细胞培养用液的配制与消毒

一、器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤:(1)水的制备:细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.(2)PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1.溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO4 0. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml,摇匀即成新配制的PBS溶液。2.移入溶液瓶内待消毒:将PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。(3) 胰蛋白酶溶液的配制与消毒:胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。......阅读全文

PBS缓冲液的配制

配制方法:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1

荚膜染色液的配制方法

荚膜染色液   1.黑色素水溶液  黑色素 5g  蒸馏水 100ml  福尔马林(40%甲醛) 0.5ml  将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。  2.番红染液  与革兰氏染液中番红复染液相同。

鞭毛染色液的配制方法

鞭毛染色液   A液:单宁酸 5g  FeCl3 1.5g  蒸馏水 100ml  福尔马林(15%) 2.0ml  NaOH(1%) 1.0ml  配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。  B液:AgNO3 2g  蒸馏水 100ml  待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余的90

芽孢染色液的配制方法

芽孢染色液   1.孔雀绿染液  孔雀绿(malachite green) 5g  蒸馏水 100ml  2.番红水溶液  番红 0.5g  蒸馏水 100ml  3.苯酚品红溶液  碱性品红 11g  无水酒精 100ml  制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。  4.

重铬酸钾滴定液的配制

①基准应先研细,在120℃干燥至恒重,放冷后立即称量配制。②最好是棕色瓶,浓配摇匀使溶后再加水至刻度。

硫电解液的配制

取 0.5gKI,0.6gNaN3 溶于约500ml 去离子水中,加入 5ml 冰醋酸,再用去离子水稀释至 1000ml。配制电解液所用试剂均为优级纯,去离子水的阻值要求 2 兆欧以上,配好的电解液用棕色瓶在阴暗凉爽处放置,硫电解液不能长期保存,须在一周内用完。

碳酸缓冲液的配制

0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液 Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 加蒸馏水至1000ml。ELISA实验包被用。

pbs缓冲液的配制

含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2.9g,氯化钠(NaCl)8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,吐温-20 0.5mL,加水至1000mL。PBS1L配方pH7.4:磷酸二

高氯酸滴定液的配制

①是碱性基因的有机化合物。加入醋酐量应为理论量12~13倍,一般市售高氯酸含量普遍偏低,1000mL配制理论量85ml,实际工作中取用96-98ml,导致含水增大,所以应加入12倍左右的实际用量而保证含水量合格。②配制中先加醋酸将高氯酸稀释,以免反应剧烈,色泽变黄导致分解,滴加醋酐先振摇后滴加,速度

PBS缓冲液的配制

配制方法:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4):1

pbs缓冲液的配制

称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中,用HCl调节溶液至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。配制PBS溶液的最简单方法是使用PBS片,后者是已制好的配方片剂,当需要使用PBS时只需将其溶解于一定

pbs缓冲液的配制

pbs缓冲液的配制是:含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4)0.2g,磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2.9g,氯化钠(NaCl)8.0g,氯化钾(KCl)0.2g,吐温-20 0.5mL,加水至1000mL。PBS1L

用干粉配制培养基

实验方法原理用适量的超纯水将包装中的干粉全部溶解:将容器放到磁力搅拌器上,边搅拌边加干粉。当所有的成分完全溶解后,培养基应立即过滤不能放置,否则会产生沉淀或有微生物污染。当最后的成分(如,谷氨酰胺、NaHCO3或血清)加完后,最好调整pH 。实验材料干粉培养基试剂、试剂盒超纯水仪器、耗材装培养基的有

用干粉配制培养基

实验方法原理用适量的超纯水将包装中的干粉全部溶解:将容器放到磁力搅拌器上,边搅拌边加干粉。当所有的成分完全溶解后,培养基应立即过滤不能放置,否则会产生沉淀或有微生物污染。当最后的成分(如,谷氨酰胺、NaHCO3或血清)加完后,最好调整pH 。实验材料干粉培养基                    

细胞培养基的配制的小窍门(三)

三、 仪器、材料和试剂仪器:滤泵一套、滤器一套、蒸馏器、高压灭菌锅、磁力搅拌器。材料:3000ml锥形瓶、250ml或500ml培养瓶、翻冒塞、饭盒、pH试纸、孔径0.22μm的微孔滤膜。试剂:盐酸、无离子水、小牛血清、合成培养基(RPMI1640)、青霉素、链霉素、NaHCO3。

细胞培养基的配制的小窍门(五)

五、 注意事项1、 培养细胞使用的瓶子和饭盒应与提取RNA和培养细菌的瓶子和饭盒严格分开。因为用于处理提取RNA的DEPC水(0.1%焦炭酸二乙酯)是一种致癌物,可能影响细胞生长;而培养过细菌的用品也不应与细胞混用。2、 过滤时压力不可过大,否则细菌易滤过达不到除菌效果,或使滤膜破裂。分装时需根据使

细胞培养基的配制的小窍门(二)

二、 实验原理组 织培养使用的培养基一般是由合成培养基和小牛血清配制而成。合成培养基有商品出售,它是根据细胞生长的需要按一定配方制成的粉状物质。其主要成分是氨基 酸、维生素、碳水化合物、无机离子和其他辅助物质。它的酸碱度和渗透压与活体内细胞外液相似。小牛血清含有一定的营养成分,更重要的是它含

细胞培养基的配制的小窍门(一)

一、 实验目的熟练掌握培养基(RPMI1640和DMEM)的配制,了解其他培养基配制方法。

细胞培养基的配制的小窍门(四)

四、 实验步骤(一) 准备和安装滤器在超净工作台内打开包有清洗灭菌好的过滤器的牛皮纸,并架好。胶管一段接入滤泵再插入待除菌的液体中,出口端胶管伸入到已消毒的瓶子中。用滤泵做正压过滤,压力数字为2。过滤后检查滤膜是否完好无损。(二) 合成培养基的配制1、 取3000ml三蒸水,加入合成培养基干粉,用磁

移液器的消毒与灭菌

消毒与灭菌消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达到无害化水平,而灭菌则要求消灭所有活菌。因此,灭菌的处理要求高于消毒:1.化学消毒简单说来,就是用酒精等擦拭移液器外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都应该是可以做到的,否则其外壳材质较差!2.紫外线消毒用紫外线照射移液器的表面,通过

实用哺乳动物细胞培养手册(一)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清

配制pH计保护液

配制pH计保护液——3mol/L的KCl溶液: 1.计算称量:用分析天平称量KCl 223.5g(KCl摩尔质量74.5g/mol,则KCl质量=3mol×74.5g/mol=223.5g)。 2.溶解:在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解,并用玻璃棒搅拌,把溶解好的溶液移入

配制pH计保护液

配制pH计保护液——3mol/L的KCl溶液:  1.计算称量:用分析天平称量KCl 223.5g(KCl摩尔质量74.5g/mol,则KCl质量=3mol×74.5g/mol=223.5g)。 2.溶解:在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解,并用玻璃棒搅拌,把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,

常用缓冲液配制

实验概要常用缓冲液配制实验步骤一.电泳缓冲液      A: 测序凝胶加样缓冲液:      98%去离子甲酰      10mol/L EDTA(pH8.0)      0.025%二甲苯青FF      0.025%溴酚蓝        B: 甲酰胺:许多批号的试剂级甲酰胺,其纯度符合使用要求,

PH计标准液配制

PH计使用前用标准液校正是利用两点法确定直线方程的原理.  标准溶液有三种  l .pH标准溶液甲(pH=4.00825)  称取先在110~130干燥2~3h的邻苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4)10.12g溶于水并在容量瓶中稀释至1L  2. pH标准溶液乙(pH=6.86525)  分别称取先在

PH计标准液配制

pH4.01标准缓冲液配制:称取在110℃~130℃下干燥2小时的邻苯二甲酸氢钾10.12g,溶于去离子水,25℃恒温下在1000mL容量瓶中定容至刻度线。pH9.18标准缓冲液配制:称取与饱和溴化钠共同放置在干燥器中平衡两昼夜的硼砂3.80g,溶于去离子水,25℃恒温下在1000mL容量瓶中定容至

常用缓冲液配制

Buffer Formula (required precision; 2 %)Always to try to prepare buffer solution at the temperature and concentration before planing to use during the

细胞裂解液怎么配制

裂解细胞的话:新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液:先配150 mM NaCL+ 1% NP-40 (去垢剂) + 0.1% SDS (去垢剂)+2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)+2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)或1 mM PMSF

血清稀释液配制

猪的液态精液保存稀释液有许多种。一般采用商品化稀释剂,商品化稀释剂质量稳定、效果确切、使用方便。稀释精液所用的稀释粉最好提前1小时溶解,这样酸碱度稳定,对精子的影响也较小。精液稀释粉也可提前1天溶解,放置于冰箱中4℃保存过夜备用。所用溶解稀释粉的水最好采用双蒸水。商品稀释液“Modena”的效果比较

动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测

实验方法原理 动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足操作对象在离体条件下正常生存和生长发育,就必须为其提供适宜生长发育的良好营养条件,即培养液条件。动物的组织、细胞或配子、胚