细胞RNA含量样品的制备及分析
实验材料 单细胞悬液 试剂、试剂盒 PY 试剂 醋酸缓冲液 磷酸缓冲液 DNA 酶消化液 实验步骤 一、试剂配制1. PY 试剂的配制:PY 1.0 g 以 100 ml 蒸馏水溶解,配成母液,置 4℃ 冰箱保存。PY 工作液:取 1 ml PY 母液,加入 1 mol/L pH 4.7 的醋酸缓冲液 100 ml,稀释为 0.01% 的浓度。2. 1.0 mol/L pH 4.7 醋酸缓冲液的配制:冰醋酸 11.55 ml 加蒸馏水至 1000 ml;无水醋......阅读全文
细胞RNA含量检测
细胞RNA含量检测 实验步骤
细胞RNA含量检测
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提取悬浮细胞RNA
提取RNA器械:离心管2支,吸管4个,酒精灯,打火机,记号笔,200ul,1000UL枪,DEPC泡过的枪头EP管,紫外照过的手套。滤纸,DEPC纯水(750ml无水乙醇+150mlDEPC水,剧烈振荡,使劲的摇晃,直至混匀),氯仿,75%酒精,异丙醇,Trizol,预冷的离心机(两种),EP管架(
细胞RNA含量检测
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RNA提取心得(组织RNA提取和培养细胞的RNA提取)
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织,这样RNA提取的效果比较好,这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的(最好在半年之内,-80℃或者液氮中冻存的)组织,注意不要反复冻融,从冰冻状态拿到0-4℃,注意不要拿到常温,待组织解冻后,用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织,称重后,放到预冷的匀浆器中,然后
细胞化学词汇间隔RNA
中文名称:间隔RNA英文名称:spacer RNA定 义:初级转录物中由基因间序列编码产生的RNA序列。如哺乳动物核糖体核糖核酸(rRNA)的初级转录物位于18S rRNA和28S rRNA间的一段序列,这些序列不出现在成熟的rRNA中。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级
细胞化学词汇RNA构象
中文名称:RNA构象英文名称:RNA conformation定 义:RNA分子的空间结构,构象改变并不导致共价键的断裂和生成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA折叠
中文名称:RNA折叠英文名称:RNA folding定 义:新合成的或变性的RNA转变为特定的、成熟的三维结构构象的过程。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA包装
中文名称:RNA包装英文名称:RNA packaging定 义:特指病毒RNA通过其顺式作用元件被病毒核衣壳蛋白识别和包裹的过程。广义指核糖核蛋白颗粒的形成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA运输
中文名称:RNA运输英文名称:RNA trafficking定 义:将RNA引导到细胞的特定区域。细胞内的RNA运输对细胞的生理功能至关重要。核内RNA运输影响RNA的加工成熟和核输出;胞质RNA运输影响RNA的定位、运输和基因表达的水平。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二
细胞化学词汇互补RNA
中文名称:互补RNA英文名称:complementary RNA定 义:能与另一条核酸(DNA或RNA)链互补的RNA分子。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇核RNA
中文名称:核RNA英文名称:nuclear RNA定 义:细胞核内的RNA。如核内不均一RNA、核小RNA、核仁小RNA等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤:1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol,冰上放置5min,枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中,加入氯仿0.2ml/管,用力振摇15s。15-30℃下孵育2-3min,离心(4℃,12,000g,15min)。3) 离心后液体分为三层(上层-无色
细胞化学词汇RNA定位
中文名称:RNA定位英文名称:RNA localization定 义:RNA特异定位在细胞不同区域的过程。尤其是信使核糖核酸(mRNA)的定位对生长和发育是重要的。细胞质中RNA定位起始于细胞核,在核中被特异RNA结合蛋白识别,生成核糖核蛋白复合体,然后输出到细胞质。应用学科:生物化学与分子生物学
细胞化学词汇RNA复制
中文名称:RNA复制外文名称:RNA replication定 义:RNA复制是以RNA为模板合成RNA的过程,是除了逆转录病毒以外的其他RNA病毒的复制方式。有些生物,像某些病毒的遗传信息贮存在RNA分子中,当它们进入宿主细胞后,靠复制而传代,当它们以RNA模板时,在RNA复制酶作用下
细胞化学词汇RNA干扰
中文名称:RNA干扰外文名称:RNA interference定 义:RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。分 类:基因沉
细胞化学词汇RNA重组
中文名称:RNA重组英文名称:RNA recombination定 义:RNA分子内或分子间发生的共价重新组合。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
细胞化学词汇卫星RNA
中文名称:卫星RNA外文名称:satellite RNA别 名:卫星核酸类 别:植物病毒RNA常见种类:黄瓜花叶病毒定 义:卫星RNA是一类小的非编码RNA,基因组大小为200-1500nt,通常不编码蛋白,是一类存在于某专一病毒粒即辅助病毒的衣壳内并完全依赖于辅
细胞化学词汇RNA靶向
中文名称:RNA靶向英文名称:RNA targeting定 义:(1)针对RNA分子设计的一种定向作用技术。包括一些小分子化合物(如抗生素)、反义核酸、反式作用核酶、适配体、干扰小RNA等的应用。(2)由于RNA分子本身具有较大的柔性,能专一地与RNA、DNA和蛋白质相互作用,而成为一种特异的靶向
细胞化学词汇反义RNA
中文名称:反义RNA外文名称:antisense RNA概 念:与mRNA互补的RNA分子作 用:抑制mRNA的翻译分 类:三类反义RNA是指与mRNA互补后,能抑制与疾病发生直接相关基因的表达的RNA。它封闭基因表达,具有特异性强、操作简单的特点,可用来治疗由基因突变或过度表达导
细胞化学词汇RNA沉默
中文名称:基因沉默外文名称:RNA silencing定 义:基因沉默是指在真核生物(植物、动物、真菌)中保守的由双链RNA诱导的鉴定和破坏其细胞质中异常变异或过表达的RNA的一种机制。
培养细胞中RNA检测
实验概要掌握培养细胞中RNA的检测方法。实验步骤1.制胶(1%): 琼脂糖 2.5g 10×Mops缓冲液 25.0ml H2O 192.0ml2.在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。3.取出胶冷却到60℃,于通风柜中加45ml甲醛,混匀。4.加20μl溴化乙锭,混匀。5.令胶液再
肝脏细胞RNA的提取
一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的,
细胞化学词汇核仁RNA
中文名称:核仁RNA英文名称:nucleolar RNA定 义:核仁中的RNA。包括核糖体核糖核酸(rRNA)前体、核仁小RNA等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇转运RNA
中文名称:转运RNA外文名称:transfer ribonucleic acid,tRNA功 能:携带并转运氨基酸。转运RNA(Transfer RNA),又称传送核糖核酸、转移核糖核酸,通常简称为tRNA,是一种由76-90个核苷酸所组成的RNA,其3'端可以在氨酰-tRNA合
细胞化学词汇RNA输出
中文名称:RNA输出英文名称:RNA export定 义:真核生物RNA从细胞核输送到细胞质的过程。游离RNA及其前体是不能直接通过核孔的,需要与许多RNA结合蛋白生成核糖核蛋白复合体,才能输出到细胞质行使功能。不同种类RNA需要不同的结合蛋白。核内的信使核糖核酸在切除内含子后才能输出。应用学科:
脂肪细胞RNA提取原理
氯仿是分子量比较大的有机溶剂,在提取RNA时,氯仿可以有效的使有机相和无机相迅速分离。DNA提取过程 有机相中主要是酚和蛋白结合,从而使得蛋白和DNA脱离,DNA进入水相。但是在RNA的提取过程就要避免蛋白和DNA脱离,否则DNA会释放到水相。不管有酚也好,没有酚也好,氯仿本身也对蛋白有变性作用,剧
细胞RNA的提取方法
(一)细胞总RNA的提取1、6孔板细胞汇合度为90-100%时,取出无菌室,去其上清,用PBS洗两次后,每孔加TRIZOL试剂 1 ml,摇匀,无菌罩内消化3-5 min。2、将各孔内消化好的细胞裂解液吸到一DEPC处理过的1.5 ml EP管中,加新开的氯仿0.2 ml,轻摇15 s。3、室温静置
细胞化学词汇分支RNA
中文名称:分支RNA英文名称:branched RNA定 义:通过直链RNA中特定部位的2′-羟基与另一直链RNA(或同一RNA分子)的末端5′-磷酸基形成磷酸酯键而得到的RNA,见于Ⅱ型内含子自剪接和真核信使核糖核酸(mRNA)内含子剪接的中间体。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸
细胞化学词汇RNA假结
中文名称:RNA假结外文名称:RNA pseudoknot定 义:RNA中的一种常见的三级结构元件。RNA的茎环结构中的环上序列与其他部位(通常是邻近部位)的序列碱基配对,形成类似“打结”形状。