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质谱界重磅:继Nature子刊后董梦秋团队又发Nature

交联质谱技术(英文全称Chemical cross-linking of proteins coupled with mass spectrometry, 简称CXMS或XL-MS);CXMS利用化学交联剂将蛋白质或蛋白质复合体中空间距离足够接近的两个氨基酸通过共价键连接起来,酶切成肽段后用质谱鉴定出交联位点,从而获取低分辨度结构信息,帮助推断蛋白质在三维空间的折叠状态以及蛋白-蛋白相互作用的大致区域。相比于晶体和冷冻电镜技术, CXMS对样品量和样品纯度要求低,可捕获蛋白质在溶液中的动态,并且具有简单、快速等优点。因此,CXMS在过去十年中得到了广泛应用,常常助力解析大型蛋白质复合体的精细结构,以及寻找蛋白与蛋白之间直接相互作用的区域。 交联质谱技术有三个支撑点(交联剂、质谱仪器和方法、鉴定软件)和一个原动力(解决实际生物学问题)。当前交联质谱技术的一个明显局限是过分依赖氨基特异性的NHS酯交联剂。此类交联剂主要靶向赖氨......阅读全文

雷晓光课题组在发展化学交联质谱技术领域取得最新进展

  化学交联结合质谱技术 (chemical cross-linking coupled with mass spectrometry, CXMS) 是近年来迅猛发展的一种检测蛋白质结构和蛋白质相互作用的方法。随着质谱仪器以及交联数据搜索软件的发展,CXMS技术已经获得了长足的进步,但在该技术中能够

等电聚焦和二维凝胶电泳实验

对于复杂混合物,如全细胞裂解物或富集的亚细胞组分,通过两步正交的分离 (orthogonalseperation),二维凝胶 (2D 胶)电泳可以很好地分离成几百个至上千个单个蛋白质。第一次分离基于电荷,即使用变性等电聚焦电泳; 第二次分离基于表观分子质量,即使用变性十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电

等电聚焦和二维凝胶电泳实验

等电聚焦和二维凝胶电泳实验             试剂、试剂盒 样品缓冲液