一级菌种的分离、转管和培养实验
一、实验目的1.了解一级菌种分离方法;2.掌握一级菌种分离、转管的无菌操作规程;3.学会子实体组织分离和菌褶抹孢分离的具体操作步骤;4.学会一级菌种培养的关键技术。二、实验设备、工具和材料1.设备接种箱或接种室、恒温箱等。2.工具接种针(接种钩、接种环)、接种耙、不锈钢镊子、手术刀、酒精灯、火柴、无菌培养皿、玻璃烧杯等。3.材料平菇、香菇或滑子菇新鲜的子实体、斜面菌种、斜面培养基、无菌水、75%酒精棉球、可燃烧酒精等。三、实验步骤1.子实体组织分离法①将接种工具和除了种菇、斜面菌种以外的实验材料预先移进接种箱(室)内,按常规法消毒备用。②选用平菇、香菇和滑子菇等中的任意一种新鲜的菇蕾作为种菇。用手术刀将种菇菌柄下部切去后,移进接种箱内。③用75%的酒精棉球擦拭菌盖和菌柄,以及操作者的双手进行表面消毒。④在接种箱内酒精灯火焰旁的无菌区内,用经火焰灭菌的手术刀从菌盖到菌柄轻轻划一道口,然后用双手将种菇撕成两半,一半放在无菌培养皿内......阅读全文
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
实验方法原理 在添加 20%(fetal bovine serum, FBS) 的 Ham's F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。试剂、试剂盒 Ham F12FBSD-PBSA仪器、耗材 手术
在使用后,菌种保存管的保存环境要求
菌种保存管采用的是低温冷冻保存法,因此,使用后,需放置低温环境,如-20℃、-80℃或液氮中保存,而且温度越低,保存效果越好。用户需根据菌种的保存要求选择具体保存温度。
菌种保藏实验_核酸的保存
实验步骤1. 以溶液形式置低温保存DNA 溶于无菌 TE 缓冲液(10 mmol/L Tris • HCl,1 mmol/L EDTA,pH 8.0)中,其中 EDTA 的作用是整合溶液中二价金属离子,从而抑制 DNA 酶的活性(Mg2+ 是 DNA 酶的激活剂)。 TE 的 pH 为 8.0 是为
菌种培养基配方有哪些
(1)一级种培养基配方马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基):去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升,酸碱度自然。马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基):去皮马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂20克,水1000毫升,酸碱度自然。(2)二、三级种培养基配方木屑麦皮培养基:干杂木屑78
生化培养箱能否保存菌种
一、什么是生化培养箱生化培养箱是植物、、微、遗传、病毒、医学、环保等科研,教育部门不可缺少的一种实验室设备,广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验以及低温微、植物细胞、嗜热细菌等的培养等。在食用菌上主要用于菌种的生长培养,特别是母种和少量原种的培养,如果在开空调控温没有必要的情况下,用生化培养
生化培养箱能否保存菌种
生化培养箱能否保存菌种 一、什么是生化培养箱 生化培养箱是植物、、微、遗传、病毒、医学、环保等科研,教育部门不可缺少的一种实验室设备,广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验以及低温微、植物细胞、嗜热细菌等的培养等。在食用菌上主要用于菌种的生长培养,特别是母种和少量原种的培养,如果在开空调
生化培养箱能否保存菌种?
生化培养箱是植物、、微、遗传、病毒、医学、环保等科研,教育部门不可缺少的一种实验室设备,广泛应用于低温恒温试验、培养试验、环境试验以及低温微、植物细胞、嗜热细菌等的培养等。在食用菌上主要用于菌种的生长培养,特别是母种和少量原种的培养,如果在开空调控温没有必要的情况下,用生化培养箱控制的温度培养菌种,
菌种培养基配方有哪些
(1)一级种培养基配方马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基):去皮马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000毫升,酸碱度自然。马铃薯蔗糖琼脂培养基(PSA培养基):去皮马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂20克,水1000毫升,酸碱度自然。(2)二、三级种培养基配方木屑麦皮培养基:干杂木屑78
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,
胰腺上皮细胞分离及培养实验
实验方法原理从豚鼠胰腺组织分离细胞,用纱布或尼龙网过滤细胞悬液,将过滤的细胞悬液轻轻加于 BSA 液上面。通过 3 次连续离心和混悬细胞,使呈团状的细胞分散。然后,将细胞接种于涂有胶原蛋白的培养器皿。试剂、试剂盒F12K 组织培养液含有 20% 小牛血清HBSSHBSS-DVC葡萄糖胰蛋白酶液胰蛋白
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体
实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol
菌种保藏实验_穿刺法
实验方法原理该方法操作简便,是短期保藏菌种的一种有效方法。实验材料细菌酵母菌放线菌霉菌试剂、试剂盒半固体培养基仪器、耗材培养试管穿刺管石蜡膜接种环接种针试管塞实验步骤1.用接种针下端挑取菌种(针必须挺直),自半固体培养基的中心垂直刺入半固体培养中,直至接近试管底部,但不要穿透,然后沿原穿刺线将针退出
贴壁培养系统转瓶培养系统的简介
培养贴壁依赖型细胞最初采用转瓶系统培养。转瓶培养一般用于小量培养到大规模培养的过渡阶段,或作为生物反应器接种细胞准备的一条途径。 细胞接种在旋转的圆筒形培养器-转瓶中,培养过程中转瓶不断旋转,使细胞交替接触培养液和空气,从而提供较好的传质和传热条件。 转瓶培养具有结构简单,投资少,技术成熟,重
血管内皮细胞的分离和培养
实验方法原理 本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料 D-PBSA胰蛋白酶EDTA人脐带胶原蛋内酶H冷的新生小牛血试剂、试剂盒 Hank平衡盐溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生长培养液仪器、耗材 培养瓶手术刀和22号刀片手术针20ml注射器鳄鱼夹动脉夹尖头剪棉纸
关于脂肪干细胞的分离和培养介绍
将脂肪组织冲净,称重后消化。当消化完成后,弃掉上层未消化的脂肪组织,将下层的细胞悬液以1500 r/min(375g),离心10 min 后弃上清,得到离心管底部的脂肪干细胞团,将其重悬,密度调整到1×105mL-1,然后接种在培养面积为25 cm2 的细胞培养瓶中。 当干细胞长满培养瓶后按一
牛角质上皮细胞的分离和培养
实验步骤1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇简单处理一下。2)用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织(最好选取枝状角膜边缘组织)。3)将上述组织置于干燥的聚赖氨酸包被的表面,让其黏附全少 10 分钟。4) 加入培养液(MEM, 含 10%
牛角质上皮细胞的分离和培养
1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇简单处理一下。2)用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织(最好选取枝状角膜边缘组织)。3)将上述组织置于干燥的聚赖氨酸包被的表面,让其黏附全少 10 分钟。4) 加入培养液(MEM, 含 10%FCS,
牛角质上皮细胞的分离和培养
实验步骤 1) 用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗涤牛眼,水漂洗,再用 70% 乙醇简单处理一下。2)用 3.5 mm 活组织钻孔器切取眼小块上皮组织连同其下的结缔组织(最好选取枝状
血管内皮细胞的分离和培养
分离人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分离牛主动脉内皮细胞(PAECs)分离小鼠心脏内皮细胞(MCECs)分离人心脏内皮细胞(HCEC)实验方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改写的。实验材料D-PBSA
微生物的分离、接种和培养技术
一、实验的目的和内容目的:掌握微生物接种和分离纯化技术,掌握无菌操作技术。内容:用平板划线法分离微生物;学习斜面接种及穿刺接种等无菌操作技术。二、基本原理在自然界中,各种微生物是在互为依赖的关系下共同生活的。因此,为了取出特定的微生物进行纯培养,必须从中把他们分离出来。微生物接种技术是进行微生物实验
纯种微生物的分离、转种和培养
一、 实验目的 1、了解微生物 分离和纯化的原理;2、掌握常用的分离纯化微生物的方法;3、掌握菌落特征的观察。4、学习掌握微生物的几种接种技术 5、 建立无菌操作的概念,掌握无菌操作的基本环节二、实验原理 从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。
纯种微生物的分离、转种和培养
实验概要本实验介绍了微生物分离和纯化的基本原理,旨在掌握常用的分离纯化微生物的方法、菌落特征的观察、微生物的几种接种技术、建立无菌操作的概念及无菌操作的基本环节。实验原理从混杂微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物分离与纯化。平板分离法普遍用于微生物的分离与纯化。其基本原理是选择
菌种保藏时为什么要进行分离纯化?
分离纯化后才能获得单一菌株,单一菌株进行菌种保藏才有意义,防止菌种交叉污染和变异,这也是菌种保存的基本原则。
大鼠神经元细胞分离和培养实验_培养神经元支持物制备
试剂、试剂盒浓硝酸仪器、耗材玻璃盖玻片层流柜实验步骤一、盖玻片的预处理1. 玻璃盖玻片放在瓷染色架上,用蒸馏水冲洗。2. 架子放在玻璃容器中,浓硝酸泡 48 小时。3. MilliQ 水漂洗盖玻片 1 小时,重复 3 次。4. 200℃ 烤 8 小时灭菌盖玻片。5. 在层流柜中将盖玻片放在 60 m
新型扩增多潜能干细胞的分离、培养和鉴定的实验方案
小鼠胚胎发育从单个受精卵到8细胞早期具有全能性,即单个卵裂球具有分化为胚胎和胚外组织各种类型细胞的潜能。8细胞后期胚胎开始第一次谱系分离,外层的细胞形成滋养外胚层(TE),以后分化为胎盘的主要细胞成分,滋养层细胞;内在的细胞形成内细胞团(ICM),在囊胚阶段,内细胞团进一步分化为上胚层(epib
菌种培养中的摇床主要起什么作用
摇床可以让菌液不停震荡,从而有利于与空气接触,对于需氧菌是非常有利的。而且也可以让细菌与培养液中的营养物质更充分的接触
智能霉菌培养箱的菌种如何保存
智能霉菌培养箱也称种子制备,意思是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。菌种的培养我们可以选择恒温恒湿培养箱,来达到温度和湿度在一台机器上就可以完成,不需要购买两台或以上。 保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用