细胞培养用液的配制与消毒
一、器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶,青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤:(1)水的制备:细胞培养用水必须非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水.(2)PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1.溶解定容:将药品(NaCl 8.0g,KCl 0.2g,Na2HPO4·H2O 1.56g,KH2PO4 0. 2g )倒入盛有双蒸水的烧杯中,玻璃棒搅动,充分溶解,然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml,摇匀即成新配制的PBS溶液。2.移入溶液瓶内待消毒:将PBS倒入溶液瓶(大的吊针瓶)内,盖上胶帽,并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。(3) 胰蛋白酶溶液的配制与消毒:胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。......阅读全文
移液器的消毒与灭菌
消毒与灭菌消毒只要求使移液器上的活菌控制在一定范围内,达到无害化水平,而灭菌则要求消灭所有活菌。因此,灭菌的处理要求高于消毒:1.化学消毒简单说来,就是用酒精等擦拭移液器外表面,然后晾干即可。这对于所有移液器品牌而言都应该是可以做到的,否则其外壳材质较差!2.紫外线消毒用紫外线照射移液器的表面,通过
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测
实验方法原理 动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足操作对象在离体条件下正常生存和生长发育,就必须为其提供适宜生长发育的良好营养条件,即培养液条件。动物的组织、细胞或配子、胚
实验室洗瓶机洗涤液的配制与使用
(1)洗涤液的配制洗涤液分浓溶液与稀溶液两种,配方如下:浓溶液 重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g,自来水 150ml,浓硫酸(工业用) 800ml稀溶液 重铬酸钠或重铬酸钾(工业用) 50g,自来水 850ml,浓硫酸(工业用) 100ml配法都是将重铬酸钠或重铬酸钾先溶解于自来水中,可慢慢加温
沉淀滴定法滴定液的配制与标定注意事项
1.用 铬酸钾 指示剂法,必须在近中性或弱碱性溶液(pH6.5~10.5)中进行滴定。因 铬酸钾是弱酸盐,在酸性溶液中,CrO42-与H+结合,降低CrO42-浓度,在 等当点时不能立即生成 铬酸银沉淀;此法也不能在碱性溶液中进行,因银离子 氢氧根离子生成 氧化银沉淀。 2.应防止氨的存在,氨
常见实验用溶液的配制方法(二)
Tris缓冲液(Tris-HCl buffer) 将121g的Tris碱溶解于约0.9L水中,再根据所要求的pH(25℃下)加一定量的浓盐酸(11.6N),用水调整终体积至1L。 浓盐酸的体积(ml)
常见实验用溶液的配制方法(一)
一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10m
合成培养基配制实验——合成培养液的配制
合成培养基是根据研究和了解细胞所需成分基础上配制而成的。目的在于创制出与体内相似的生存环境。合成培养基有固定的组成成分,利于控制实验条件标准化。内容来源:组织培养和分子细胞学技术。(北京出版社)实验方法原理干粉型培养基是用球磨机或喷雾法将各种培养液成分混合后制成,具有性质稳定、便于贮存和运输、使用方
硫酸铈铵滴定液的配制
①配制先将溶液溶解完全后加硫酸防水解。②因属于强氧化剂,用三氧化二砷标定,加氯化碘作催化剂,指示剂邻二氮菲中因含有少量铁也消耗滴定液使结果不准确,应注意加量,近终点加热是为了加速反应。
硝酸银滴定液的配制
①宜避光配制,注意保护不要使皮肤或衣服上被污染,因为除掉较难。②标定系吸附指示剂,所以应保护生成氯化银呈胶体状肪,应在氯化钠溶解后再加糊精。③宜在中性或弱碱性中进行,加碳酸钙以利于形成荧光黄阴离子指示终点。④滴定中也应避光,特别是强光照射。
电泳缓冲液的配制
Tris-乙酸(TAE):50×浓贮存液(每升):242g Tris 碱5 7.1ml 冰乙酸100ml 0.5mmol/L EDTA(pH8.0)使用时再稀释50倍。
硫酸亚铁滴定液的配制
①硫酸亚铁在空气中风化、氧化现象,配制应注意量的取用。②本溶水溶液不稳定,但在酸性条件下稳定,所以加硫酸:水40:20混合液保持稳定。
pbs缓冲液的配制方法
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷
PH电极浸泡液的配制方法
一、短期保存:PH电极浸泡液配制方法:PH4.00缓冲剂一包,溶于250ML纯水中,再加56g分析纯KCL,适当加热,搅拌至完全溶解即成。二、长期保存:PH电极长期不使用时,要将PH电极浸泡在特殊配制的保护液中保存,并定期更换新的保护液,zui长不能超过6个月(配制方法: PH4.00缓冲剂一包,溶
pbs缓冲液的配制配方
pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液,然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液(PhosphateBuffer Saline),是生物学实验室最常用的缓冲液之一。其主要成分包括:氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)和磷酸二氢钾(KH
常用染色液和试剂的配制
一、埃利希(Ehrlich)氏苏木精染液 先将苏木精2g溶于100mL乙醇中,再加冰醋酸10mL,混合后加蒸馏水100mL和100mL甘油,然后加硫酸铝钾(约10g)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。
检验淀粉的碘液配制方法
原碘液、稀碘液、纯化水 原碘液:称取分析纯结晶碘11g,分析纯碘化钾22g,先用少量纯化水使碘完全溶解后,再加纯化水定容至500mL贮于棕色瓶内. 稀碘液:取原碘液2mL,加碘化钾20g,加纯化水溶解定容至500mL,贮于棕色瓶内. 纯化水即蒸馏水之类的纯水
pbs缓冲液的配制方法
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。PBS:Phosphate Buffered SalinePBS 1L配方pH7.4:磷
Bouin氏固定液的配制方法
Bouin氏固定液 苦味酸饱和水溶液 75ml 福尔马林(40%甲醛) 25ml 冰醋酸 5ml 1g苦味酸可制成75ml饱和水溶液。 先将苦味酸溶解成水溶液,然后再加入福尔马林和冰醋酸摇匀即成。
硼酸缓冲液(BBS)的配制
0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS)硼酸钠(Na2B4O7.10H2O) 0.46g硼酸(H2BO3) 0.51g加蒸馏水至100ml 溶解。
革兰氏(Gram)染色液的配制方法
革兰氏(Gram)染色液 1.草酸铵结晶紫染液 A液:结晶紫(crystal violet) 2g 95%酒精 20ml B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g 蒸馏水 80ml 混合A、B二液,静置48小时后使用。 2.卢戈氏(Lugol)碘液 碘片 1.0g
ncm460细胞细胞培养的基本技术(二)消毒
、消毒1. 包装 器材经清洗烤干或晾干后,先应严格包装,然后再行消毒灭菌处理,以防止消毒灭菌后再次遭受污染。包装材料常用包装纸、牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、玻璃或金属制吸管筒、纸绳等。2. 消毒 消毒灭菌随物品的不同,而采用不同的方法。(1)紫外线:主要用于消毒实验室空气、工作台面和一些不能使用其
次氯酸消毒液怎么用
次氯酸消毒液,批准文号:苏卫消证字(2018)第32010013号,是医疗器械招商企业南京竹海生物科技有限公司招商产品,次氯酸消毒液详情可进入》》 【适用范围】 次氯酸消毒液适用于硬质物体表面、食(饮)具、食品加工工具和设备、果蔬、织物和其他多孔物体表面、空气等消毒。 【使用方法】 1、硬
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测实验
动物细胞与胚胎工程实验常用培养液配制与检测,可用于(1)动物细胞的培养(2)胚胎工程的发展(3)分子生物学的研究。溶液配制法实验方法原理动物细胞工程的主要操作对象是离体条件下动物有机体的各部分组织、器官或细胞,这些用来进行离体培养的组织或器官称为外植体;动物胚胎工程的主要操作对象是配子和胚胎。要满足
实用哺乳动物细胞培养手册(下)
细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒 清洗 在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清
硼砂缓冲液怎么配制
如果是用于缓冲体系,硼砂——氢氧化钠如果是校正ph计标准溶液,就是硼砂一个组分以硼酸1g溶于100ml精制水中制成用naoh液粗调ph到10-11就可以了
常用缓冲液配制-2
PHEM (500 mls) 2x 18.14 g Pipes 6.5 g Hepes 3.8 g EGTA 0.99 g MgSO4 pH 7.0 w/ KOHPBS (5x in 500 mls) 20.45 g NaCl 0.465 g KCl 10.142 g Na2HPO4*7 H2O 0
Hepes缓冲液配制方法
化学名:2-[4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinyl] ethanesulfonic acid中文名:羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式:C8H18N2O4S分子量:238.3HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH 7.2 - 7.4 范围内具有较好的缓冲能力。其最大优点是在
硼酸溶液(吸收液)配制步骤
1)取洁净干燥的2L大烧杯 2)称取40g硼酸转移至大烧杯中 3)量取1960ml蒸馏水加入大烧杯中,溶解硼酸 4)使用玻璃棒将溶液搅拌均匀至硼酸完全溶解 5)使用20ml移液管移取20ml溴甲酚绿 - 甲基红指示剂加入已配制好的硼酸中 6)玻璃棒搅拌混匀溶液,转移至对应溶液桶
醋酸缓冲液怎么配制
醋酸盐缓冲液(pH3.5)取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5(电位滴定法),用水稀释至100ml,即得。当往某些溶液中加入一定量的酸和碱,或加少量水稀释时,溶液有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这
消毒与灭菌实验的原理
灭菌是指杀灭物体中所有微生物的繁殖体和芽孢的过程。消毒是指用物理、化学或生物的方法杀死病原微生物的过程。 灭菌的原理就是使蛋白质和核酸等生物大分子发生变性,从而达到灭菌的作用,实验室中最常用的就是干热灭菌和湿热灭菌。 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内的