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骨髓细胞单细胞悬液的制备

实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤 1. 无菌抽取骨髓液 0.5 ml。2. 将骨髓标本滴入含 1000 U/ml 肝素抗凝剂的 1 ml PBS 液中。3. 再加入 PBS 液稀释至 10 mI。4. 用吸管吸取 5 ml 稀释骨髓液徐徐加入盛有 4 ml 的人类淋巴细胞分离液液面之上。5. 在以上条件下,骨髓有核细胞分层在 PBS 人类淋巴细胞分离液之间形成的界面上。6. 吸取有核细胞层,加入到 10 ml PBS 液中,混匀。7. 以 1000 r/min 离心 ......阅读全文

单细胞测序揭示肺癌肿瘤免疫细胞亚型的细胞图谱

  最近免疫疗法的出现标志着多种癌症的研究和护理发生了巨大变化,给世界各地的患者和家庭带来了新的希望。对于那些对治疗有反应的人来说,结果可能是激动人心的。激活病人的癌症免疫系统可以杀死或缩小肿瘤,在某些情况下,会导致完全缓解。  尽管取得了重大进展,但只有少数人从免疫治疗中获益,原因尚不清楚。  免

动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片材料、原理和步骤-1

实验九 动物骨髓细胞有丝分裂染色体制片 一、实验目的: 了解动物细胞染色体制片的原理,学习骨髓细胞染色体的制片方法,观察动物细胞染色体的数目和形态。 二、实验原理: 染色体是基因的载体。真核细胞染色体的数目和结构是重要的遗传指标之一。制备染色体标本是细胞遗传学最基本的技术,优良的染色

原代细胞的培养与建系-3

下面为美国标准细胞库或细胞银行(ATCC)入库细胞的基本要求:   (1)培养简历 组织来源日期、物种、组织来源、性别、年龄、供体正常或异常健康状态,细胞已传代数等。   (2)冻存液 培养基和保护剂名称。 &

细胞的纯化方法介绍(自然纯化和人工纯化)(二)

(1)上皮细胞与成纤维细胞的分离纯化: 两者在胰蛋白酶的作用下,由于成纤维细胞先脱壁,二上皮细胞要消化相当长的时间才脱壁,特别是在原代细胞初次传代和早期传代中两种差别尤为明显,故可采用多次差别消化方法将上皮细胞和成纤维细胞分开,方法步骤如下。 采用常规消化传代方式将0.25%胰蛋白酶注入培养

Cell:单细胞测序绘制骨髓基质细胞全景图谱

  最新发布在Cell上的一项研究表明,单细胞测序可以绘制骨髓基质细胞的完整类群,并为白血病研究提供新的视角。这一新研究由美国哈佛大学的David T. Scadden教授和马萨诸塞州综合医院Broad研究所的Aviv Regev团队合作而成。他们创新地使用单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术

细胞的纯化的两种方法

细胞的纯化一般分为两种,即自然纯化很人工纯化.常用的纯化方法有,酶消化法,细胞因子依赖纯化法,机械刮除法,反复贴壁法,电烙筛选法. 体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有

细胞的纯化的两种方法

细胞的纯化的两种方法细胞的纯化一般分为两种,即自然纯化很人工纯化.常用的纯化方法有,酶消化法,细胞因子依赖纯化法,机械刮除法,反复贴壁法,电烙筛选法. 体外培养的细胞源于人或动物或胚胎组织,体内的细胞都是混杂生长,每一种组织都有血管和间叶组织,因此,来源于上述组织的培养材料的原代细胞、传代

流式细胞技术基本原理应用和发展趋势

流式细胞术工作原理是在细胞分子水平上通过单克隆抗体对单个细胞或其他生物粒子进行多参数、快速的定量分析。它可以高速分析上万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,具有速度快、精度高、准确性好的优点,是当代最先进的细胞定量分析技术之一。光源、液流通路、信号检测传输和数据的分析系统是流式细胞仪的主要组成

药物Enasidenib效果如何 看首次绘制的AML白血病细胞系谱图

  在一项新的研究中,来自英国牛津大学、法国巴黎-萨克雷大学、美国纪念斯隆凯特琳癌症中心和Celgene公司等机构的一个国际研究团队首次绘制出急性髓性白血病(AML)中的癌细胞系谱图,旨在了解这种血液癌症如何对新药enasidenib作出反应。这项研究还解释了当患者不再对这种药物作出反应时会发生什么

当前临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

用细胞染色技术分选细胞造血干细胞(HSC)和髓系祖细胞

实验概要识别/分离骨髓祖细胞技术和定量RT-PCR技术的结合将是理解造血分子机制基础的一个功能强大的工具。本实验,我们描述了用于荧光激活细胞分类(FACS)技术的的小鼠骨髓祖细胞标准染色程序。主要试剂1. 1×的PBS/2%胎牛血清(FCS,无菌)2. ACK缓冲液(41.45克NH4Cl,5克KH

流式细胞术的样品制备(七种样品的制备方法)(二)

四、外周血单个核细胞的制备1.取外周血2ml,肝素抗凝,用生理盐水将血稀释成4ml,混匀;2.将稀释后的血液沿试管壁徐徐加入4ml淋巴细胞分离液ficoll到液面之上,勿用力过大,以免造成血液与分离液混合,保持清晰地分层状态;3.离心2000r/min,30min,室温18~20℃,离心后可见试管内

Nature子刊:脂肪细胞或能治疗白血病

  脂肪都是坏东西?别那么轻易下结论!根据加拿大麦克马斯特大学(McMaster University)的一项新研究,一款能促进骨髓中脂肪细胞生长的糖尿病药物,可以通过增强脂肪细胞的方式,间接杀死癌细胞!这将有可能用于急性骨髓性白血病的治疗。该研究近日发表在《自然》子刊《Nature Cell Bi

NAT COMMUN | 蛋白质组学(TMT+label-free)破译衰老密码

  众所周知,干细胞的老化被认为是导致组织和器官老化的根本原因,尤其是在高周转率的生物系统中,比如造血作用。随着干细胞的老化,受损组织被替换的潜能也会随之减弱,在人体中,贫血,适应性免疫系统能力的下降,以淋巴细胞为代价的骨髓细胞的扩张,以及频发的血液系统恶性肿瘤,这些都已经被报道与衰老息息相关。但是

蛋白质组学(TMT+label-free)破译衰老密码

众所周知,干细胞的老化被认为是导致组织和器官老化的根本原因,尤其是在高周转率的生物系统中,比如造血作用。随着干细胞的老化,受损组织被替换的潜能也会随之减弱,在人体中,贫血,适应性免疫系统能力的下降,以淋巴细胞为代价的骨髓细胞的扩张,以及频发的血液系统恶性肿瘤,这些都已经被报道与衰老息息相关。但是这些

质谱流式细胞技术汇总:单细胞,技术限制,分析方法等

生命科学中的技术往往会朝着两个方向发展,其一就是增加细胞特征分析数量,用以同时分析细胞的不同特点,其二就是增加分析的分辨率,从而提高观测精确水平。近几十年里,流式细胞技术的发展满足了这两个要求,精确分析单个细胞的多种特征,帮助科学家们了解复杂或多级细胞系统中的分子机理。近期研究人员将流式细胞技术与质

临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

创新性方法或能帮助研究干细胞微环境

  近日,一项刊登在国际杂志Nature Cell Biology上的研究报告中,来自欧洲分子生物学实验室等机构的科学家们通过研究开发出了一种新方法,其能够在单细胞水平下揭示骨髓的三维组织架构,由于骨髓中含有负责机体终生血液产生的造血干细胞,相关研究结果或有望帮助研究人员深入研究多种血液癌症发生的分

Cell:利用单细胞测序描绘骨髓间质完整的细胞类群

  2019年5月23日,哈佛大学的研究人员在Cell上发表了题为“A Cellular Taxonomy of the Bone Marrow Stroma in Homeostasis and Leukemia”的文章。研究者们从单细胞角度系统地对骨髓间质细胞进行了详细的分类学研究,揭示了急性髓

Hoxb5细胞的命运我做主将B细胞重编程为功能性T淋巴细胞

  小编:天地悠悠过客匆匆潮起又潮落~~~   小鼠甲:咳咳,咱们是个严肃的科普节目……   小编:天地洪荒,宇宙万物,生命起源,又到了万物~~~   小鼠乙:(咆哮体)现在是冬天!冬天!咱们几(今)天要讲的是细胞!细胞!   小编:呃(⊙o⊙)… 好吧,咱们今天要讲的是细胞(*^▽^*),

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

FCM对外周白细胞的免疫荧光分析

外周血是临床检验中的重要标本。FCM分析外周白细胞的主要目的是了解各种白细胞的数目与分群情况。这些数字的变化与临床的某些疾病有一定的关系。近年来,由于多种识别白细胞膜表面抗原的单克隆抗体的发现,以及对这些单克隆抗体的直接或间接荧光标记物的出现,使得利用FCM的荧光组织化学分析获得被测细胞的多指标的更

发育生物学领域最新研究进展

  本期为大家带来的是发育生物学领域的最新研究进展,希望读者朋友们能够喜欢。  1. Eur Respir J:新研究揭示肺脏发育高清图谱  DOI: 10.1183/13993003.00746-2019  过早出生的婴儿常常患有肺部发育不良,并可能面临危及生命的后果。为了给这些婴儿提供新颖的治疗

胡国富教授Cell发布再生医学重要发现

  塔夫茨医学中心和塔夫茨大学的科学家们发现了血管生成素(ANG)蛋白一个令人兴奋的新功能:对调控血细胞形成起重要作用,这对骨髓移植和从放射诱导的骨髓衰竭中恢复极为重要。由于当前的骨髓移植有着明显的限制,这些研究发现或可促成一些重要的治疗干预措施帮助提高这些治疗的疗效。研究结果发布在8月11日的《细

Cell:科学家利用单细胞测序描绘骨髓间质完整细胞类群

  哈佛大学的研究人员在Cell上发表了题为“A Cellular Taxonomy of the Bone Marrow Stroma in Homeostasis and Leukemia”的文章。研究者们从单细胞角度系统地对骨髓间质细胞进行了详细的分类学研究,揭示了急性髓系白血病对间质细胞群体

骨髓间充质干细胞(MSC)原代培养与传代培养实验步骤

准备工作(1)试管、试管架、滴管、吸管、小鼠固定架、玻璃瓶、玻璃皿、烧杯、橡皮头、剪刀、镊子、纱布、棉球、酒精灯、滴管、移液器、细胞计数器、生理盐水、PBS、双抗(青链霉素)、75%酒精、95%酒精、培养瓶(50ml,260ml)。(2)BALB/C小鼠(4~5周龄,18~22g,雌雄不限)、胎牛血

急性白血病的FAB分型及各型的实验室诊断标准(4)

4)急性早幼粒细胞白血病(M3)①血象 血红蛋白、红细胞及血小板计数减少,大多数病例白细胞轻度增高,少数患者白细胞总数减少,此时患者的血象表现为全血细胞减少。分类以异常早幼粒细胞为主,可见少数原粒及其他阶段的粒细胞,Auer小体易见。②骨髓象 多数病例增生明显或极度活跃,个别病例

Nature:人类细胞图谱研究先锋Aviv Regev

  Aviv Regev是一位生物分析专家。现在,她正致力于绘制人体的每一个细胞。  计算生物学家Aviv Regev喜欢做一些看似不可能完成的任务。2011年,她与分子遗传学家Joshua Levin合作,测试了RNA测序的几种方法。科学家们在测试几种技术的极限,以查看哪种方法表现最佳。他们用降解

当前临床流式细胞分析的发展趋势

流式细胞分析(Flow cytometry,FCM)是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、生化、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术,它具有如下几个特点:①标本只要

遗传多样性随着衰老而增加

染色质修饰包括组蛋白转录后修饰,组蛋白多样性。连同DNA一起调控表观遗传表型。虽然染色质修饰在多种生理学过程和人类疾病中都有重要的意义,但是由于此前存在的技术检测通道有限,无法同时检测各种免疫细胞亚群特异性marker和各种染色质修饰。因此在人类免疫细胞中进行染色质研究具有挑战性。近期出现的一个技术