蛋白质与核酸的紫外交联实验

用溴脱氧尿苷(BrdU)取代的探针进行紫外交联 实验方法原理 含有胸苷卤代物如溴脱氧尿苷(BrdU)的DNA比非取代的DNA对紫外线诱导的 交联更为敏感。本方案中的紫外交联效率是0.1%〜10%,而且在单一复合物中出现1 次以上交联事件的情况十分罕见。 实验材料 含有所研究结合位点的M13单链载体 试剂、试剂盒 17 bp 的 M13 通用引物 1×和10×限制性内切核酸酶缓冲液 (分别含500μmol L和50......阅读全文

核酸纯化怎样保存核酸

纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽

清华:蛋白质与核酸的相分离调控生殖寿命权衡的机理

  衰老是如何进化出来的?George C. Williams 于 1957 年提出拮抗多效理论 (antagonistic pleiotropic)作为衰老的进化解释。多效性是一种一个基因控制多个性状的现象。拮抗多效性是指一个基因调控的某些性状有利于生命早期的适应性,而另一些性状则对生命晚期的适应

脱氧核糖核酸DNA结合DNA的蛋白质的介绍

  结构蛋白可与DNA结合,是非专一性DNA-蛋白质交互作用的常见例子。染色体中的结构蛋白与DNA组合成复合物,使DNA组织成紧密结实的染色质构造。对真核生物来说,染色质是由脱DNA与一种称为组织蛋白的小型碱性蛋白质所组合而成;而原核生物体内的此种结构,则掺杂了多种类型的蛋白质。  DNA可在组织蛋

离子交换色谱仪离子交换介质

离子交换色谱仪离子交换介质由基质、活性基团和可交换离子组成,按基质的组成和性质可分为疏水性离子交换剂(树脂)和亲水性离子交换剂。一、疏水性离子交换剂(树脂):疏水性离子交换剂是一种与水亲和力较小的合成树脂。最常见的是由苯乙烯与交联剂二乙烯苯反应生成聚合物,在此结构中再以共价键引入不同的电荷基团制成的

聚丙烯酰胺凝胶电泳仪分析技术

        聚丙烯酰胺凝胶电泳仪(PAGE)是以聚丙烯酰胺凝胶作为载体的电泳技术,于1959年建立,1964年进一步从理论和实验技术上得到改进并推广应用。由于分辨率高,目前已广泛用于蛋白质等生物大分子的分析。一、PAGE工作原理:        聚丙烯酰胺凝胶具有高粘度和高摩擦阻力,电泳过程中能

关于交联葡聚糖的基本内容介绍

  交联葡聚糖是以右旋糖酐与1-氯-2,3-环氧丙烷(表氯醇)交联制备而成的具有网状结构、水不溶性珠状微粒,用于凝胶过滤。  可根据分离物分子量范围选用适当交联度的凝胶,交联度(G)越大,网络孔径越小,在水或盐溶液中溶胀时吸水量越小,适用分离物的分子量范围越窄。按交联度从大到小,依次有G-10、G-

“微交联法”创制高弹性铁电材料

  8月4日,中国科学院宁波材料技术与工程研究所柔性磁电功能材料与器件团队在《科学》(Science)上,发表了题为Intrinsically elastic polymer ferroelectric by precise slight crosslinking的研究文章。该研究提出了铁电材料的本

交联聚乙烯用途电缆料的介绍

  以交联聚乙烯作为绝缘的电缆的耐热性比聚氯乙烯高,它可以在90℃下长期使用,短路时的耐热温度最高可以达到250℃;绝缘电阻高,介质损耗角正切小,基本上不随温度的变化而变化;有良好的耐磨性和耐环境应力开裂。交联聚乙烯一旦发生电缆燃烧产生的是二氧化碳和水,而PVC电缆燃烧时产生的是氯化氢有害气体;此外

AMBERLITE-XAD2高交联非极性树脂

  AMBERLITE XAD-2高交联非极性树脂;高交联树脂是一种吸附树脂,又称为聚合物吸附剂,是一大类不含离子交换基团,具有大且多孔的网状结构、内部结构复杂、高交联度的高分子聚合物。上世纪70年代初利用后交联聚合法合成了一种新型的超高交联树脂。作为一种吸附剂,它具有较大的比表面积,适宜的孔结构和

关于紫外交联仪的参数和应用

现在紫外交联仪分为3种波长的:254nm;312(302)nm;365nm;一长寿命滤光片,312 nm和365 nm下可终身使用,254 nm下,寿命为3000小时。对于312nm波长的紫外交联仪,312nm紫外光是目前EB/DNA复合凝胶电泳荧光显色的最佳光源,因为它灵敏度高且能产生了最

磷酸交联AFFIGEL-10-亲和介质实验

实验方法原理 本方案描述了将磷酸肽链或非磷酸肽链交联到 Affi-Gel 10 亲和介质上以利用亲和柱层析法纯化抗体的方法。这里所详述的无水交联法是最有效的肽链交联方法。按此法的步骤最终能产生 3 ml 柱床体积的亲和树脂;每毫升Affi-Gel 10上能交联 3 μl 肽。实验材料 寡聚肽

如何使用QCMD检测交联和塌陷

  生物相容性、抗菌性能和药物输送能力是某些材料和产品的关键性能指标。通过对高分子刷、聚电解质多层膜或水凝胶等进行巧妙的材料设计,也能实现的这些性能指标。在对这些材料的界面特性进行调节时的一个重要参数是分子层构象如交联和水合度。   表面上的高分子构象对界面性质的影响   具有不同构象的高分子和

酶固定化技术固定化方法交联法

交联法是用多功能试剂进行酶蛋白之间的交联,使酶分子和多功能试剂之间形成共价键,得到三向的交联网架结构,除了酶分子之间发生交联外,还存在着一定的分子内交联。多功能试剂制备固定化酶方法可分为:( 1) 单独与酶作用;( 2) 酶吸附在载体表面上再经受交联;( 3) 多功能团试剂与载体反应得到有功能团的载

如何使用QCMD检测交联和塌陷

  生物相容性、抗菌性能和药物输送能力是某些材料和产品的关键性能指标。通过对高分子刷、聚电解质多层膜或水凝胶等进行巧妙的材料设计,也能实现的这些性能指标。在对这些材料的界面特性进行调节时的一个重要参数是分子层构象如交联和水合度。   表面上的高分子构象对界面性质的影响   具有不同构象的高分子和

紫外交联仪能量设置和时间设置

紫外交联仪能量设置和时间设置:1.开电源;2.可预设能量和时间,方法为:按PRESET→ENERGY,输入所需的能量级,更大为9999,再按ENTER即完成能量设定;按PRESET→TIME,输入所需的时间,更大为999.9分钟,再按ENTER即完成时间设定。然后按START键开始工作。预设定的程序

紫外交联仪的特点是什么?

紫外交联仪的特点是什么?使核苷酸固定在杂交膜上,传统的方法是将膜置于80℃真空烘箱中烘2小时在本紫外交联仪上仅需在254nm紫外光下照射几秒钟即可。·紫外照射可使杂交信号比传统烘烤法提高5-10倍。·由于紫外交联仪配置了一种紫外能量程序设计系统(Joules/c㎡),紫外光的照射。当能量吸收值达到设

胶原蛋白的物理方法交联改性方法介绍

通过物理手段对胶原蛋白改性有紫外线照射、重度脱水、λ射线照射和热交联等方法。胶原溶液如被紫外线等照射,将在分子间产生交联,粘度增加,生成凝胶。常用的紫外线交联胶原膜的方法是将胶原膜放在铝箔上,距离254nm紫外灯20cm高度,照射1~5h。对紫外线照射的胶原膜进行力学性能和胶原酶试验表明:交联胶原膜

如何使用QCMD检测交联和塌陷?

生物相容性、抗菌性能和药物输送能力是某些材料和产品的关键性能指标。通过对高分子刷、聚电解质多层膜或水凝胶等进行巧妙的材料设计,也能实现的这些性能指标。在对这些材料的界面特性进行调节时的一个重要参数是分子层构象如交联和水合度。表面上的高分子构象对界面性质的影响具有不同构象的高分子和聚电解质如高分子刷、

胶原蛋白的化学方法交联改性方法介绍

化学方法比物理方法改性交联度高,且能获得均匀一致的交联,对调节、控制胶原的各性质均有效。已广泛应用于各种化学试剂交联胶原,以提高其交联度、力学性能及生物相容性。化学改性法具体又可分为使用化学试剂交联、侧链的修饰、生理活性物的固定化三种方法。 化学试剂交联法中常用的化学交联剂有戊二醛、己异二氰酸酯、碳

食品检测实验室常用的176种仪器及作用(五)

81.抑菌圈测量仪:食品中抗菌成分的测定;82.核酸蛋白分析仪:食品中核酸和蛋白质的定量分析;83.二维电泳系统:食品中过敏原如蛋白质的差异分析;84.通用电泳仪:食品中核酸和蛋白质的分离检测;85.水平电泳槽:食品中核酸的分离检测;86.垂直电泳槽:食品中蛋白质的分离检测;87.核酸高压测序胶系统

荧光探针及交联技术的著名企业介绍

荧光探针及交联技术 Molecular Probes: 美国一家在荧光技术领域独树一帜的生物技术公司,一直致力于开发用于生物医学研究的荧光标记试剂。它们拥有2500多种独家产品,包括离子指示剂,高灵敏度的核酸及蛋白染料、反应染料、荧光蛋白、右旋糖苷结合物、Caged探针、荧光聚苯乙烯微球体、显微及流

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验

实验材料pMQ402试剂、试剂盒阿拉伯糖苯甲基磺酰氟Ni-NTA 琼脂糖结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液透析缓冲液仪器、耗材超声破碎器冷冻离心机实验步骤3. 方法此处列出的方法概括了为定点突变而做的氨基酸位点选择(见 3.1)、为在细菌细胞中表达而做的 MutH 蛋白突变 ( 见 3.2 ) 和 Mu

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程             实验材料 pMQ402 试剂、试剂盒

Eppendorf-蛋白质核酸自动分析仪操作说明与注意事项

操作说明: 准备:开始测定前只需开启仪器背后的电源开关即可开始测定,无需预热。   一、核酸浓度测定(包括dsDNA、ssDNA、RNA、Oligo)   1. 例如待测定样品为dsDNA(eg:PCR产物),按下键“7 / dsDNA”   (若待测样品为ssDNA,eg:反转录合成的第一链cDN

位点特异性核酸内切酶的蛋白质工程实验

实验材料 pMQ402试剂、试剂盒 阿拉伯糖苯甲基磺酰氟Ni-NTA 琼脂糖结合缓冲液清洗缓冲液洗脱缓冲液透析缓冲液仪器、耗材 超声破碎器冷冻离心机实验步骤 3. 方法此处列出的方法概括了为定点突变而做的氨基酸位点选择(见 3.1)、为在细菌细胞中表达而做的 MutH 蛋白突变 ( 见 3.2 )

自由基与人体衰老的关系

衰老过程涉及到许多内外因素,与衰老过程有关的最常见的内源性生化因子是自由基。国内外大量研究已证实:老年动物及老年人血清脂质自由基(脂质过氧化物) 水平增高,组织内(尤其脑,肝细胞内) 脂褐素含量增多。组织内脂褐素含量多少可做为衰老的客观依据之一,其形成与脂质自由基有关。脂质自由基的分解产物为醛类,它

简述自由基对衰老的影响

  衰老过程涉及到许多内外因素,与衰老过程有关的最常见的内源性生化因子是自由基。国内外大量研究已证实:老年动物及老年人血清脂质自由基(脂质过氧化物) 水平增高,组织内(尤其脑,肝细胞内) 脂褐素含量增多。组织内脂褐素含量多少可做为衰老的客观依据之一,其形成与脂质自由基有关。脂质自由基的分解产物为醛类

DEAE葡聚糖凝胶的概念和用途

中文名称DEAE-葡聚糖凝胶英文名称diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定  义亲水性交联葡聚糖离子交换剂。是以交联葡聚糖G25或G50为基质,通过化学方法引入电荷基团二乙氨乙基,制成外形呈珠状的弱碱型阴离子交换剂,此类交换剂对核酸和蛋白质有较

DEAE葡聚糖凝胶的主要用途

中文名称DEAE-葡聚糖凝胶英文名称diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定  义亲水性交联葡聚糖离子交换剂。是以交联葡聚糖G25或G50为基质,通过化学方法引入电荷基团二乙氨乙基,制成外形呈珠状的弱碱型阴离子交换剂,此类交换剂对核酸和蛋白质有较

DEAE葡聚糖凝胶的概念

中文名称DEAE-葡聚糖凝胶英文名称diethylaminoethyl dextran gel;DEAE-dextran gel定  义亲水性交联葡聚糖离子交换剂。是以交联葡聚糖G25或G50为基质,通过化学方法引入电荷基团二乙氨乙基,制成外形呈珠状的弱碱型阴离子交换剂,此类交换剂对核酸和蛋白质有较