二次鉴别性消化法检测磷酸肽中特定氨基酸实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 洗脱的磷酸肽 试剂、试剂盒 消化酶 消化缓冲液 2-巯基乙醇 合适 pH 的电泳缓冲 仪器、耗材 适合于酶消化的温度的水浴 TLC 平板（20 cm × 20 cm 100 维素） 实验步骤 ......阅读全文
兴奋性氨基酸的检测方法
方法：130只雄性Wistar大鼠随机分为烧伤即时复苏组(n=60)、烧伤延迟复苏组(n=50)和正常对照组(高原地区正常对照组n=10和兰州地区正常对照组n=10).前两组动物被制成高原（海拔3800m）烧伤实验动物模型（TBSA30%，Ⅲ度）.运用高效毛细管电泳法检测脑组织中兴奋性氨基酸（谷氨酸
特定蛋白检测方法及原理
随着越来越多的特定蛋白被应用于临床，其检测方法也发展迅速。在1959年之前，一直采用经典免疫沉淀方法进行检测，这存在测定范围窄、灵敏度低、繁琐费时及不能自动化等缺点。1959年，Schultze等报道了透射比浊法（TransmissionTurbidimetry）。这种方法是常用于生化指标的测定，用
抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系BSA 交联的同种磷酸肽BSA 交联的同种非磷酸肽BSA 交联的非同种磷酸酪氨酸肽BSA 交联的同源磷酸肽试剂、试剂盒 筛选稀释液阴性对照（用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫前血清）阳性对照（用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫后血清）仪器、耗材 HT 培养基96
抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验
基本方案 实验方法原理 实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系 BSA 交联
磷酸化位点分析实验_磷酸肽的化学测序
实验方法原理磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 lMAC
磷酸化位点分析实验_磷酸肽的化学测序
实验方法原理磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 lMAC
磷酸化位点分析实验磷酸化位点的确定
实验方法原理 磷酸化位点的确定也使用一些通用方法；磷酸化蛋白质被纯化，如果可能蛋白质要均一；磷蛋白被特异性的化学或酶反应切断、产生肽混合物，其中含有一到两个磷酸肽不同之处在干其分离磷酸肽的策略是为了确定氨基酸序列，定位肽段内磷酸化的残基。上面所述的分离方法， 2D-PP 作图、 HPLC 或 l
磷酸交联AFFIGEL－10－亲和介质实验
实验方法原理 本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步骤最终能产生 3 ml 柱床体积的亲和树脂；每毫升Affi-Gel 10上能交联 3 μl 肽。实验材料 寡聚肽
ESIMS实验
实验方法原理在 ESI源中，含有被分析样品（多肽／蛋白质）的溶液流经一个细细的进样针，针头上加高电压(+ 1000-5000V) 用来产生正离子，见图 5.2a。高电压导致样品液流分散为呈喷雾状的带高电荷的微小液滴，质谱仪入口端的有孔平板上加有+ 100--1000V的低电压，引导离子通过入
ESIMS实验
ESI 三级四极质谱仪操作 ESI-离子阱质谱仪操作 实验方法原理 在 ESI源中，含有被分析样品（多肽／蛋白质）的溶液流经一个细细的进样针，针头上
ESIMS实验——ESI－三级四极质谱仪操作
实验方法原理在 ESI源中，含有被分析样品（多肽／蛋白质）的溶液流经一个细细的进样针，针头上加高电压(+ 1000-5000V) 用来产生正离子，见图 5.2a。高电压导致样品液流分散为呈喷雾状的带高电荷的微小液滴，质谱仪入口端的有孔平板上加有+ 100--1000V的低电压，引导离子通过入口 （o
消化系统药理实验中的选择与应用（二）
慢性胃溃疡的实验模型常选用大白鼠。可用热烙法或醋酸浸溃造成胃壁损伤形成溃疡。热烙法是在无菌剖腹后，以3mm粗的15W电烙铁加热至45℃左右，灼烙腺胃约5秒种后粘膜出现水肿，6小时后有明显出血。醋酸浸溃法可用10%或20%醋酸溶液0.05ml，用0.01ml刻度的结核菌素注射器利用26号皮内针头作
消化系统药理实验中的选择与应用（一）
消化系统药理实验中的选择与应用 （一）消化系统分泌实验 1．胃液分泌实验 胃液收集常选用狗和大白鼠。由狗右侧嘴角插入胃管收集胃液，大白鼠则需剖腹，从幽门端向胃内插入一直径约3mm的塑料管，在紧靠幽门处结扎固定，以收集胃液，可进行胃酸的测定和胃蛋白酶的测定。 2．胰液分泌实验 胰液收集可选用
尿镜检法在尿液检测中的重要性
随着现代医学日新月异的发展，检验的自动化进程也随之得到了发展，就而言，由于它的检测法既简便、快捷、检测项目多，又重复性好、标本用量少，故已成为临床上尿液检测的重要组成部分，但是它决不可代替传统的对尿液有形成分（细胞、管型、结晶、肿瘤细胞等）的检测，且由于尿液分析仪检测与显微镜下的检测原理
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
2D-PP 分离磷酸肽 RP-HPLC 分离磷酸肽 高分辨凝胶电泳分离磷酸肽 IMAC 分离／富集磷酸肽 实验方法原理
抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验
实验材料融合后的候选杂交瘤细胞系BSA 交联的同种磷酸肽BSA 交联的同种非磷酸肽BSA 交联的非同种磷酸酪氨酸肽BSA 交联的同源磷酸肽试剂、试剂盒筛选稀释液阴性对照（用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫前血清）阳性对照（用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫后血清）仪器、耗材HT 培养基96 孔聚苯乙烯组织培养板
消化炉微波消化法的优势及注意事项
一般而言消化炉的应用十分常见，在物质消化过程中的优势也是十分常见的。目前,微波消化技术已广泛应用于地质、冶金、煤炭、石油、坏保等领域的分析工作中。针对生物样品的特点,改革了常用的微波消化方法,取得满意结果。 准确取一定量样品于合适的消化罐的聚四氟乙烯内胆中,加入一定量的消化试剂后晃动几次,使样品与试
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将
抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验
实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS／叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的
食品样品预处理中样品溶液的制备方法湿消化法
在加热条件下,利用氧化性的强酸或氧化剂来分解样品。常用的消化剂有硝酸、硫酸、高氯酸、过氧化氢和高锰酸钾等;常见的催化剂包括硫酸铜、硫酸汞、二氧化硒、五氧化二钒等。该方法的优点:①由于使用强氧化剂,有机物分解速率快,消化所需时间短;②由于加热温度较干法灰化低,故可减少金属挥发逸散的损失,同时,容器的吸
磷酸化位点分析实验磷酸肽的分离
实验方法原理 即使纳喷 MS/MS 技术已经成功用于直接分析蛋白酶解产生的磷酸肽但是出于以下一些原因，通常建议在质谱分析前作一些分离：(1) 磷酸肽在蛋白酶切产物中通常只占少数因此容易淹没在低率度离子产生的总背景中，肽分离技术可浓缩分析物，因此会提高信噪比。(2) 如果磷酸肽被放射性标记并具有相同比
基因“剪刀”可加速特定基因遗传－在哺乳动物中完成实验
近日，研究人员首次使用被称为基因“剪刀”的基因组技术CRISPR加快哺乳动物特定基因的遗传。这种极具争议的基因驱动策略几年前在实验室饲养的昆虫中得到证明。因为它能在整个物种中迅速传播一种基因，从而激发了人们利用致命基因消灭疟蚊等害虫的梦想。现在，被消灭的对象或许还有具有破坏作物或能致病的哺乳动物
氨基酸分析仪检测氨基酸水溶肥中游离氨基酸可行性分析
0.前言 我国是一个缺水的农业大国，化肥的使用在农业生产中占重要地位，而传统肥料存在利用率低、养分损失率高而且耗水量大的缺点，水溶肥料由于其迅速溶于水中、养分更易被吸收而且吸收利用率高并可应用于滴灌、喷施、喷灌的节水特点，在我国农业中有广阔的发展前景[1]。氨基酸水溶肥作为水溶肥中的一员，其
脐带和脐血来源干细胞的培养实验_酶消化法
实验材料脐带试剂、试剂盒Wharton胶PBSA胶原酶仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)脐带取材后，可在PBSA中保存1〜24h。(b)除去血管，将Wharton胶剪成大约0.5cm的小组织块。(c)将剪碎的组织块转移到50mL离心管，用无血清DMEM洗，室温250g离心5min。(d)倒掉上清液，将离
氨基酸鉴别方法
方法太多了，等电点法。紫外分光分析。还有色谱分析。等电点法和色谱分析都是提供一个分离的环境，需要已知氨基酸作对照。关于紫外吸收，使用得并不广泛，特地查书，看到以下描述:有机化合物在紫外区中有些没有吸收谱带，有的仅有较简单而宽阔的吸收光带；另一方面，如果物质组成的变化不影响生色团及助色团，就不会显著得
在纸色谱法鉴定氨基酸实验中,显色时用的湿色剂是什么
茚三酮。无色物质的纸色谱图谱可用光谱法即紫外光照射或显色法鉴定，氨基酸纸色谱图谱常用茆三酮显色法鉴定。用于极性较大的亲水性化合物或极性差别较小的化合物。氨基酸是生物学上重要的有机化合物，由氨基和羧基的官能团，以及连到每一个氨基酸的侧链组成。氨基酸是构成蛋白质的基本单位，赋予蛋白质特定的分子结构形态，
特定蛋白检测的起源与发展
蛋白质是一切生命活动的基础。蛋白质的发现是人类生命科学的伟大里程碑。在18世纪，安东尼奥•弗朗索瓦（Antoine Fourcroy）和其他研究者发现了一类独特的生物分子，他们发现用酸处理这些分子能够使其凝结或絮凝。当时他们注意到的例子有来自蛋清、血液、血清白蛋白、纤维素和小麦面筋。1838年，由瑞
锚定酶消化cDNA实验
试剂、试剂盒溶液与缓冲液引物仪器、耗材试剂盒MPC-EPCR仪Gene PulserII 型系统实验步骤实验方案 A1.通过加入下列物质来消化双链 cDNA2.在 37°C 下消化 lh。3.65°C 孵育 20 min 热失活限制性酶。4.等体积 PCI 抽提后乙醇沉淀（实验方案 A, 第 2 步
锚定酶消化cDNA实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液引物仪器、耗材 试剂盒MPC-EPCR仪Gene PulserII 型系统实验步骤 实验方案 A1.通过加入下列物质来消化双链 cDNA2.在 37°C 下消化 lh。3.65°C 孵育 20 min 热失活限制性酶。4.等体积 PCI 抽提后乙醇沉淀（实验方案 A, 第
锚定酶消化cDNA实验
试剂、试剂盒 溶液与缓冲液 引物 仪器、耗材 试剂盒 MPC-E PCR仪