免疫筛选实验

基本方案 实验材料 cDNA 试剂、试剂盒 BHI 氯霉素 NaOH SSC 氯仿 异戊醇 TES SDS mRNA 甲硫氨酸 乙醇 乙酸钠 免疫沉淀缓冲液 仪器、耗材 转子 硝酸纤维滤膜......阅读全文

免疫筛选实验

根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验方法基本方案 实验材料 cDNA  试剂、试剂盒 BHI 氯霉素 NaOH SSC 氯仿 异戊醇 TES SDS mRNA 甲硫氨酸 乙醇 乙酸钠 免疫沉淀缓冲液  仪器、

免疫筛选实验

根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验材料cDNA试剂、试剂盒BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤1.

免疫筛选实验

基本方案             实验材料 cDNA 试剂、试剂盒

免疫筛选实验

实验材料 cDNA试剂、试剂盒 BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材 转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤 1.  往微量滴定板的每孔中加入250 μl 含适当抗生素的选择性BHI培养液,并分别接种独立的cDNA克隆,37℃温育过

融合蛋白的免疫筛选实验

基本方案 IPTG法             实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒

融合蛋白的免疫筛选实验

实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜实验步骤 1.  在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2.  选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.  

免疫筛选的的技术方法

中文名称免疫筛选英文名称immunoscreening定  义根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

筛选免疫“卫士”-抵抗鱼类病毒

肖武汉正在做实验。受访者供图  鱼类病毒性疾病,是水产养殖最重要的威胁。其发病率高、死亡率高,严重制约我国水产养殖业的持续健康发展。而对于鱼类病毒性疾病的防治,既缺乏有效药物,又缺乏可生产应用的疫苗。培育抗病毒鱼类新品种或将成为确保我国水产养殖持续健康发展的最有效手段之一。  近日,中国科学院水生生

筛选免疫“卫士”-抵抗鱼类病毒

肖武汉正在做实验。受访者供图  鱼类病毒性疾病,是水产养殖最重要的威胁。其发病率高、死亡率高,严重制约我国水产养殖业的持续健康发展。而对于鱼类病毒性疾病的防治,既缺乏有效药物,又缺乏可生产应用的疫苗。培育抗病毒鱼类新品种或将成为确保我国水产养殖持续健康发展的最有效手段之一。  近日,中国科学院水生生

关于小儿免疫缺陷疾病的体液免疫反应筛选检查

  (1)血清IgG、IgA和IgM测定:宜同时测定血清白蛋白,以除外低蛋白血症所引起者。  (2)血清IgG正常或偏低,而又高度疑有体液免疫缺陷者,可测定血清IgG亚类,低于本地区同龄儿正常值2SD者疑为低下。  (3)血清IgG及其亚类值正常,而又高度疑有抗体缺陷者,应测定特异性抗体及抗体反应。

单克隆酶免疫色度分析筛选方法

  单克隆酶免疫色度分析筛选方法   AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。   该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来

荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂

①吸附有抗体的微量孔板  为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2~8℃贮存,可稳定28天。②微量板托架  足以固定单个孔杯或测试条。③对照抗原  阳性对照:1瓶(煮沸后冻干的鼠伤寒沙门氏菌悬液)可与沙门氏菌抗体反应;阴性对照:1瓶(煮沸后冻干的奇异变形杆菌悬液)不与沙门氏菌抗体反

单克隆酶免疫色度分析筛选方法

  (1)原理   沙门氏菌抗原的检测是基于用特异性单克隆抗体进行的酶免疫分析(EIA)用抗沙门氏菌抗原的单克隆抗体包被于聚苯乙烯微量小孔的内表面,将样品和对照加入中。样品中如有沙门氏菌抗原存在,则将被吸附在孔上的特异性抗体吸收。冲洗小孔后,加入接合剂与被抗体吸收的沙门氏菌抗原结合。再冲洗小孔,

融合蛋白的免疫筛选实验——IPTG法

实验方法原理用抗体筛选λgt11 cDNA文库时,可待噬斑长到一定裎度方可诱导表达融合蛋白,筛选到阳性克隆的成功概率就可能大大增加。噬菌体生长3~4 h 后,将含诱导剂IPTG的滤膜放入噬斑平板,即可诱导β-半乳糖苷酶-cDNA融合蛋白的表达,继续在37℃培养,然后按基本方案用抗体对影印滤膜进行筛选

免疫学实验过敏原筛选介绍

过敏原筛选介绍:  过敏原筛选是敏筛过敏源检测系统采用免疫印迹方法或者吸入致敏物质而发生的过敏反应而进行过敏原筛选的等手段进行筛选过敏原的方法。过敏原筛选正常值:  抗原呈阴性反应过敏原筛选临床意义:  异常结果:皮肤过敏又称为“敏感性”皮肤。皮肤过敏主要是指当皮肤受到各种刺激如不良反应的化妆品、化

荧光酶免疫分析筛选方法所用样品制备过程

一、仪器①微量孔板的洗孔器或移液器  有12个管可以洗整个的板。②微量移液器  能够吸移5~200μL 液体。③水浴  能够于100℃恒温,亦可用调至100℃的高压灭菌器代替作为流动蒸汽发生器。④荧光计  用于 FS 检测。测量微量孔内容物的相对荧光量(MicroFLUOR Reader Dynat

融合蛋白的免疫筛选实验——基本方案

实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材硝酸纤维素滤膜实验步骤1.  在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2.  选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.  将直径1

荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂有哪些?

所用试剂均可购自 Dynatech Laboratories Inc。Q-Trol Salmonella MICRO- ELISAK 检验盒(ME)法和Q-Trol目测检验盒(VI和VR法)包括①~⑦,⑧a.和⑩。①吸附有抗体的微量孔板  为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2~

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法酶免疫测定

①试剂条上标注有所需编码(1是食品测试样品)。试剂盒提供每一系列测试所需的阳性对照(C1),阴性对照(C2)和抗原标准液(S1)。试剂条需恢复至室温。②混合均匀每一阳性对照、阴性对照和抗原标准液。③各吸取0.5mL 阳性对照、阴性对照、抗原标准液和按(5)④步骤煮沸的M肉汤加入到试剂条的测试孔中。④

单克隆酶免疫色度分析筛选方法需要哪些仪器?

①微量条板架  能放置1~8个微量条板的聚苯乙烯框架。②条板密封纸  覆盖微量板的粘合纸。③内嵌式包装物  (用于固定放置试剂)。④培养箱  能于35.0℃±0.1℃~37.0℃±0.1℃恒温。⑤水浴箱a.能于42.0℃±0.5℃和35.0℃±1.0℃恒温。b.能于100.0℃±0.1℃恒温。(注意

沙门氏菌多克隆酶免疫分析筛选方法

  本方法由酶免疫分析方法(EIA)测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的,在选择性培养基上做划线接种,并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。   对于阳性结果的确定   ①可借助比色计卡进行视觉检查,当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时,阳性结

谷物筛选器筛选原理

    谷物筛选是指根据粮食颗粒大小的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。因为筛选和重力分选的主要对象是谷物,其介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器就是一款专门检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,确定其品质等级的仪器。  

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法实验过程酶免疫检测

  ①FS法  a.接通荧光计和打印机电源,至少预热1h。  b.从铝箔袋中取出所需数量的微孔测试板每个食品样品一个孔,另加4个孔做对照用。将板稳固地卡入托架中。各移取100μL 阴性对照抗原于A-1,A-2和A-3的每个孔中。移取100μL 阳性对照抗原于A-4中。移取每100μL 加热的M肉汤样

沙门氏菌荧光酶免疫分析筛选方法所用试剂

  ①吸附有抗体的微量孔板 为8行带有沙门氏菌单克隆抗体的12个孔的试验板。打开后于2~8℃贮存,可稳定28天。  ②微量板托架 足以固定单个孔杯或测试条。  ③对照抗原 阳性对照:1瓶(煮沸后冻干的鼠伤寒沙门氏菌悬液)可与沙门氏菌抗体反应;阴性对照:1瓶(煮沸后冻干的奇异变形杆菌悬液)不与沙门氏菌

沙门氏菌单克隆酶免疫色度分析筛选方法

  单克隆酶免疫色度分析筛选方法  AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。  该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来进行测试

单克隆酶免疫色度筛选法分析沙门氏菌

单克隆酶免疫色度分析筛选方法AOAC 方法:986.35,987.11,993.0均为单克隆酶免疫色度分析筛选方法。现以 AOAC 公定方法 AOAC993.08《SalmonelIa-Tek)》为例做一介绍。该方法阳性的检测结果应是客观的,必须用配有450nm 滤光片的光度计来进行测试。只有当阴性

多克隆酶免疫分析筛选方法检测沙门氏菌

多克隆酶免疫分析筛选方法本方法由酶免疫分析方法(EIA)测得的阳性样品的增菌肉汤和 M 肉汤必须依照常规标准方法中所指示的,在选择性培养基上做划线接种,并必须将典型或可疑菌落按标准方法进行生化和血清学鉴定。对于阳性结果的确定①可借助比色计卡进行视觉检查,当判断阴性和阳性对照符合卡上所描述的标准时,阳

自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法介绍

  自动酶联荧光免疫检测系统(VIDAS)筛选法   VIDAS 和 mini-VIDAS 是一种全自动免疫分析仪,如下图所示,它集合计算机、键盘、打印机于一身,应用酶联免疫分析原理,应用夹心技术,最终检测蓝色荧光(4-甲基伞形基磷酸盐,ELFA),所测的荧光与抗原成正比。此方法已通过 AOAC

谷物筛选原理以及筛选仪器

筛选是指根据物料粒度的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。由于筛选和重力分选的主要对象是谷物,就其性质而言,介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,确定其品质等级的一种检验仪器,确定其害虫密

重组质粒的筛选(抗生素平板筛选和α互补筛选)

重组DNA转化受体细胞后,须在不同水平上进行筛选,以区别转化子与非转化子、重组子与非重组子以及鉴定所需的特异性重组子。在转化过程中,并非每个受体细胞都被转化;即使获得转化细胞,也并非都含有目的基因,所以需采用有效方法进行筛选。筛选的方法包括根据遗传表型筛选、限制性内切酶分析筛选、核酸探针筛选、PCR