色谱柱相关的100个问题,太实用,值得收藏!

导读色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。今天整理相关网络资料给大家学习交流。本文较长欢迎收藏。1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到各型号柱子不仅是ODS柱,其他如正向柱、氨基柱、离子交换柱等最好都有解释。答:一般的正相反相柱应该都能反冲,只有两端筛板孔径不对称的柱子不能反冲,不过目前这样的柱子已经比较少见了。反冲是为了把柱头的污染物冲洗掉,反冲后还是正着用比较好,以免柱子的两头都被污染。我们一直提倡的是:正向使用,反向冲洗。2、我在做方法开发的时候,用乙腈和水作为流动相,在调整梯度的时候发现,刚开始用60%乙腈, RT为2.5分钟,调到40%乙腈,RT没有变化,30%也没有变化,一直调到20%的时候,RT突然变到了约1......阅读全文

色谱柱相关的100个问题,太实用,值得收藏!

导读色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。今天整理相关网络资料给大家学习交流。本文较长欢迎收藏。1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什

液相色谱仪理论发展简况分享,值得收藏!

液相色谱仪开始阶段是用大直径的玻璃管柱在室温和常压下用液位差输送流动相,称为经典液相色谱仪,此方法柱效低、时间长(常有几个小时)。高效液相色谱仪(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在经典液相色谱仪的基础上,于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速

色谱柱相关的100个问题

  89、我用的是C18柱,后面黑色的是我以前跑的图,前面是我现在跑的图形,完全一样的东西,只是流动相不是一批配的(流动相的成分没变),中间柱子别人用过了,峰型怎么发生了这么大的变化啊?可能的原因是什么啊?是不是柱子出了问题啊?  答:从两个图对比很明显可以看出是柱效严重下降,且伴有肩峰。不同时间配

色谱柱相关的100个问题

色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。   1、网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是

值得收藏的搅拌桨选型须知

  搅拌操作关系到流体的传热、传质和流动,而且对搅拌效果的要求,化学和物理的过程是不同的,到现在为止,对搅拌桨的选用还是以经验性为主。搅拌桨的选型不仅要考虑搅拌效果,而且也要考虑减少动力的消耗,还必须做的经济、安全。   根据不同的分类方法可以将搅拌桨分为不同的类型,如根据流体的流动形态分,可以将

与色谱柱相关的问题汇总(五)

  41.UPLC色谱柱可以反冲吗?HPLC的色谱柱可以简单反冲,但是,UPLC的色谱柱.也是一样的吗?如果压力偏高,该怎么办?   答:如果两端筛板孔径对称,UPLC柱应该也是可以反冲的。发现压力偏高,当然也可以用反冲清洗的方法维护,UPLC柱和普通色谱柱比,只是压力高一点,不应该有什么特殊吧

与色谱柱相关的问题汇总(七)

  61.柱塞板可不可拆下用超声波清洗,会有什么不良后果?   答:不建议将柱筛板拆下清洗,因为,拆下承压的柱筛板会导致柱床发生变化,影响色谱性能。应该对污染的色谱柱先进行清洗维护,维护没有效果,再把拆洗柱筛板作为最后的手段。   62.一般正常使用一个C18柱能用多长时间?   答:柱

与色谱柱相关的问题汇总(四)

  32.普通的C18柱能作为正相色谱柱使用吗?正相色谱体系中最常用也最普通的是那种色谱柱。正相柱在使用过程中与反向柱相比有什么需要注意的地方?   答:普通C18柱作为正相柱使用,我还没听说过。正相色谱分离模式是指固定相的极性比流动相的极性大,反过来,流动相极性大就是反相。C18固定相属于疏水

与色谱柱相关的问题汇总(六)

  51.通常我们在分析天然药物成分的时候结构复杂,无法考察组分的PKa值,哪我们如何去选择最合适的流动相或者是拖尾该怎么改善呢?   答:如果天然产物中没有易电离的极性基团,就不需要用缓冲盐调节pH。如果,天然产物中既有酸性基团,也有碱性基团,譬如,有pKa=6.2的羧基和pKa=9.0的氨基

与色谱柱相关的问题汇总(二)

  11.关于色谱柱的填装问题!我个人认为现在色谱柱的填装一般有3种情况:   ①国外生产填料并填装完成成品卖到国内;   ②国外生产填料,国内填装销售;   ③国内生产填料,国内填装销售。   一般情况下,第1种情况卖的最贵,也质量最好!可是我就不明白了:如果是填料的生产很复杂的话

与色谱柱相关的问题汇总(一)

  色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。多为金属或玻璃制作。有直管形、盘管形、U形管等形状。液相色谱通常均采用填充柱。色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。   1.网上对柱子是否可以反冲一直有争论,那什么样的柱子可以反冲,什么不可以。反冲后是正者用,还是反着用。具体到

与色谱柱相关的问题汇总(八)

  72.我们的液相,为了节约成本我们自己填保护柱,用废的同型号柱子填。但填完以后做标样定量分析有所改变。请问其原因。   答:不建议自己填保护柱柱芯,填得不好的柱芯会影响分离效果,也会影响定量分析结果。你不知道废柱子里的填料是不是受了污染,另外你填的柱芯肯定没有厂商填得好,如果影响到峰形,峰面

与色谱柱相关的问题汇总(九)

  81.请问下HibarRT250-4这个柱子很特殊么?为什么很多药典中的药物分离都用它做柱子,因为才开始做药,不知道hi,bar的柱子特点是什么?   答:HibarRT250-4是Merk的一个品牌,不是很了解。大概是共用柱头,可更换的柱管。   82.在碱性条件下硅胶溶解,又生成硅羟

与色谱柱相关的问题汇总(三)

  21.正相硅胶柱一般保存在什么溶剂里面比较合适?   答:短期和长期都建议保存在正相测定所用的流动相中,一般是正己烷和极少量的异丙醇。   22.磷酸盐缓冲盐渗透力强,为什么,是因为与醋酸盐,枸椽酸盐相比,基团小吗,使用磷酸盐缓冲液与其它缓冲液相比,会使色谱柱寿命缩短多少?   答:

与色谱柱相关的问题汇总(十)

  91.流动相中加入四氢呋喃对柱子有损害吗?我现在分析一样品流动相中用到20%的四氢呋喃才能把峰分到基线.但柱子只能用一个星期分离效果就不好了.请问是四氢呋喃损坏了柱子吗?   答:四氢呋喃(THF)是反相色谱中洗脱能力极强的溶剂,比甲醇和乙腈都强很多。在流动相中加入THF能改善某些难分离的物

你值得收藏的洗板机小知识

无论是用什么仪器设备,它都是有使用注意事项的,可能一个你不注意的小细节就能引发大问题,自动洗板设备BIOBASE-9621自动洗板机也不例外。正确使用仪器设备,不仅可以延长仪器使用寿命,还可以让后续的检测数据更加准确。今天带大家熟悉一下BIOBASE9621自动洗板机使用注意事项:1、在使用前先检查

单细胞分离技术大揭秘,值得收藏

 单细胞分离是研究中困难的步骤之一,目前的分离策略主要分为三类:手动分离、荧光激活的细胞分选和微流体技术。  在进行单细胞转录分析之前,我们需要确定自己拿到了正确的细胞。如果你想要的细胞已经处于悬浮状态(比如循环肿瘤细胞),而且含量相对比较丰富,那么流式细胞分析将是你的理想选择。如果样本是实体组织,

色谱柱填充实用技巧汇总

柱层析法是世界各国实验室常用的纯化技术。若操作得当,我们可以快速从混合物中得到我们需要的化合物。和化学实际操作的诸多事情相似的是,如果没有几年甚至十几年的经验积累,色谱柱的快速及有效安装的确会成为一道坎儿。今天我们为大家总结的就是有关色谱柱填充这一环节应该注意的那些看似平常但也有很多讲究的问题。 我

色谱柱柱压高的问题

1、应该是堵了,乙腈黏度小,本来柱压就低2、用什么冲取决于是什么物质造成的堵塞,如果是盐的话,可以用90%水甲醇溶液冲,建议先正冲;如果不行再反冲,0.2-0.5ml/min冲一夜应该差不多。但要注意反冲后瑶反着用3、这个不清楚具体原因4、最好用三乙胺调pH在你的柱子容忍的范围内(见你柱子的说明书)

色谱柱柱压高的问题

1、柱子有没有堵还不好说,因为不同的设备具体copy压力也不一样。压力是纯乙腈

须知丨危废中级知识大全(值得收藏)

  1.什么是危险废物?  危险废物是指列入国家危险废物名录或者根据国家规定的危险废物鉴别标准和鉴别方法认定的具有危险特性的固体废物。  对危险废物的含义应当把握以下几点:  (1)危险废物是用名录来控制的,凡列入《国家危险废物名录》的废物种类都是危险废物,要有特殊的防治措施和管理办法。  (2)虽

TEM、SEM傻傻分不清?这份解读值得收藏

1简介透射电子显微镜(TEM),是一种把经加速和聚集的电子束透射到非常薄的样品上,电子与样品中的原子碰撞而改变方向,从而产生立体角散射。散射角的大小与样品的密度、厚度等相关,因此可以形成明暗不同的影像,影像在放大、聚焦后在成像器件(如荧光屏,胶片以及感光耦合组件)上显示出来的显微镜。 扫描电子显微镜

色谱柱的再生问题

  在色谱仪实验中,色谱柱起着相当中的角色,色谱柱是由柱管和固定相组成,按照拄管的粗细和固定相的填充方式分为填充柱和毛细管柱。测试色谱柱的重要指标一般就是分离度、理论塔板数、峰宽、峰形等,其中分离度和理论塔板数应该更为重要。因为色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现记录器上出现的一个个

色谱柱老化问题

1、色谱柱老化的目的:是彻底除去填充物中的残留溶剂和某些挥发性的物质;另一方面是促进固定液均匀牢固地分布在担体的表面上。 而且新的气相色谱柱必须老化。2、方法:在常温下使用的柱子,可直接装在色谱仪上,接通载气,冲至基线平稳即可使用;如果柱子在高温操作条件下应用,则在比操作温度稍高的温度下通载气几小时

ELISA实验中不容忽视的细节盘点,值得收藏!

ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。下面就一些常见ELISA操作过程中的问题一一分析。样品稀释酶联免

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色谱柱各类问题汇总

  色谱是一种分离分析手段,分离是核心,因此,担负分离作用的色谱柱是色谱系统的心脏。色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成,没有色谱柱就不能进行分离、定性与定量了,色谱柱是根据柱子里的填充物不同来区别的,填充物又是根据需要分离的物质的极性来选择的。。。  液相色谱柱的使用

怎样解决色谱柱柱压升高的问题?

色谱柱在使用中最常见的问题就是柱压升高,如果柱压是在长时间使用过程中缓慢增加,属于正常现象。但柱压在使用过程中突然升高(系统管路堵塞及压力传感器故障除外),可能的原因有如下几点: (1)色谱柱头的过滤筛板堵塞或污染; (2)色谱柱头的填料被样品污染; (3)色谱柱内缓冲液中的盐遇到

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 净化风淋室的正确使用方法及操作流程  净化风淋室要如何正确使用呢?净化风淋室正确使用是风机使用目的:净化风淋室有一定保持洁净室的安全使用,这样净化风淋室才维持洁净室环境的洁净度。  净化风淋室的使用方法:  1、进入洁净无尘室的人员应在外更衣室脱去外衣,除下手表、手机、饰品等物品。  2、进入内更

离子色谱柱常见的问题分析

离子色谱柱是一款高容量氢氧根体系色谱柱,用于分析疏水性离子(包括多磷酸盐,硫氰酸盐, 硫代硫酸盐, 高氯酸盐) 和多价阴离子(包括多磷酸盐和聚羧酸锌)。  一般离子色谱柱内径约为4mm4.6mm,这样的色谱柱比较适合于常规1ml/mi流量的分析,针对特定的痕量分析和联用技术的需要,新型的离子色谱