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抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验

实验方法原理 实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系BSA 交联的同种磷酸肽BSA 交联的同种非磷酸肽BSA 交联的非同种磷酸酪氨酸肽BSA 交联的同源磷酸肽试剂、试剂盒 筛选稀释液阴性对照(用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫前血清)阳性对照(用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫后血清)仪器、耗材 HT 培养基96 孔聚苯乙烯组织培养板网格标记的纸片实验步骤 1. 将融合后的杂交瘤细胞以低密度(最好是每三个孔有一个细胞)接种到多个 96 孔聚苯乙烯组织培养板中,培养于 HT 培养基中。约 2 周后用 96 格-网格纸片记录克隆数以检查并鉴定出所有的单克隆杂交瘤细胞培养孔。在含有一个克隆的孔下做上标记以便于鉴别。2. 采用无菌技术从每个潜在的候选孔中吸取部分上清(如从 200 μl 培养液中吸取 100 μl 转移到另一 96 孔聚苯乙烯板(「筛选平板」)中。记录初始培养板的编号和孔的位置以及相应的筛选平板的平板编号和孔的位置(如在代表筛选......阅读全文

抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验

基本方案             实验方法原理 实验材料 融合

抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验

实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系BSA 交联的同种磷酸肽BSA 交联的同种非磷酸肽BSA 交联的非同种磷酸酪氨酸肽BSA 交联的同源磷酸肽 试剂、试剂盒 筛选稀释液阴性对照(用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫前血清)阳性对照(用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫后血清) 仪器、耗

抗磷酸肽的单克隆抗体制备实验

实验方法原理 实验材料 融合后的候选杂交瘤细胞系BSA 交联的同种磷酸肽BSA 交联的同种非磷酸肽BSA 交联的非同种磷酸酪氨酸肽BSA 交联的同源磷酸肽 试剂、试剂盒 筛选稀释液阴性对照(用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫前血清)阳性对照(用于制备杂交瘤系的小鼠的免疫后血清) 仪器、耗材

抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验

实验方法原理 实验材料 用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒 PBS/叠氮化物MgCl2仪器、耗材 分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的

抗磷酸肽的多克隆抗体制备实验

实验材料用磷酸肽-BSA 交联物免疫过的兔的粗制血清试剂、试剂盒PBS/叠氮化物MgCl2仪器、耗材分光光度计透析袋填装有 BSA-琼脂糖亲和介质的柱子填装有磷酸酪氨酸亲和介质的柱子填装有同种非磷酸肽亲和介质的柱子填装有同源的磷酸肽亲和介质的柱子填装有阳性-筛选的磷酸肽亲和介质的柱子实验步骤1. 将

抗海藻糖酶单克隆抗体的制备

通过腹腔注射加佐剂的重组蛋白或合成的多肽来免疫8周龄的雌性小鼠BALB/c,第一次免疫问隔两周后,每周连续注射3-4次。最后一次注射后3-4天杀死小鼠,用改良的Kohler和Milstein方法将脾细胞与B细胞瘤株P3-X63-Ag8融合。细胞融合产生8种杂交瘤克隆株:KM2275、KM2276、K

单克隆抗体的制备实验

单克隆抗体的制备实验可以用于:(1)将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞杂交, 获得既能产生抗体, 又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体;(2)该技术是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。实验方法原理单克隆抗体技术(monoclo

单克隆抗体上清制备实验——大量制备

实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1,并按 1:10 分传到终体积为 1

单克隆抗体上清的制备实验

实验材料 杂交瘤试剂、试剂盒 完全培养基仪器、耗材 培养箱转子离心机实验步骤 1.  将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm2组织培养瓶中,置37 ℃CO2培养箱中,直至生长旺盛适于分传。2.  按1:10的比例将细胞分传到一个新的175 cm2的培养瓶中,加入完全DMEM-10

单克隆抗体的腹水制备实验

实验材料 杂交瘤细胞试剂、试剂盒 完全DMEM-10HEPES丙酮酸钠PBS仪器、耗材 注射针头离心管转子离心机实验步骤 1.  用20G或22G的注射针,小鼠腹膜内注射降植烷,每只鼠0.5 ~ 1 ml,1周后接种细胞。 2.  在175 cm2培养瓶中加完全DMEM-10/HEPES/丙酮酸钠培