细胞凋亡的三种流式检测方法
一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点:1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关分析3、结合被测细胞DNA含量分析,可确定凋亡的细胞所处的细胞周期。但该法周样也具有标本制作复杂。非原位检测,不易与变性细胞鉴别等因素的限制。二、检测方法1、检测形态学及细胞膜完整性的Hoechs-PI双染色法细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间,利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,采用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。常用Hoechs-PI染色法,正常细胞对染料有拒染性,荧光着色很浅,凋亡细胞主要摄取hoechs-PI染料,呈现强蓝色荧光,而坏死细胞......阅读全文
三种流式方法检测细胞凋亡
一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相关
细胞凋亡的三种流式检测方法
一、检测原理细胞发生凋亡时,其细胞膜的通透性也增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。利用这一特点,被检测细胞悬液用荧光素染色,利用流式细胞仪测量细胞悬液中荧光强度来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。流式细胞仪检测有下列特点:1、检测的细胞数量大,因此其反映群体细胞的凋亡状态比较准确2、可用许多相
流式检测细胞凋亡还有哪些方法?
前面讲到利用流式细胞术进行细胞凋亡检测的annexinV/PI双染色法,今天主要简要介绍SYTO/PI双染色法、细胞DNA含量分析法、TUNEL法。 SYTO/PI双染色法 SYTO系列染料是一种细胞膜通透性的核酸染料,可以自由进入活细胞与细胞内的DNA或者RNA结合,未结合时发射荧光信号的
流式细胞术检测细胞凋亡
实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis. 实验原理Apoptosis is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal part o
如何用流式检测细胞凋亡
前言细胞凋亡通常称为细胞程序性死亡,是由基因控制的主动性细胞死亡过程。越来越多数据发现,细胞凋亡与多种疾病密切相关,如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力,利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿瘤诊断,疗效评价和预后预测提供了重要的参考指标。然而很多实验的同学们,常会碰到上机检测时细胞死亡太多却检测不出凋
流式细胞仪检测细胞凋亡
细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas
流式细胞仪细胞凋亡检测
一 PI单染色法 基本原理 其原理主要是根据细胞 凋亡时在细胞、亚细胞和分子 水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变:由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin-V-法)
实验原理 Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白,可以与早期凋亡细胞的胞膜结合,而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin-V-法)
实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白,可以与早期凋亡细胞的胞膜结合,而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时早的改变之一。在细胞发生凋亡时,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由质膜内侧翻向外侧。Annexin V与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由
流式细胞仪检测细胞凋亡方法(Annexin-V-法)
实验概要Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂,本实验介绍了一个用流式细胞仪检测细胞凋亡的方法(Annexin V 法)。实验原理Annexin V是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白,可以与早期凋亡细胞的胞膜结合,而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡
细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术
细胞调亡的流式细胞仪检测技术一、固定细胞的染色方法1)PI单染色法方法一1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。2.3ml PBS洗一次。3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。5.40
细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术
一、固定细胞的染色方法 1)PI单染色法 方法一 1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.3ml PBS洗一次。 3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5.400目的筛网过滤
细胞凋亡检测流式细胞仪检测技术
一、固定细胞的染色方法 1)PI单染色法 方法一 1.收集细胞(1~5)×106个,500~1000r/min离心5min,弃去培养液。 2.3ml PBS洗一次。 3.离心去PBS,加入冰预冷的70%的乙醇固定,4℃,1h。 4.离心弃去固定液,3ml PBS重悬5min。 5.400目的筛网过滤
细胞凋亡检测:流式细胞仪检测技术
细胞调亡的流式细胞仪检测技术 一、固定细胞的染色方法 1 ) PI 单染色法 方法一1. 收集细胞( 1 ~ 5 )× 106 个, 500 ~ 1000r/min 离心 5min ,弃去培养液。2. 3ml PBS 洗一次。3. 离心去 PBS ,加入冰预冷的 70 %的乙醇固定, 4 ℃, 1h
细胞凋亡,细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法 1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。 2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法 实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面: 1. 细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法 实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可以: 鉴定细胞凋亡形态; 可以准确的进行凋亡细胞的计数; 可以进行特异的定性分析和定量分析。 实验原理 细胞凋亡时,在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变,这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变zui具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性
用流式细胞仪检测细胞凋亡
细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是c
细胞凋亡:流式细胞仪检测实验
用次GoZG1 DNA峰值计算细胞凋亡 用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞 通过TUNEL组织切面中的凋亡细胞的原位杂交 实验方法原理
用流式细胞仪检测细胞凋亡
细胞凋亡的检测方法众多,流式细胞仪检测凋亡,是常用的方法。由于流式细胞仪固有的特点――可以准确的进行凋亡细胞的计数。因此,具有其它方法无可比拟的优越性。下面我们就简单明了地介绍流式在检测凋亡方面的应用。在凋亡诱导剂的作用下,首先是细胞色素C和apa f-1形成复合体,线粒体的功能发生衰退;后是cas
细胞凋亡:流式细胞仪检测实验
实验方法原理 实验材料 要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒 FACS缓冲液冰冷的100%乙醇(如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇)1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭(PI)的PBS仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1)凋亡刺激后,从培养液中沉淀所要分析的细胞,同样沉淀一
流式细胞仪检测细胞凋亡的原理
一、原理在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结
流式细胞仪检测细胞凋亡的原理
一、原理在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结
流式细胞仪检测细胞凋亡的几种方法的比较
目的:探索运用流式细胞仪来检测细胞凋亡的方法.方法:采用流式细胞仪对DNA含量、磷脂酰丝氨酸、线粒体膜电位、钙离子浓度的检测,分析细胞凋亡情况.结果:DNA含量测定存在一定误差;磷脂酰丝氨酸测定能准确反映细胞早晚期凋亡情况;线粒体膜电位、钙离子浓度测定能准确反映凋亡细胞的生理指标,如果结合形态学分析
细胞凋亡通路和细胞凋亡检测的几种检测方法
一、形态学观察方法1、HE染色、光镜观察:细胞凋亡后呈圆形,胞核深染,胞质浓缩,染色质成团块状,细胞表面有“出芽”现象。2、丫啶橙(AO)染色,荧光显微镜观察:活细胞核呈黄绿色荧光,胞质呈红色荧光。细胞凋亡|后(细胞凋亡,细胞凋亡通路,细胞凋亡检测)核染色质呈黄绿色浓聚在核膜内侧,可见细胞膜呈泡状膨
细胞凋亡检测方法
细胞发生凋亡时,不同区域内(如细胞膜、细胞浆、线粒体、细胞核等)会发生不同的生理生化改变。因此,针对不同区域的细胞凋亡检测要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡检测原理:Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca依赖性磷脂结合蛋白,正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl
细胞凋亡检测方法
细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测 根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。 1 光学显微镜和倒