重叠延伸产生特异位点诱变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 模板 DNA 仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头 微型离心管酶 可调式移液器 可按所需扩增条件设定程序的热循环仪 实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液的成分及所需试剂请见附录 1。将贮存液稀释释到适当的浓度。10x 扩增缓冲液含有四种 dNTP 的混合溶液,每种 dNTP 浓度为 20 mm......阅读全文

重叠延伸产生特异位点诱变实验

            试剂、试剂盒 扩增缓冲液 热稳定 DNA 聚合酶 琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶 寡核苷酸引物 模板 DNA

重叠延伸产生特异位点诱变实验

重叠延伸法进行特异位点诱变需要四种引物(请见图 13-4)(Higuchi et al.1988, Hetal.1989)。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。试剂、试剂盒扩增缓冲液热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物模

重叠延伸产生特异位点诱变实验

试剂、试剂盒 扩增缓冲液热稳定 DNA 聚合酶琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶寡核苷酸引物模板 DNA仪器、耗材 带屏障装置的自动移液器吸头微型离心管酶可调式移液器可按所需扩增条件设定程序的热循环仪实验步骤 材料缓冲液和溶液贮存液,缓冲液的成分及所需试剂请见附录 1。将贮存液稀释释到适当的浓度。10x 扩

重叠延伸PCR

实验方法原理 此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且不需要内切酶消化和连接酶处理,可利用这一技术很快获得其它依靠限制性内切酶消化的方法难以得到的产物。重叠延伸PCR技术成功的关键是重叠互补引物的设计。重叠延伸PCR在基因的定点突变、融合基因的构建、长片段基因的合成、基因敲除以及目的基

重叠延伸PCR

基本方案             实验方法原理 重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR)由于采用具有

重叠延伸PCR

重叠延伸PCR技术主要用于获得其它依靠限制性内切酶消化方法难以得到的产物。可用于:(1)基因的定点突变;(2)融合基因的构建;(3)长片段基因的合成;(4)基因敲除以及目的基因的扩增实验方法原理重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SO

重叠延伸PCR简介

重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称SOE PCR)由于采用具有互补末端的引物,使PCR产物形成了重叠链,从而在随后的扩增反应中通过重叠链的延伸,将不同来源的扩增片段重叠拼接起来.此技术利用PCR技术能够在体外进行有效的基因重组,而且

通过重叠延伸和基因-SOEing-进行-PCR-突变实验

通过重叠延伸和基因 SOEing 进行 PCR 突变实验             试剂、试剂盒 无菌 H2O PCR 缓冲液

通过重叠延伸和基因-SOEing-进行-PCR-突变实验

本实验介绍关于通过重叠延伸和基因 SOEing 进行 PCR 突变的过程。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒无菌 H2OPCR 缓冲液限制性酶和缓冲液Taq DNA 聚合酶PCR 模板5'和 3'引物dNTP仪器、耗材DNA 测序装置热循环仪琼

通过重叠延伸和基因-SOEing-进行-PCR-突变实验

试剂、试剂盒 无菌 H2OPCR 缓冲液限制性酶和缓冲液Taq DNA 聚合酶PCR 模板5'和 3'引物dNTP仪器、耗材 DNA 测序装置热循环仪琼脂糖凝胶电泳设备实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂无菌 H2O2. 酶和酶缓冲液10XPCR 缓冲液(Roche),包含 1

剪接重叠延伸聚合酶链反应的原理和应用特点

中文名称剪接重叠延伸聚合酶链反应英文名称splicing overlapping extension PCR;SOE-PCR定  义利用一系列聚合酶链反应,使产物两端彼此重叠,以便剪接成长片段,其间越过某段序列可使之缺失的PCR方法。一些基因工程抗体就是用此法制备的。应用学科生物化学与分子生物学(一

基因重叠的概念

基因重叠指同一 DNA 序列可以得到不同的mRNA,从而编码多种具有重叠序列的蛋白质的基因(核苷酸)。在病毒基因组比较明显的重叠基因,在其他 生物细胞中则仅见于线粒体和质粒DNA, 这种结构使较小的基因组能够携带较多的遗 传信息。

重叠基因的特点

所谓重叠基因(overlapping gene)是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。例如,大基因内包含小基因;前后两个基因首尾重叠一个或两个核苷酸;几个基因的重叠,几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起,等等。重叠基因

重叠感染的概念

抗广谱抗生素长期使用,使敏感菌受到抑制,不敏感菌(如真菌等)趁机在体内繁殖生长,造成二重感染,又称菌群交替症。合并应用肾上腺皮质激素,抗代谢或抗肿瘤药物更易引发二重感染。

重叠PCR—overlap-PCR

1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理:变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后,再进行指数扩增的PCR过程。  2、基本原理*步:PCR产生两个或者几个片段,这几个片段之间必须有重叠区。 第二步:以两个片段为例,见上图,*步产生的两个片段,A D链之间有互补,B

引物延伸反应

Primer extension analysis is used to determine the location and quantitate the amount of the 5´-end of specific RNAs. An end-labeled oligonucleotide i

引物延伸实验

实验材料 RNA试剂、试剂盒 T4多核苷酸激酶dATP醋酸钠乙醇EDTARNaseA苯酚氯仿仪器、耗材 恒温培养箱NAP-5柱-70°C冰箱低温离心机实验步骤 1.  依次加入下列试剂,建立用以标记引物的反应混合液(终体积10 μl)(1)2.5 μl  H2O(2)1 μl  10×T4多核苷酸激

引物延伸实验

            实验材料 RNA 试剂、试剂盒 T4多核苷酸激酶 dATP 醋酸钠 乙醇

引物延伸实验

引物延伸分析用于确定位置和定量特定RNA的5'-端的数量。结束标记的寡核苷酸杂交,RNA和利用中存在的脱氧核苷酸逆转录作为底漆。因此RNA的反转录成cDNA,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。cDNA的长度反映了基地之间的标记引物和RNA的5'-端核苷酸的数量,基因产品的数量是针对性的RN

拉力机上两点延伸计、是用来干嘛的、起什么作用

拉力机上两点延伸计、是用来干嘛的、起什么作用?   拉力机上大变形引伸计由传感器、带挂钩的调节杆、固定杆、标距限位板以及设于调节杆上部和传感器下部的一组左右对称的上刀刃组、下刀刃组组成,其特征在于:设置在固定杆下部,并与调节杆下部挂钩挂接的传感器为一抽出式位移传感器;该抽出式传感器包括盒体、钢丝绳以

重叠群的定义

重叠群(contig):彼此可以通过末端的重叠序列相互连接形成连续的DNA长片段的一组克隆。

重叠基因的调控序列

①在5′端转录起始点上游约20~30个核苷酸的地方,有TATA框(TATA box)。TATA框是一个短的核苷酸序列,其碱基顺序为TATAATAAT。TATA框是启动子中的一个顺序,它是RNA聚合酶的重要的接触点,它能够使酶准确地识别转录的起始点并开始转录。当TATA框中的碱基顺序有所改变时,mRN

重叠感染的感染特点

抗广谱抗生素长期使用,使敏感菌受到抑制,不敏感菌(如真菌等)趁机在体内繁殖生长,造成二重感染,又称菌群交替症。合并应用肾上腺皮质激素,抗代谢或抗肿瘤药物更易引发二重感染。

重叠感染的症状原由

抗菌药物的使用可致菌群改变,使耐该种抗菌药物的微生物引发新的感染。引起新感染的细菌可以是在正常情况下对身体无害的寄生菌,由于菌群改变,其他能抑制该菌生长的无害菌为药物所抑杀后转变为致病性菌,或者也可以是原发感染菌的耐药菌株。但是,当长期、大量使用广谱抗菌药物时,情况就发生了根本的改变:使原本并不致病

关于重叠基因的简介

  所谓重叠基因(overlapping gene)是指两个或两个以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成为两个或两个以上基因的组成部分。重叠基因有多种重叠方式。例如,大基因内包含小基因;前后两个基因首尾重叠一个或两个核苷酸;几个基因的重叠,几个基因有一段核苷酸序列重叠在一起,等等。重叠

新一代特异性的抗生素靶点——延伸因子P

  据在12月13日的《科学》(Science)杂志上报道,来自德国马克斯.普朗克生物物理化学研究所的科学家们鉴别了一个对抗细菌的潜在新靶点:EF-P因子。EF-P对生成肠出血性大肠杆菌(EHEC)或沙门氏菌毒力必需的蛋白质起至关重要的作用。研究结果表明,用药物阻断EF-P可以削弱致病细菌的适应性,

基因翻译的延伸​

此过程在真核细胞和原核细胞中高度类似,下面只以原核细胞为例进行讨论。涉及到的因子主要有EF·Tu和EF·G,在真核细胞中对应的名称分别是是eEF1和eEF2。A. tRNA的转运和入位(1)非起始AA·tRNA结合EF·Tu·GTP形成一个三元复合物;(2)该三元复合物结合至核糖体P位点,tRNA反

电热套功能延伸

电热套是用无碱玻璃纤维作绝缘材料,将Cr20Ni80合金丝簧装置于其中,用硅酸铝棉经真空定型的半球形保温体保温,外壳一次性注塑成型,上盖采用静电喷电热套常见外观塑工艺,由于采用球形加热,可使容器受热面积达到60%以上。控温采用计算机芯片做主控单元,采用多重数字滤波电路,模糊PID控制算法,具有测量精

引物延伸的概念

中文名称引物延伸英文名称primer extension定  义从与模板(RNA或DNA)结合的引物3′-OH端开始,在核酸聚合酶的作用下,按照碱基配对的原则,逐个连上核苷酸,由5′→3′方向合成与模板互补链的过程。该反应可用于聚合酶链反应、单核苷酸多态性检测等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学

发生重叠感染的原因分析

抗菌药物的使用可致菌群改变,使耐该种抗菌药物的微生物引发新的感染。引起新感染的细菌可以是在正常情况下对身体无害的寄生菌,由于菌群改变,其他能抑制该菌生长的无害菌为药物所抑杀后转变为致病性菌,或者也可以是原发感染菌的耐药菌株。但是,当长期、大量使用广谱抗菌药物时,情况就发生了根本的改变:使原本并不致病