做HPLC分析时,你遇到过溶剂效应现象吗?
做过HPLC的朋友都知道一句话:用流动相溶解样品(等度洗脱),或者是用初始流动相比例溶解样品(梯度洗脱)。为什么要这么做呢?我们先来看一个列子:当用100%的乙腈来溶解样品上机时,峰1出现分叉、展宽,峰2未分叉。当换成用流动相来溶解样品时,峰1和峰2的峰形都不分叉,峰形较好。是什么原因导致这种现象发生的呢?那就是溶解效应造成的。溶剂效应:就是指样品溶液的溶剂强度强于流动相溶剂强度时可能会造成的峰展宽、峰分叉现象。通常表现为色谱图上较早洗脱的峰前沿或者开叉,与此同时较晚洗脱的峰则较为正常的现象。例如样品溶液的溶剂是100%乙腈(100%的强溶剂),而流动相的组成则较弱,20%的乙腈与80%的水。第一个峰是开叉的,并且与第二个峰相比,明显地变宽了。当样品溶液的溶剂变成流动相时,所有的峰形都改善了,且变得尖锐。当溶解样品的溶剂不同于流动相时,样品溶剂与流动相发生混合,样品溶剂被大量的流动相稀释。如果样品溶剂的强度高于流动相,部分样品在......阅读全文
做HPLC分析时,你遇到过溶剂效应现象吗?
做过HPLC的朋友都知道一句话:用流动相溶解样品(等度洗脱),或者是用初始流动相比例溶解样品(梯度洗脱)。为什么要这么做呢?我们先来看一个列子:当用100%的乙腈来溶解样品上机时,峰1出现分叉、展宽,峰2未分叉。当换成用流动相来溶解样品时,峰1和峰2的峰形都不分叉,峰形较好。是什么原因导致这种现象发
做HPLC或者紫外用DMSO做溶剂可以吗
做紫外的时候没有问题,拿dmso做参比就是了。做hplc的时候有点问题就是,dmso与流动相的相溶性问题,相容性不好,出的峰肯定很丑。
做HPLC分析时,柱压不稳定,原因何在
1. 泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理;2. 比例阀失效,更换比例阀即可;3. 泵密封垫损坏,更换密封垫即可;4. 溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法;5. 系统检漏,找出漏点,密封即可;6. 梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
细胞生长曲线的测定-这些问题你遇到过吗?
1、 问:测定细胞生长曲线的意义是什么? 答:细胞生长曲线是测定细胞绝对生长数的常用方法,也是判定细胞活力的重要指标,是培养细胞生物学特性的基本参数之一。因为细胞太小,无法测单个细胞的生长状态,所以测细胞群体的生长曲线。 2、 问:如何选择细胞接种数? 答:可根据细胞传代培养过
海鲜也能注水?这些海鲜黑幕你遇到过吗?
夏天是吃海鲜的好时候,皮皮虾、蛏子、海螺、螃蟹、虾……都是诱人的美食。近日,网友爆料自己在海鲜市场买的蛏子一煮全是水,问了做海鲜的朋友,才发现了其中的黑幕:低盐度水浸泡可增重。 5月28日,记者在盒马武汉店做了一组长达七个小时的现场测试,结果显示:采用9‰低盐度水浸泡七小时之后的蛏子和鲍鱼分别
实验室的这些“小麻烦”你遇到过吗?
在实验室,每个实验猿除了*大难题“洗瓶子”之外,往往还会遇到一些大大小小的问题,如瓶塞粘固打不开,分液时发生乳化现象,反应釜内衬难清洁等等。如能采取适当方法或技巧加以处理,这些麻烦就会迎刃而解。1.打开粘固的玻璃磨口当玻璃仪器的磨口部位因粘固而打不开时,可采取以下几种方法进行处理。(1)敲击用
做HPLC分析时,柱压不稳定有什么原因
柱压的影响因素有很多:1、有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。2、固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。3、泵内是否有空气残留,也会影响柱压稳定。4、密封片损坏,空气流入。5、溶剂中的气泡6、梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
做HPLC分析时,柱压不稳定有什么原因
柱压的影响因素有很多:1、有一部分是流动相的黏度。流动相黏度越大,柱压越高。2、固定相的颗粒大小或者均匀程度以及流动相的流速也会对柱压有影响。3、泵内是否有空气残留,也会影响柱压稳定。4、密封片损坏,空气流入。5、溶剂中的气泡6、梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
HPLC保留时间漂移现象原因分析
1、温度控制不好,解决方法是采用恒温装置,保持柱温恒定2、流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等3、柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡
发呆时你还了解你的大脑吗?
我的脑子一片空白”、“大脑停止了转动”,如果你还在用这样的语言形容自己发呆时的情形,那就大错特错了:神经成像研究发现,当我们休息或发呆时,大脑中始终存在着一些神秘的“背景”神经活动。更让人惊讶的是,当我们有意识做事时,大脑耗能量却仅为“背景活动”的 1/20。这些看不见的神经活动,就是“大脑暗能
做-HPLC-分析时,柱压不稳定,原因何在-如何解决
原因可能有: 泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理; 比例阀失效,更换比例阀即可。 泵密封垫损坏,更换密封垫即可。 溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法; 系统检漏,找出漏点,密封即可。 梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
用氘代DMSO做溶剂测氢谱时活性氢可能不出现吗
水印清茶(站内联系TA)一般要出来的啊:)anio(站内联系TA)我遇到不出来的梦远3380(站内联系TA)在3.33出和2.5处好像会有溶剂峰,一个是残余质子一个是水的lsheng(站内联系TA)产物中水分多了 活泼氢看不到很正常sakiyong(站内联系TA)换用别的溶剂看看,会不会也有这样的情
用ELISA试剂盒做实验,你会分析结果吗?
相信有的同学在做完ELISA实验之后,不知道怎么分析结果,然而整个实验*关键的就是结果的处理了。那么在今天的文章中,我司为您带来的是elisa试剂盒检测结果分析方法。①:ELISA实验中样品都要做复孔或三孔,然后计算每个浓度标准品的平均OD值,复孔的变异系数应该小于20%。②:平均OD值减去空白孔的
做HPLC分析时柱压不稳定的原因及解决办法
①泵内有空气,解决的办法是清除泵内空气,对溶剂进行脱气处理; ②比例阀失效,更换比例阀即可; ③泵密封垫损坏,更换密封垫即可; ④溶剂中的气泡,解决的办法是对溶剂脱气,必要时改变脱气方法; ⑤系统检漏,找出漏点,密封即可; ⑥梯度洗脱,这时压力波动是正常的。
液相色谱使用流动相时需要注意哪些问题
1.色谱柱中的流动相是否会会排干的问题: 不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相泵将溶剂瓶中的流动相吸干了HPLC系统由此而停止工作了这会损坏色谱柱吗?泵是否排出了塔中的所有流动相?色谱柱还能用吗事实上,如果泵吸收了溶剂瓶中的流动相,就不会对色谱柱造成损坏,即使泵
真假双胞胎:你了解“重孕”现象吗?
近期有新闻报道说,有位产妇同一天生下两个孩子,可是却不是双胞胎,这到底是怎么回事呢?新闻截图(图片来源:https://baijiahao.baidu.com) 你听说过“重孕”吗? 孕妇们在怀孕的时候会定期前往医院进行产检。在孕检过程中,有的时候会遇到这种情况:在最初检查时发现子宫内只有一
变色龙效应:你这样做,可以让别人更容易喜欢上你!
最近在看小谢尔顿,有一集内容是这样的,妹妹告诉他,妈妈因为他没有朋友而感到焦急,于是他决定为妈妈迈出这一步,勇敢地去交朋友,他按照卡耐基的交友方法去找朋友,经过重重坎坷,最终才找到一个志趣相投的朋友。 交朋友很难,让别人喜欢你更难,想要交朋友的同学可以看看这篇文章,或许可以帮助到你。 这是一
变色龙效应:你这样做,可以让别人更容易喜欢上你!
最近在看小谢尔顿,有一集内容是这样的,妹妹告诉他,妈妈因为他没有朋友而感到焦急,于是他决定为妈妈迈出这一步,勇敢地去交朋友,他按照卡耐基的交友方法去找朋友,经过重重坎坷,最终才找到一个志趣相投的朋友。 交朋友很难,让别人喜欢你更难,想要交朋友的同学可以看看这篇文章,或许可以帮助到你。 这是一
做荧光相关光谱一定要选取水为溶剂吗
做荧光相关光谱一定要选取水为溶剂吗溶剂在紫外光区有吸收,截止波长:就是溶剂吸光度为1 AU时的波长,紫外检测器分析时的波长要在截止波长之上。当小于截止波长的辐射通过溶剂时,溶剂对此辐射产生强烈吸收,它严重干扰组分的吸收测量。
你遇到过D二聚体的非特异性结合吗?
D-二聚体是纤维蛋白单体经活化因子XIII交联后,再经纤溶酶水解所产生的一种降解产物,是一个特异性的纤溶过程标记物。D-二聚体主要反映纤维蛋白溶解功能,只要机体血管内有活化的血栓形成及纤维溶解活动,D-二聚体就会升高。目前,D-二聚体在临床上主要用于弥漫性血管内凝血(DIC)的早期诊断、深静脉血栓(
输血治疗时,你会被这样问吗?
输血这一诊疗过程,可以看作是一项小的“移植手术”,虽然仅仅是靠一条输血器完成的操作,看似“草率”的输血过程,其实包含了非常复杂的医学理论。因此,在临床中,会经常遇到一些患者提出各种问题,以下是我在临床中遇到的情况,分享给大家,与君共勉。(一)患者:要输全血,全血啥都有,效果更好!回答:这是个误区,全
HPLC保留时间快速变化现象
1. 流速发生变化,解决办法是重新设定流速,使之保持稳定2、泵中有气泡,可通过排气等操作将气泡赶出。3、流动相不合适,解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合
稳定型位置效应现象
果蝇的复眼由许多小眼组成。野生型的正常复眼呈椭圆形;棒眼突变型由于小眼数的显著减少而呈不同程度的狭棒形。棒眼基因B为显性,位于X染色体上。纯合的棒眼果蝇的后代中常出现少数野生型个体;同时出现少数复眼比棒眼更狭细的超棒眼个体。这两种个体出现的频率都约占1/1600,远远超过一般的突变频率。
做RNA提取时EP管架要高压灭菌吗
不需要,EP管在DEPC水泡完高压灭菌就行了,有条件的话实验过程中用冰盒放置EP管
做液相色谱分析时溶剂梯度变化为什么会导至基线不平
液相色谱基线不稳的话原因有以下几种及解决方法:1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。)控制好柱子和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器图;流动相不均匀。(流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移。)2
做HPLC的“鬼峰”知识
鬼峰,顾名思义,就是指在相同的色谱条件下,有时候出现,有时候消失的杂峰。鬼峰产生的原因是多种多样的,查询了相关文献,结合本人以往的经验,来谈谈鬼峰的成因及应对策略,主要体现在以下几个方面:1、流动相、样品及仪器中存在杂质。运行梯度洗脱时,由于开始时有机相比例不高,洗脱能力不强,部分杂质在便富集在色谱
大便常规天天做,这几个重点你真的知道吗?
相信大家都做过便常规检测吧,可别小瞧这简简单单的“三大常规”之一,它可是临床疾病的“警报器”。便常规包括物理学检查(性状、颜色、不消化物等)、化学检查(隐血)以及显微镜检查(血细胞、寄生虫、寄生虫虫卵、结晶和细菌等),如何看懂便常规的化验报告呢?可参考如下程序和办法。1 观“色”又察“形”大便的颜色
HPLC的流速通常是1.0ml/min,你知道原因吗?
经常做HPLC的朋友一定都知道,流动相的流速都在0.8-1.2ml/min之间,那我们在优化方法时能不能调整流速呢?答案是不能的。今天我们就从原理上分析一下流速与色谱柱柱效的关系。 在1956年,荷兰学者范第姆特吸收塔板理论中的一些概念,建立了色谱过程的动力学理论,即速率理论。该公式表述如下:H=A
ABO血输血治疗时,你会被这样问吗?
输血这一诊疗过程,可以看作是一项小的“移植手术”,虽然仅仅是靠一条输血器完成的操作,看似“草率”的输血过程,其实包含了非常复杂的医学理论。因此,在临床中,会经常遇到一些患者提出各种问题,以下是我在临床中遇到的情况,分享给大家,与君共勉。(一)患者:要输全血,全血啥都有,效果更好!回答:这是个误区,全
拉曼效应的现象规律
1930年诺贝尔物理学奖授予当时正在印度加尔各答大学工作的拉曼(SirChandrasekhara Venkata Raman,1888——1970年),以表彰他研究了光的散射和发现了以他的名字命名的定律。在光的散射现象中有一特殊效应,和X射线散射的康普顿效应类似,光的频率在散射后会发生变化。“拉曼