免疫筛选的的技术方法

中文名称免疫筛选英文名称immunoscreening定 义根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

免疫筛选的的技术方法

中文名称免疫筛选英文名称immunoscreening定  义根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

免疫筛选实验

实验材料 cDNA试剂、试剂盒 BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材 转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤 1.  往微量滴定板的每孔中加入250 μl 含适当抗生素的选择性BHI培养液,并分别接种独立的cDNA克隆,37℃温育过

免疫筛选实验

根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验材料cDNA试剂、试剂盒BHI氯霉素NaOHSSC氯仿异戊醇TESSDSmRNA甲硫氨酸乙醇乙酸钠免疫沉淀缓冲液仪器、耗材转子硝酸纤维滤膜离心管微量多孔洗涤仪实验步骤1.

免疫筛选实验

根据抗原-抗体相互作用的原理从群体中选出目的物的技术。如用抗体检测表达型的基因文库所合成的蛋白质,从而筛选出目的基因的克隆。实验方法基本方案 实验材料 cDNA  试剂、试剂盒 BHI 氯霉素 NaOH SSC 氯仿 异戊醇 TES SDS mRNA 甲硫氨酸 乙醇 乙酸钠 免疫沉淀缓冲液  仪器、

免疫筛选实验

基本方案             实验材料 cDNA 试剂、试剂盒

融合蛋白的免疫筛选实验

实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材 硝酸纤维素滤膜实验步骤 1.  在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2.  选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.  

融合蛋白的免疫筛选实验

基本方案 IPTG法             实验材料 大肠杆菌 试剂、试剂盒

融合蛋白的免疫筛选实验——IPTG法

实验方法原理用抗体筛选λgt11 cDNA文库时,可待噬斑长到一定裎度方可诱导表达融合蛋白,筛选到阳性克隆的成功概率就可能大大增加。噬菌体生长3~4 h 后,将含诱导剂IPTG的滤膜放入噬斑平板,即可诱导β-半乳糖苷酶-cDNA融合蛋白的表达,继续在37℃培养,然后按基本方案用抗体对影印滤膜进行筛选

融合蛋白的免疫筛选实验——基本方案

实验材料大肠杆菌试剂、试剂盒LB顶层琼脂糖叠氮钠第一抗体仪器、耗材硝酸纤维素滤膜实验步骤1.  在150 ml LB 平板上滴定λgt11 cDNA文库的滴度,宿主菌为大肠杆菌LE392菌株,每个平板使用7 ml 1%LB顶层琼脂。2.  选择适当的滴度铺平板,于37℃温育8 h。 3.  将直径1

基因转移技术的技术方法介绍

基因转移是用物理的、化学的或生物学的方法将目的基因导入受体细胞并使之表达的一种技术。

萃取技术的方法介绍

萃取方法向待分离溶液(料液)中加入与之不相互溶解(至多是部分互溶)的萃取剂,形成共存的两个液相。利用原溶剂与萃取剂对各组分的溶解度(包括经化学反应后的溶解)的差别,使它们不等同地分配在两液相中,然后通过两液相的分离,实现组分间的分离。如碘的水溶液用四氯化碳萃取,几乎所有的碘都移到四氯化碳中,碘得以与

显微注射的技术方法

在高倍倒置显微镜下,利用显微操作器(Micromanipulator),控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置,用来进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。

细胞重组的技术方法

  转移  核体与胞质体在仙台病毒或聚乙二醇的作用下能合并成为完整细胞,称“重组细胞”。目前不仅能使大鼠核体与小鼠胞质体合并成为重组细胞,并能使人的核体与小鼠胞质体形成重组细胞。若将胞质与完整的细胞融合,构成含有一个亲本核和两个亲本胞质的杂种细胞,称“胞质杂种”。这样,就可把一个亲本细胞的胞质基因(

器官培养的技术方法

器官培养是将活体的一部分进行分离培养,是广义的组织培养形式之一。将部分或整体器官在不损伤正常组织结构的条件下进行的培养,即仍保持组织的三维结构,并模仿在各种状态下的器官功能。

叶培养的技术方法

中文名称叶培养英文名称leaf culture定  义从母体植株上将叶组织(包括叶原基在内)切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

ELISA方法的技术特性

用于标记抗体或抗抗体的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。如今应用较多的有辣根过氧化物酶(HRP)、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用最广。

分子克隆的技术方法

在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。

细胞杂交技术的方法

细胞杂交又称细胞融合,指将两个或多个不同的动物细胞融合成一个细胞的过程。融合形成的杂种细胞,兼有两个细胞的染色体。

免疫酶技术的方法

ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对照孔中加

液体培养的技术方法

液体培养,是指将微生物直接接种于液体培养基中,并不断振荡或搅拌,使微生物均匀地在液体培养基中生长繁殖的一种培养方法。液体培养适用于好氧微生物和植物组织培养,以迅速得到大量繁殖体为目的。培养时通过不断振荡或搅拌,可使无菌空气不断通入容器中,使微生物与氧气和培养基充分接触而迅速繁殖。液体培养主要有摇瓶培

固体培养的技术方法

中文名称固体培养英文名称solid culture定  义在液体培养液中加入0.5%~1%的琼脂使液体培养液半固化,再接种培养物的一种培养技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

试管育种的技术方法

中文名称试管育种英文名称test-tube breeding定  义植株在体外培养的条件下,通过人工诱变进行新品种选育的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

免疫荧光技术的技术方法介绍

用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合,用于检测或定位各种抗原,也可以与其他蛋白质结合,用于检测或定位抗体,但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用,所以人们习惯称为荧光抗

放射自显影的技术方法的研究方法

放射自显影已有100多年的历史,但就应用广度和解决问题的深度来说,近20年来发展尤为迅速。放射自显影可以分为整体水平、组织水平、细胞水平和分子水平4个不同层次。放射自显影突出的优点是:结果直观,记录逼真,避免在解释时带有个人的偏见;放射自显影可把形态、机能和代谢统一起来,以研究生物体内的动态变化过程

概述转基因技术的方法

  遗传转化的方法按其是否需要通过组织培养、再生植株通常可分成两大类,第一类需要通过组织培养再生植株,常用的方法有农杆菌介导转化法、基因枪法;另一类方法不需要通过组织培养,比较成熟的主要有花粉管通道法,花粉管通道法是中国科学家提出的。

PCR技术的原理与方法

 PCR定义PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶链式反应,是指在DNA聚合酶催化下,以母链DNA为模板,以特定引物为延伸起点,通过变性、退火、延伸等步骤,体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。是一项DNA体外合成放大技术,能快速特异地在体外扩增任何目的DN

花器官培养的技术方法

中文名称花器官培养英文名称flower culture定  义将植物的花序、花及其组成部分从母体植株上切下,放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)

分子对接技术的主要方法

各种分子对接方法对体系均有一定的简化,根据简化的程度和方式,可以将分子对接方法分为三类。刚性对接:刚性对接方法在计算过程中,参与对接的分子构像不发生变化,仅改变分子的空间位置与姿态,刚性对接方法的简化程度最高,计算量相对较小,适合于处理大分子之间的对接。半柔性对接:半柔性对接方法允许对接过程中小分子

酶免疫技术使用的方法

  ACA(抗心磷脂抗体)主要通过抑制血管内皮细胞合成PGI2,干扰血栓调节素、纤溶酶原激活剂和蛋白质C系统的活性,抑制抗凝血酶III的活化等而致凝血前高凝状态,与复发性动静脉血栓形成、反复自然流产及血小板减少症关系密切。  其主要程序为用纯心磷脂的无水乙醇溶液包被聚苯乙烯板,封闭后分别于标本孔和对

固相萃取技术的方法

固相萃取技术的方法1.选择SPE 小柱或滤膜 首先应根据待测物的理化性质和样品基质, 选择对待测物有较强保留能力的固定相。若待测物带负电荷, 可用阴离子交换填料, 反之则用阳离子交换填料。若为中性待测物, 可用反相填料萃取。SPE 小柱或滤膜的大小与规格应视样品中待测物的浓度大小而定。对于浓度较低的