慢性髓细胞性白血病的间期FISH研究实验
试剂、试剂盒 DAPI 乙醇 甲酰胺 冰乙酸 杂交缓冲液 甲醇 Nonidet P40 SSC 仪器、耗材 盖玻片 BCR ABL 双色双融合探针 实验步骤 一、样品 1.用经过培养的并且按照血液恶性肿瘤标准细胞遗传学程序收获的骨髓和外周血可以得到最好的结果。 2.对于HSH研究来说,用新鲜制备的片子很重要。固定在甲醇和冰乙酸中的细胞储存于-7.0°C中,......阅读全文
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Detection The choice of the detection scheme depends on several factors: (i) the number of haptens and fluorochromes used for probe labeling; (ii) t
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Author Notes After the fourth round of DOP amplification the probe quality is considerably reduced. Use the low stringency cycles only in case
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Small DNA-probes from cosmids or plasmids clonesThese kind of probes, especially plasmids, have become out of fashion for 3D-FISH due to their delicat
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Back to topReviewer CommentsReviewed by: Luis Antonio Parada, CIC Biogune, Derio, Spain.In my experience the primers are better preserved when kept at
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Pepsin treatmentEquilibrate slides (kept in 50%FA/2xSSC) in 2xSSC 2 minutes;Switch to 1xPBS 3 minutes;Pepsin: 3-5 minutes in 0.01 N HCl/0.002% pepsin.
荧光原位杂交(Fluorescence-in-situ-hybridization,FISH)(图)
实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病
荧光原位杂交(Fluorescence-in-situ-hybridization,FISH)原理
2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于 50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。②取出玻片标本,将其浸在70~75oC的体积分数70%甲酰胺/2×SSC的变性液中变性2~3min。③立即按顺序将标本经体积分数70%、体积分数90%和体积分数100%冰
荧光原位杂交(FISH)之一:实验原理
实验原理荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗传学技术,是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异
FISH荧光原位杂交实验(原位杂交)
1. 实验目的 通过实验了解荧光原位杂交技术的基本原理和在生物学、医学领域的应用。掌握原位杂交技术的操作方法,熟练掌握荧光显微镜的使用方法。2. 实验原理 荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一门新兴的分子细胞遗
用细胞爬进行RNA-FISH检测的实验操作
用细胞爬片进行 RNA FISH 检测的实验流程 1. 细胞在盖玻片上进行培养,细胞长好后用 CSK 缓冲液简单洗涤。 2. 细胞爬片用 4% 多聚甲醛在 4℃ 固定 10 min。 3. 用含有 0.5% TritonX-100,,10 mM VRC 的 CSKBuffer 溶液在 4℃ 处理 1
荧光原位杂交技术(FISH)在疾病分型诊断中的应用
生命科学的发展,生物技术的进步使我们对疾病本质的认识不断地深入,也使我们拥有更多新的治疗方法和药物应对疾病的威胁。如何准确有效地利用这些新的治疗方法和药物治愈疾病是我们迫切需要研究的内容。如何对疾病进行正确的分型和诊断却是上述工作的基础。只有全面地把握病情,并在此基础上进行准确的判断和分析,才能为
荧光原位杂交染色体分析技术
FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、
荧光原位杂交染色体分析技术
FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、
以-RNA-为靶目标-FISH-探针的标记实验
标记的 RNA、DNA 或者核酸类似物可以通过荧光原位杂交(FISH) 的方法检测细胞标本内的 RNA。目标 RNA 通常是由基因组 DNA 转录来的信使 RNA(mRNA)。由于髙特异的核酸碱基互补配对原则,特定的 RNA 分子可以从众多共表达的 mRNA 分子中筛选出来。对选择的 mRN
以-RNA-为靶目标-FISH-探针的标记实验
标记的 RNA、DNA 或者核酸类似物可以通过荧光原位杂交(FISH) 的方法检测细胞标本内的 RNA。目标 RNA 通常是由基因组 DNA 转录来的信使 RNA(mRNA)。由于髙特异的核酸碱基互补配对原则,特定的 RNA 分子可以从众多共表达的 mRNA 分子中筛选出来。对选择的 mRNA 分子
FISH-检测乳腺癌中-HER2-扩增实验
试剂、试剂盒 胃蛋白酶中性福尔马林缓冲液甲酰胺乙醇仪器、耗材 探针试剂盒荧光显微镜实验步骤 一、切片及制片1.从福尔马林固定石蜡包埋的组织块上切厚组织切片,37°C 水浴展片。2.贴在正含电荷的载玻片上。3.另连续切一张相应的组织切片,用苏木素和伊红(H&E) 染色(见注释 2)0二、脱蜡和浸透组织
FISH-检测乳腺癌中-HER2-扩增实验
基因扩增经常在人肿瘤细胞中被检测到并在肿瘤发生中起重要的作用。用比较基因组杂交对肿瘤细胞进行全基因组扫描,揭示出在实体肿瘤基因组的许多区域有基因拷贝数的改变。对改变区域 DNA 的深入研究显示在实体瘤中复杂的 DNA 重排涉及多个基因并跨越几个 Mb。在染色体倍体变化中,经常伴有基因重排。尽管研究
荧光原位杂交(FISH)技术的应用与实验流程
分子诊断是诊断市场增长最快的部分。萤光原位杂交和FISH分析包括700万人口的5亿美元的市场。。FISH市场预计为11%,较去年同期成长为下一个五年。400至500万人口的市场,在美国产生。FISH测试是用来识别生物标记DNA / RNA的形式。它是用于遗传作图和基因表达分析公知的方法。这种
肿瘤细胞的荧光免疫表型和-FISH-共分析实验
实验材料 正常鼠血清 鼠单克隆抗地髙辛抗体 鼠抗 FITC 抗体 AMCA-亲和素 FITC-亲和素 生物素化山羊抗亲和素抗体
肿瘤细胞的荧光免疫表型和-FISH-共分析实验
实验材料 正常鼠血清鼠单克隆抗地髙辛抗体鼠抗 FITC 抗体AMCA-亲和素FITC-亲和素生物素化山羊抗亲和素抗体Cy3 标记的亲和素Cy3 标记的山羊抗鼠抗体Cy3 标记的兔抗山羊抗体Cy3 标记的驴抗兔抗体Cy3 标记的兔抗鼠抗体 地高辛标记的山羊抗鼠抗FITC 标记的驴抗鼠抗体FIT
肿瘤细胞的荧光免疫表型和-FISH-共分析实验
染色体畸变通常在大多数血液肿瘤和各种实体瘤中检测到,在临床病理上,经常与判定肿瘤的直接形态和免疫表型特征有关。染色体畸变的检测为逐条诊断和肿瘤遗传分类奠定了基础。尤其在白血病和淋巴瘤中,许多主要的染色体畸变与疾病的临床分期有关。另外,在肿瘤预后过程中,还将发生其他染色体的畸变。因此,细胞遗传学结果对
FISH-检测乳腺癌中-HER2-扩增实验
试剂、试剂盒 胃蛋白酶 中性福尔马林缓冲液 甲酰胺 乙醇 仪器、耗材 探针试剂盒
一例持续发热、重度肝脾肿大病例分析
患者男,2岁,表现为持续发热和重度肝脾肿大。全血细胞计数显示白血球明显增多(白细胞计数,102000/μL)、贫血(血红蛋白,5.8 g/dL)、血小板减少(血小板,59000/μL)。外周血(PB)涂片示:可见中毒颗粒及空泡变性的中性粒细胞,有圆形或不规则细胞核及嗜碱性液泡化细胞质的无定形细胞,无
5例t(9;22)(q34;q11)同时伴有重现性遗传学异常的血液肿瘤...
5例t(9;22)(q34;q11)同时伴有重现性遗传学异常的血液肿瘤的研究 t(9;22)(q34;q11)在分子水平上导致BCR-ABL融合基因形成,见于95%左右的慢性髓系白血病(CML),25%的成人B细胞急性 淋巴细胞白血病(B-ALL)和2-4%的儿童ALL,少见于急性髓系白血病(AM
羊水细胞用于间期核-FISH-分析的非培养制备方法
实验材料羊水标本如需保存则应避光室温下存放试剂、试剂盒低渗液Triton X -100PBS乙醇丙酮固定剂仪器、耗材最小量必要培养基螺旋管盖锥底离心管离心机细胞离心机实验步骤展开
病理学中的显色原位杂交和-FISH-实验
试剂、试剂盒 Tris-EDTA 溶液PBSDigest-All 3福尔马林磷酸缓冲液二甲苯乙醇生物素和地高辛标记的DNA探针CAS-block (Zymed Laboratories)链霉亲和素仪器、耗材 石蜡切片烤箱微波炉染色缸热循环仪潮湿烤箱实验步骤 一、杂交前玻片处理1.于 60°C 烤箱中
荧光原位杂交(FISH)之三:实验方法及步骤
1)探针变性将探针在75oC恒温水浴中温育5min,立即置0oC,5~10min,使双链DNA探针变性。2)标本变性①将制备好的染色体玻片标本于50oC培养箱中烤片2~3h。(经Giemsa染色的标本需预先在固定液中退色后再烤片)。 ②取出玻片标本,将其浸在70~75oC的体积分数70%
荧光原位杂交FISH和荧光探针有什么区别?
荧光原位杂交技术(FISH):是荧光标记的DNA探针与细胞核内的DNA靶序列杂交后,通过荧光显微镜观察(细胞、组织)细胞核彩色探针信号,获得特定DNA靶序列结构和数目异常的信息。
病理学中的显色原位杂交和-FISH-实验
试剂、试剂盒 Tris-EDTA 溶液 PBS Digest-All 3 福尔马林磷酸缓冲液 二甲苯 乙醇 生物素和地高辛标
Mass-Frontier碎片离子检索功能(FISh)在士的宁...(二)
3.3士的宁完整裂解机理LTQ Orbitrap XL的线性离子阱相比传统三维离子阱具有更高的离子容量,故具有优异的多级质谱能力,能够高效的捕获前级离子进行碎裂,并获得高灵敏度的碎片离子信息,在对士的宁母离子的采集过程中,获得了其四级有效质谱信息(MS4)。通过多级质谱解析,总结出士的宁完整裂解