建立随机重叠DNA插入文库实验
试剂、试剂盒 乙酸铵 ATP 乙醇 甘油 蒸馏水 IPTG MgCl2 NaCl 酚 聚乙二醇 TE TM 缓冲液 Tris-HCl TTE 缓冲液 X-gal T4 噬菌体 DNA 连接酶 T4 噬菌体 DNA 聚合酶 T4 噬菌体多核苷酸激酶 大肠杆菌 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶 聚丙烯酰胺凝胶 噬菌体 DNA ......阅读全文
建立随机重叠DNA插入文库实验
下面的方案描述了鸟枪法测序的起始步骤,从靶 DNA 的剪切到用 M13 噬菌体载体构建 DNA 片段文库,也包括断裂靶 DNA 的两种方法--超声法和喷雾法,以及用 DNA 聚合酶修复片段末端的技术要点。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W.拉塞尔。试剂、
建立随机重叠DNA插入文库实验
试剂、试剂盒 乙酸铵 ATP 乙醇 甘油 蒸馏水 IPTG MgCl2 NaCl 酚
重叠延伸PCR
实验方法原理 此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且不需要内切酶消化和连接酶处理,可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。重叠延伸PCR在基因的定点突变、融合基因的构建、长片段基因的合成、基因敲除以及目的基
重叠延伸PCR
基本方案 实验方法原理 重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR)由于采用具有
重叠延伸PCR
重叠延伸PCR技术主要用于获得其它依靠限制性内切酶消化方法难以得到的产物。可用于:(1)基因的定点突变;(2)融合基因的构建;(3)长片段基因的合成;(4)基因敲除以及目的基因的扩增实验方法原理重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SO
重叠基因的特点
所谓重叠基因(overlapping gene)是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。例如,大基因内包含小基因;前后两个基因首尾重叠一个或两个核苷酸;几个基因的重叠,几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起,等等。重叠基因
重叠延伸PCR简介
重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来.此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且
重叠PCR—overlap-PCR
1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理:变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后,再进行指数扩增的PCR过程。 2、基本原理*步:PCR产生两个或者几个片段,这几个片段之间必须有重叠区。 第二步:以两个片段为例,见上图,*步产生的两个片段,A D链之间有互补,B
重叠感染的概念
抗广谱抗生素长期使用,使敏感菌受到抑制,不敏感菌(如真菌等)趁机在体内繁殖生长,造成二重感染,又称菌群交替症。合并应用肾上腺皮质激素,抗代谢或抗肿瘤药物更易引发二重感染。
基因重叠的概念
基因重叠指同一 DNA 序列可以得到不同的mRNA,从而编码多种具有重叠序列的蛋白质的基因(核苷酸)。在病毒基因组比较明显的重叠基因,在其他 生物细胞中则仅见于线粒体和质粒DNA, 这种结构使较小的基因组能够携带较多的遗 传信息。
重叠基因的调控序列
①在5′端转录起始点上游约20~30个核苷酸的地方,有TATA框(TATA box)。TATA框是一个短的核苷酸序列,其碱基顺序为TATAATAAT。TATA框是启动子中的一个顺序,它是RNA聚合酶的重要的接触点,它能够使酶准确地识别转录的起始点并开始转录。当TATA框中的碱基顺序有所改变时,mRN
重叠感染的症状原由
抗菌药物的使用可致菌群改变,使耐该种抗菌药物的微生物引发新的感染。引起新感染的细菌可以是在正常情况下对身体无害的寄生菌,由于菌群改变,其他能抑制该菌生长的无害菌为药物所抑杀后转变为致病性菌,或者也可以是原发感染菌的耐药菌株。但是,当长期、大量使用广谱抗菌药物时,情况就发生了根本的改变:使原本并不致病
重叠感染的感染特点
抗广谱抗生素长期使用,使敏感菌受到抑制,不敏感菌(如真菌等)趁机在体内繁殖生长,造成二重感染,又称菌群交替症。合并应用肾上腺皮质激素,抗代谢或抗肿瘤药物更易引发二重感染。
重叠群的定义
重叠群(contig):彼此可以通过末端的重叠序列相互连接形成连续的DNA长片段的一组克隆。
关于重叠基因的简介
所谓重叠基因(overlapping gene)是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。例如,大基因内包含小基因;前后两个基因首尾重叠一个或两个核苷酸;几个基因的重叠,几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起,等等。重叠
重叠综合征病例报告
重叠综合征(overlapsyndromes,OS)是指患者同时或先后出现两种或两种以上明确诊断的结缔组织病,一般为多发性肌炎(polymyositis,PM)、关节炎">类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)、系统性红斑狼疮(systemiclupuserythematosu
关于重叠基因的基本介绍
重叠基因是在1977年发现的。早在1913年A.H.斯特蒂文特已在果蝇中证明了基因在染色体上作线状排列,20世纪50年代对基因精细结构和顺反位置效应等研究的结果也说明基因在染色体上是一个接着一个排列而并不重叠。但是1977年F.桑格在测定噬菌体ΦX174的DNA的全部核苷酸序列时,却意外地发现基
发生重叠感染的原因分析
抗菌药物的使用可致菌群改变,使耐该种抗菌药物的微生物引发新的感染。引起新感染的细菌可以是在正常情况下对身体无害的寄生菌,由于菌群改变,其他能抑制该菌生长的无害菌为药物所抑杀后转变为致病性菌,或者也可以是原发感染菌的耐药菌株。但是,当长期、大量使用广谱抗菌药物时,情况就发生了根本的改变:使原本并不致病
治疗重叠综合征的简介
由于重叠综合征的本质尚不清楚,其治疗方法也有待研究。以系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎或系统性硬皮病为中心病的重叠综合征,其免疫异常显著,临床症状明显,常呈现坏死性血管炎的病理特点。一般均采用大剂量激素治疗,也有合并应用免疫抑制剂者。对于类风湿性关节炎相关重叠综合征出现严重的关节畸形,可行适当的手
分子遗传学词汇重叠基因
所谓重叠基因(overlapping gene)是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。例如,大基因内包含小基因;前后两个基因首尾重叠一个或两个核苷酸;几个基因的重叠,几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起,等等。重叠基因
重叠群作图的技术特点
中文名称重叠群作图英文名称contig mapping定 义依靠重叠群单元序列的叠加以确定染色体DNA物理图的技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
关于重叠基因的历史发现介绍
重叠基因 是在1977年发现的。早在1913年A.H.斯特蒂文特已在果蝇中证明了基因在染色体上作线状排列,50年代对基因精细结构和顺反位置效应等研究的结果也说明基因在染色体上是一个接着一个排列而并不重叠。但是1977年F.桑格在测定噬菌体ΦX174的DNA的全部核苷酸序列时,却意外地发现基因D中
关于重叠感染的症状原由介绍
抗菌药物的使用可致菌群改变,使耐该种抗菌药物的微生物引发新的感染。引起新感染的细菌可以是在正常情况下对身体无害的寄生菌,由于菌群改变,其他能抑制该菌生长的无害菌为药物所抑杀后转变为致病性菌,或者也可以是原发感染菌的耐药菌株。 但是,当长期、大量使用广谱抗菌药物时,情况就发生了根本的改变:使
重叠延伸产生特异位点诱变实验
试剂、试剂盒 扩增缓冲液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 模板 DNA
X射线能谱重叠峰的识别
提出了一种通过谱线权重来正确识别X射线能谱重叠峰的新方法。应用该方法 ,成功地分析了Ti合金微区中能量差为 2 0eV的Ti和V的重叠峰。实验表明 ,该方法简便、可靠 ,并可适用于K Zn之间元素的分析
筛窦重叠黏液囊肿病例分析
临床资料 患者,女,32岁。因“右眼突出半月”入院。入院前半月开始右眼胀,伴右眼外凸,无明显双侧鼻塞,首诊眼科予眼眶CT水平位扫描示右侧鼻窦软组织肿块,眶纸板骨质缺损,转我科门诊,予鼻窦增强CT冠状位扫描,考虑右侧额筛黏液囊肿收住院。人院时查体:右侧钩突中鼻道黏膜向鼻腔突出,并与中鼻甲前部融合,表面
重叠延伸产生特异位点诱变实验
试剂、试剂盒 扩增缓冲液热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物模板 DNA仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头微型离心管酶可调式移液器可按所需扩增条件设定程序的热循环仪实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液的成分及所需试剂请见附录 1。将贮存液稀释释到适当的浓度。10x 扩
关于重叠综合征的预后介绍
重叠综合征的预后均决定于其类型。Ⅰ型重叠综合征5年生存率30%,较单一系统性红斑狼疮5年生存率(大于70%)明显减低。其死亡原因主要为心血管并发症及中枢神经系统损害,死于肾衰者较少。Ⅲ型重叠综合征的预后决定于以哪一种结缔组织病为主。Ⅱ型综合征以MCTD为代表,预后较好。
重叠延伸产生特异位点诱变实验
重叠延伸法进行特异位点诱变需要四种引物(请见图 13-4)(Higuchi et al.1988, Hetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物模
重叠综合征的基本信息介绍
重叠综合征指的是患有两种或两种以上结缔组织病的重叠,亦称为重叠结缔组织病。结缔组织病的重叠发生通常以传统的几个结缔组织病最常见,如系统性红斑狼疮、硬皮病、皮肌炎和多发性肌炎、类风湿关节炎、结节性多动脉炎等。也有以其中的一种或两种与其他结缔组织病或自身免疫性疾病发生重叠,如干燥综合征、韦格纳肉芽肿