蛋白质与核酸的紫外交联实验

用溴脱氧尿苷(BrdU)取代的探针进行紫外交联 实验方法原理 含有胸苷卤代物如溴脱氧尿苷(BrdU)的DNA比非取代的DNA对紫外线诱导的 交联更为敏感。本方案中的紫外交联效率是0.1%〜10%,而且在单一复合物中出现1 次以上交联事件的情况十分罕见。 实验材料 含有所研究结合位点的M13单链载体 试剂、试剂盒 17 bp 的 M13 通用引物 1×和10×限制性内切核酸酶缓冲液 (分别含500μmol L和50......阅读全文

关于交联聚乙烯的简介

  聚乙烯(PE)是五大通用塑料之一,其产量和消费量位居各种合成树脂之首,在工业、农业和日常生活中得到广泛的应用。但是聚乙烯的耐高温性能较差。力学性能及耐化学性能有时也不能满足实际使用的要求。因此对聚乙烯进行改性一直是聚乙烯产品开发应用的关键,聚乙烯交联技术就是提高其材料性能的一种重要技术。经过交联

紫外交联的基本定义

DNA结合蛋白与DNA结合位点的结合后经紫外照射后可形成共价键。如果DNA预先经过标记,则共价结合的复合物经电泳分离和制作放射自显影图谱,能够快速准确的检测DNA结合蛋白及其分子量。

亚甲基蓝介导的光交联反应检测蛋白质与双链RNA相互作用

            实验方法原理 亚甲基蓝介导的光交联反应是对紫外交联反应的一个补充。亚甲基蓝属于酚噻嗪类染料。由于其环结构,亚甲基蓝可以在较低的浓度同核酸结合,插入碱基。浓度较高时,亚甲基蓝带阳离子,可以与磷酸二酯骨架通过静电力结合。

亚甲基蓝介导光交联反应检测蛋白质与双链RNA的相互作用

亚甲基蓝介导的光交联反应是对紫外交联反应的一个补充。亚甲基蓝属于酚噻嗪类染料。由于其环结构,亚甲基蓝可以在较低的浓度同核酸结合,插入碱基。浓度较高时,亚甲基蓝带阳离子,可以与磷酸二酯骨架通过静电力结合。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理亚甲基蓝介导的光交联反应是对紫外交联反

一种基于化学交联质谱分析蛋白质动态学研究新方法

  解析蛋白质的动态结构,能够揭示蛋白质行使功能的内在机制。化学交联质谱分析(Chemical cross-linking coupled with mass spectrometry,CXMS),结合高灵敏质谱分析,是近十年发展起来的结构生物学技术。利用有特定长度的化学交联剂将蛋白质中的特定氨基酸

紫外交联仪工作时采用的原理是什么?

 紫外交联仪是一种多用途的254nm紫外辐射系统,主要用于将核酸交联固定在膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UV灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用价值。  紫外交联仪的工作原理是用紫外线照射蛋白质核酸复合物,在

基于糖苷键质谱可碎裂交联剂的蛋白质复合物原位解析

近日,中国科学院大连化学物理研究所生物技术研究部生物分子高效分离与表征研究组研究员张丽华团队,研制了一种基于糖苷键的质谱可碎裂型交联剂,显著地提高了交联信息的检索通量和鉴定准确度,同时具有良好的两亲性和生物兼容性,实现了活细胞内蛋白质复合物原位交联和规模化精准解析。作为生命活动的执行者,蛋白质通过相

大连化物所等发展出利用原位化学交联解码细胞中蛋白质动态结构的策略

  近日,中国科学院大连化学物理研究所生物技术研究部生物分子高效分离与表征研究组研究员赵群、张丽华等,与中国科学院精密测量科学技术创新研究院副研究员龚洲合作,提出了利用原位化学交联-质谱技术(in vivo XL-MS),解码细胞中蛋白质动态结构的策略。该策略将AlphaFold2的结构作为先验信息

核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些

核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些蛋白质结构分析方法:X射线晶体衍射分析和核磁共振x 射线衍射法的分辨率可达到原子的水平,使它可以测定亚基的空间结构、各亚基间的相对拓扑布局,还可清楚的描述配体存在与否对蛋白质的影响。多维核磁共振波谱技术已成为确定蛋白质和核酸等生物分子溶液三维结构的唯一有效手段。

锌指核酸酶能以蛋白质形态穿透细胞膜

  用于目标基因组修饰的锌指核酸酶(ZFN)能够以蛋白质的形态穿透细胞膜,这是近期《自然—方法学》上一项研究得出的结论。这将让ZFN被投递至细胞内的过程变得更简单、更具安全性。   经过设计的核酸酶比如ZFN,能够让多个种类的基因组产生特定变化,其对研究和基因疗法的辅助作用让人眼前一亮。核酸酶一般

核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些

核酸和蛋白质序列分析的内容和方法有哪些蛋白质结构分析方法:X射线晶体衍射分析和核磁共振x 射线衍射法的分辨率可达到原子的水平,使它可以测定亚基的空间结构、各亚基间的相对拓扑布局,还可清楚的描述配体存在与否对蛋白质的影响。多维核磁共振波谱技术已成为确定蛋白质和核酸等生物分子溶液三维结构的唯一有效手段。

概述脱氧核糖核酸DNA与蛋白质作用

  所有DNA功能都取决于其与特定蛋白质的相互作用。这些相互作用可以是非特异性的,也可以是极其特异性的。还有许多可以结合DNA的酶,其中,在DNA转录和复制中复制DNA序列的聚合酶特别重要。  DNA与组织蛋白(图1中白色部分)的交互作用,这种蛋白质中  的碱性氨基酸(左下蓝色),可与DNA上的酸性

核酸、蛋白质等微量紫外吸光度测量的应用方案

引言核酸(DNA、RNA)、蛋白质等生物样品的微量紫外吸光度及浓度的检测,有助于基因测序、基因筛查、分子育种和动物克隆等生命科学的研究。多家生命科学领域的实验设备供应商已将海洋光学的微型光纤光谱仪应用在了其微量或者超微量紫外分光光度计设备中,并实现了全波段200-850nm,或

紫外交联仪的产品特点

紫外交联仪是一种多用途的254mm紫外辐射系统主要用于将核酸交联于膜上。还可用于琼脂糖凝胶中DNA的切割、RecA突变筛选、嘧啶二聚体产生的部分限制性内切酶消化、UV灭菌消除PCR污染等。在紫外灭菌、聚合物紫外处理等方面也有应用价值。紫外交联仪特点:1、为使核苷酸固定在杂交膜上,传统的方法是将膜置于

胶原蛋白的交联改性方法介绍

指使胶原分子内部和分子间通过共价健结合提高胶原纤维的张力和稳定性的方法。该法又分为物理方法、化学方法和低温等离子体法,生物学方法;其中物理方法、化学方法是最常用的交联改性方法,生物学方法改性胶原蛋白主要在研究有关动物老化的生命现象中涉及,在研制胶原基生物医学材料中少见报道。

细胞化学基础脱氧核糖核酸与蛋白质作用

所有DNA功能都取决于其与特定蛋白质的相互作用。这些相互作用可以是非特异性的,也可以是极其特异性的。还有许多可以结合DNA的酶,其中,在DNA转录和复制中复制DNA序列的聚合酶特别重要。DNA与组织蛋白(图1中白色部分)的交互作用,这种蛋白质中的碱性氨基酸(左下蓝色),可与DNA上的酸性磷酸基团结合

新型蛋白质分子探针-核酸适配体-治疗高度恶性肺腺癌

  肺癌是发病率与死亡率最高的恶性肿瘤,而肺腺癌是肺癌的主要病理亚型。以EGFR抑制剂为代表的靶向治疗及以PD1/PDL1靶向性抗体为代表的免疫治疗极大地改善了肺腺癌病人的生存预后。然而,肺腺癌中恶性程度最高、以细胞快速增殖为主要特征的PP(Proximal-Proliferative)分子亚型肺腺

RNAseq综述(九)

通过研究RNA分子内的相互作用来研究RNA的结构核糖体RNA和tRNA构成细胞的大部分RNA。它们与其他结构非编码RNA一起在细胞中发挥各种作用,例如从基因调节到翻译。现存主要有两种研究RNA结构的方法:基于核酸酶的方法和化学探针方法。核糖核酸酶消化于1965年首次用于研究RAN(tRNA(Ala)

如何测试橡胶硫化后的交联度

胶交联度的方法,即通过显微镜测定小型试样(0.2mg)的溶胀程度。用这种方法可以快速检验厚壁橡胶制品各个不同位置上的交联度。

简述交联葡聚糖凝胶的制备过程

  葡聚糖凝胶微珠表面形态存在粒子凝集和表面粗糙两种不良情况。粒子凝集的原因是分散剂聚醋酸乙烯酯(PVAc)在碱性条件下水解导致亲水性增强,以及交联反应的中间产物具有絮凝作用。另外,交联后粒子粘度增大也可导致凝集。葡聚糖微珠表面粗糙是由于后处理时PVAc的微小附着物没有从微珠表面完全除去而造成的。作

关于交联聚维酮的性状介绍

  本品为白色或类白色粉末;几乎无臭;有引湿性。本品在水、乙醇、三氯甲烷或乙醚中不溶。本品具有高度的毛细管/水含容量,比表面大,水合能力极强(HK:5.6),吸水作用高而迅速(58.5%),吸水膨胀能力强,溶胀系数为2.25-2.30,具有聚乙烯吡咯烷酮相同的络合能力,能络合多种物质,如酚类、碘等。

交联聚乙烯的性能及优点介绍

  聚乙烯的分子由线性的分子链组成。当温度提高时,线性分子链之间的结合力(范德华力)就减弱,使整个分子材料发生形变,因而聚乙烯的耐温性能差。而交联聚乙烯(XLPE) [10] 在分子间架起了化学链桥,使分子不能发生位移,克服了聚乙烯的不足。交联聚乙烯和普通聚乙烯的性能比较见表1。  交联聚乙烯具有以

凝血因子纤维蛋白的交联

  激活后的凝血酶除降解纤维蛋白原释放肽段A、B外,在Ca2+存在下又同时迅速使因子ⅩⅢ激活,后者能使聚合的纤维蛋白在邻近的肽链间形成桥键,而成为稳定而交联的纤维蛋白多聚体,即使在5M尿素溶液中也不溶解,而交联前的凝胶在此条件下则可溶解。因子ⅩⅢ为转谷氨酰胺酶,它使肽链间赖氨酸残基上的ε氨基与谷氨酰

关于交联聚维酮的基本介绍

  交联聚维酮,药用辅料,为水不溶性的合成交联N-乙烯基-2-吡咯烷酮均聚物。  一、名称  通用名:交联聚维酮,Crospovidone,Crospovidonum  化学名称:交联聚乙烯基吡咯烷酮,1-乙烯基-2-吡咯烷酮均聚物,1-etheyl-2-pyrolidione homopolyme

关于交联葡聚糖凝胶的基本介绍

  SephadexG交联葡聚糖的商品名为Sephadex,不同规格型号的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的阿拉伯数为凝胶得水值的10倍。例如,G-25为每克凝胶膨胀时吸水2.5克,同样G-200为每克干胶吸水20克。交联葡聚糖凝胶的种类有G-10、G-15、G-25、G-50、G-75、G-100、

关于交联聚维酮的用途介绍

  交联聚维酮是水不溶性的片剂崩解剂,可迅速表现出高的毛细管活性和优异的水化能力,几乎无凝胶的倾向;研究表明:交联聚维酮颗粒的大小强烈影响解热镇痛片的崩解,颗粒大的交联聚维酮比较小的能发挥更快的崩解作用。交联聚维酮是非常优良的崩解剂,在片剂中用量一般为1-2%,便可取得其他常用的普通崩解剂的崩解作用

紫外交联仪的技术指标

  ·UV波长:312nm(根据用户数据需求另配365nm、254nm灯)  ·曝光时间测量范围:0-999.9(分钟),功率60w·曝光能量测量范围:0-99.99(焦耳)  ·UV光源:5个10W灯管 关机信息不丢失  ·9个曝光能量设定并可保存 汉化液晶屏显示  ·9个曝光时间设定并可保存 可

交联羧甲基纤维素钠

  交联羧甲基纤维素钠(Croscamellose sodium)是羧甲基纤维素钠在一定条件下进行交联反应而成的一种不溶于水而在水中溶胀至原体积4~8倍的交联聚合物,常用作片剂、胶囊剂的崩解剂。  有学者以交联羧甲基纤维素技术开发了适合番茄酱特性的增稠剂,以环氧丙烷为交联剂建立了羧甲基纤维素交联反应

核酸纯化怎样保存核酸

纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽

核酸纯化怎样保存核酸

纯化后的核酸,最后多使用水或者低浓度缓冲液溶解;其中 RNA 以水为主,DNA 则多以弱碱性的 Tris 或者 TE 溶解。经典的 DNA 溶解方法多提倡使用 TE 溶解,认为 EDTA 可以减少 DNA 被可能残留下来的 DNase 降解的风险;如果操作过程控制得当,DNase 的残留几乎是可以忽