后续测序、遗传信息学等研究。实验方法原理采用特殊的细胞裂解和蛋白去除液(包括蛋白酶K 裂解)从抗凝全血中得到基因组DNA。实验材料抗凝全血试剂、试剂盒血基因组DNA 试剂盒仪

揭示哺乳动物两性存在性别偏好性的基因表达

  在一项新的研究中,来自来自美国怀特黑德研究所、麻省理工学院和哈佛医学院的研究人员发现了雄性和雌性哺乳动物在基因表达上的全基因组差异。相关研究结果发表在2019年7月19日的Science期刊上,论文标题为“Conservation, acquisition, and functional imp

基因变异使H7N9病毒更易感染哺乳动物

  日本专家新发表的一项研究说,H7N9禽流感病毒的部分基因已出现变异,从而更加容易感染哺乳类并实现增殖。   东京大学教授河冈义裕率领的研究小组在英国《自然》杂志新一期的网络版上报告说,他们用从中国患者体内采集的病毒和从野鸭体内采集的病毒进行了实验。让这些不同来源的病毒感染雪貂,然后调查受感染的

新型基因或和哺乳动物机体肠道的特殊代谢通路相关

  近日,一项刊登于国际杂志Science上的研究论文中,来自华盛顿大学的研究人员通过研究在哺乳动物机体的生物群落中发现了一系列和机体特殊代谢通路相关的基因,其中有些基因还会对饮食的剧烈改变产生反应,文章中,研究者描述了他们对四种肠道菌群进行的遗传性研究,同时也对和饮食改变相关的基因进行了相关的研究

哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验

实验步骤 一、转染方法 对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方,这些配方都具有单一的ZL化组分,而且毫无疑问,它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲