一级菌种的分离、转管和培养实验
一、实验目的1.了解一级菌种分离方法;2.掌握一级菌种分离、转管的无菌操作规程;3.学会子实体组织分离和菌褶抹孢分离的具体操作步骤;4.学会一级菌种培养的关键技术。二、实验设备、工具和材料1.设备接种箱或接种室、恒温箱等。2.工具接种针(接种钩、接种环)、接种耙、不锈钢镊子、手术刀、酒精灯、火柴、无菌培养皿、玻璃烧杯等。3.材料平菇、香菇或滑子菇新鲜的子实体、斜面菌种、斜面培养基、无菌水、75%酒精棉球、可燃烧酒精等。三、实验步骤1.子实体组织分离法①将接种工具和除了种菇、斜面菌种以外的实验材料预先移进接种箱(室)内,按常规法消毒备用。②选用平菇、香菇和滑子菇等中的任意一种新鲜的菇蕾作为种菇。用手术刀将种菇菌柄下部切去后,移进接种箱内。③用75%的酒精棉球擦拭菌盖和菌柄,以及操作者的双手进行表面消毒。④在接种箱内酒精灯火焰旁的无菌区内,用经火焰灭菌的手术刀从菌盖到菌柄轻轻划一道口,然后用双手将种菇撕成两半,一半放在无菌培养皿内......阅读全文
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤1. 将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流
小鼠角质细胞的分离和培养
实验步骤 1) 将 1~2 天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用 1% 碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠, 流水彻底冲洗,然后用 70% 乙醇洗两次。2) 上除小鼠的四肢和尾巴。3) 将小鼠从尾巴至鼻子的皮肤作一简单切口,用大鼠牙齿镊轻轻将整个身体的皮
小鼠角质细胞的分离和培养
实验试剂HBSS: NaCl 8g/LKCl 400mg/LKH2PO4 60mg/L无水Na2PO4 47.86mg/L无水葡萄糖 1000mg/LNaHCO3 350mg/L实验材料妊娠期BALB/c小鼠实验步骤将1~2天龄新生裸鼠窒息后,置于培养皿中,用1%碘聚乙烯吡咯烷酮液洗净裸鼠,流水彻底
液氮罐冷冻培养菌种的过程
液氮冷冻培养菌种的过程 液态氮气,气化为氮气,的冷冻效果,在医疗科研上有广泛的应用。液氮冷冻培养菌种有很好的效果。其主要方法如下:液氮冷冻培养菌种的过程:欲用液态氮保存的茧种将其在适宜培养基适温培养至静IL期前期,生芽孢的菌应培养个形成成熟的芽孢为止:取试管或flnl生长好的培养物刚无菌生理盐水洗
液氮罐冷冻培养菌种的过程
液氮冷冻培养菌种的过程 液态氮气,气化为氮气,的冷冻效果,在医疗科研上有广泛的应用。液氮冷冻培养菌种有很好的效果。其主要方法如下:液氮冷冻培养菌种的过程:欲用液态氮保存的茧种将其在适宜培养基适温培养至静IL期前期,生芽孢的菌应培养个形成成熟的芽孢为止:取试管或flnl生长好的培养物刚无菌生理盐水洗
分离和培养人角膜内皮细胞实验—角膜内皮细胞常规培养
实验材料角膜内皮细胞试剂、试剂盒CECM胰蛋白酶 EDTA仪器、耗材6孔板实验步骤(a)将细胞接种于包被有FNC的6孔板中。(b)每3天换液一次。(c)当细胞90%汇合时用胰蛋白酶消化传代。
接种、分离纯化和培养技术
一、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培养基表面要将菌液
接种、分离纯化和培养技术
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面
接种、分离纯化和培养技术
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种.1、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针.由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分.有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种.在固体培
菌种的质量鉴定实验
一、实验目的 1.了解菌种质量鉴定的目的、原理,几种常见食用菌菌种的质量标准; 2.掌握菌种质量鉴定的方法; 3.学会各级菌种外观质量鉴定的方法。 二、实验材料、工具 香菇、黑木耳、平菇、草菇的一级菌种、二级菌种各若干管(瓶),实验前去掉标签,贴上号码,以便实验后查对
哪种恒温摇床培养菌种较好
培养菌种的恒温摇床,有较大的恒温振荡空间,和较高的恒温、恒湿精度,以及较宽调速范围,才可满足菌种的培养要求。推荐大容量卧式恒温恒湿培养摇床,它具备多种功能和优势,满足你菌种培养和暗培养的生物领域。一、外壳:1、整机造型,静电喷塑箱体,内胆采用进口不锈钢镜面板,大屏幕钢化玻璃观察窗,工作腔四角圆角设计
菌种保存管最适宜的温度是多少?
贮存在-70℃以下低温中能减少冰晶形成,可极大降低冰晶形成对细菌的伤害,同时可为被保存的菌种创造更低的代谢环境,从而延长细菌保存的时间。
人PBMC分离和培养步骤和体会
1、将静脉血20ml用ACD抗凝剂以容积比血:抗凝剂=9:1抗凝处理。 2、按血:分离液=1:2注入国产淋巴细胞分离液上层,400g 20℃离心30分钟。 3、交接层重浮于4倍体积的RPMI1640并通过离心法200g,10min洗三次。 4、获得细胞可做分选或其他实验。 体会:
细菌平板划线分离培养法实验
(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的
细菌平板划线分离培养法实验
实验步骤(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养
特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法
实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排
枸椽酸的菌种的培养介绍
在柠檬酸的工业生产中都采用微生物发酵法,而有价值的只有几种曲霉菌和酵母菌,其中黑曲霉菌是工业中具有竞争力的菌种,酵母中竞争力强的有解脂假丝酵母和季也蒙赤酵母等。 黑曲霉是在琼脂上培养的,在琼脂上成局限菌落,在室温下培养10~14天,成为丰富密集的孢子梗,菌落为黑色,有时也为深褐黑色。考虑到柠檬
菌种的诱导培养及蛋白的提取
实验概要本实验通过摇瓶培养和发酵罐培养分别小量和大量诱导菌种表达,获得了目的蛋白的粗提物,通过Amylose亲和层析获得纯化蛋白。主要试剂LB培养基,2-YT培养基,诱导剂IPTG,5N氢氧化钠,2N盐酸,葡萄糖主要设备恒温振荡器,离心机,发酵罐实验材料重组菌实验步骤1. 摇瓶培养 1) 取出4℃
能用菌种保存管永久保存菌株吗?
温度越低,保藏效果越好。从目前的试验数据及实际保存效果来看,-20℃可保存1-5 年,-80℃或液氮中可保存5-10 年,不同菌种及不同的保存温度保存时间会有所不同(例如:大肠、沙门等常规细菌-20℃我们目前可以保存到6年)。但需要注意的是所保存的菌种需每年抽检进行生化特征的鉴定,确定菌株无变异。
微生物的接种、分离和培养
一、目的要求1、掌握各种分离、接种方法。2、掌握无菌操作基本环节。二、实验说明微生物在自然界中呈混杂状态存在,要获得所需菌种,必需从中把它们分离出来。在保存菌种时不慎受到到污染也需予以分纯。微生物分离和纯化的方法很多,但基本原理却是相似的,即将待分离的样品进行一定的稀释,并使微生物的细胞(或孢子)尽
平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液 试剂、试剂盒平滑肌培养液 仪
平滑肌细胞的分离和培养
实验材料0.25%胰蛋白酶和EDTA混合液试剂、试剂盒平滑肌培养液仪器、耗材Petri培养皿手术刀和10号手术刀片解剖剪组织镊实验步骤1. 从小牛取胸主动脉。2. 将胸主动脉浸入 Hanks 液。3. 分离细胞之前将动脉放在冰上。4. 将动脉放入 150 mm × 25 mm Petri 培养皿。5
微生物的接种、分离和培养
实验方法原理微生物的接种分离和培养是做细胞代谢分析和体外实验的基本步骤之一,接种分离的好坏直接影响微生物的培养以及后续的实验操作和结果(1)用于细胞分离(2)细胞纯化(3)细胞增殖培养。实验材料大肠杆菌枯草杆菌金黄色葡萄球菌酵母菌试剂、试剂盒来苏尔石炭酸溶液福尔马林牛肉膏蛋白胨仪器、耗材恒温培养箱接
把菌种培养成菌液的处理方法
⒈光合菌群: EM菌液中的光合菌群(好氧性和厌氧性)属于独立营养微生物,它能利用土壤接受太阳热能或以紫外线为能源,将土壤中的硫化氢和碳氢化合物中的氢分离出来,变有害物质为无害物质,并以植物根部的分泌物、有机物、有害气体(硫化氢等)及二氧化碳、氮等为基质,合成糖类、氨基酸、维生素类、氮素化合物和生
微生物菌种的扩大培养技术
菌种的扩大培养是发酵生产的第一道工序,该工序又称之为种子制备。种子制备不仅要使菌体数量增加,更重要的是,经过种子制备培养出具有高质量的生产种子供发酵生产使用。因此,如何提供发酵产量高、生产性能稳定、数量足够而且不被其他杂菌污染的生产菌种,是种子制备工艺的关键。 种子扩大培养的任务 工
接种、分离纯化和培养技术(二)
二、分离纯化 含有一种以上的微生物培养物称为混和培养物(Mixed culture)。如果在一个菌落中所有细胞均来自于一个亲代细胞,那么这个菌落称为纯培养(Pure culture)。在进行菌种鉴定时,所用的微生物一般均要求为纯的培养物。得到纯培养的过程称为分离纯化,方法有许多种。1、倾注平板法
微生物分离培养和鉴定
1.培养基的选择用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶,如需氧+厌氧,需氧+高渗等。2.分离和鉴定 当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时,应及时作如下检验:(1)涂片染色镜检,结果及时与临床联系;(2)转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定;(3)同时做药敏试验
接种、分离纯化和培养技术(一)
一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。1、接种工具和方法 在实验室或工厂实践中,用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同,接种针的针尖部常做成不同的形状,有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面
用日立特制的高速组织培养管分离细胞膜
一般的50 ml 培养管离心时允许使用的最高转速都在12,000rpm 以下,Hitachi 在CR—G系列高速冷冻离心机中配置了新型的专用于组织培养管的转头R18A(18,000rpm,42,000xg,8×50ml TC管)并为此专门定制了高强度的50ml 锥底TC管。用这种转头分离细胞
从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验
分离培养细胞 实验方法原理 骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分