HER2显色原位杂交法

一、预处理1. 脱蜡至水(1)二甲苯5分钟,2次(2)100%酒精1分钟,2次(3)95%酒精1分钟,1次(4)85%酒精1分钟,1次(5)双蒸水1分钟,3次2. 加热预处理(1)热预处理液(试剂盒内带)加热至98-100℃时,放入切片,15-20分钟。(2)双蒸水洗1分钟,3次3. 胃蛋白酶消化(1)将胃蛋白酶先放入37℃温箱预热,然后滴加至组织上。(2)室温,5-30分钟(其间用显微镜观察,如果出现细胞核向外突出,有荷包蛋样改变即可停止,此步较为关键,消化不足和消化过了,都会导致假阴性或只有少量阳性)(3)双蒸水1分钟,3次4. 酒精脱水(1)85%酒精1分钟,2次(2)95%酒精1分钟,1次(3)100%酒精1分钟,1次(4)室温或37℃温箱干燥5分钟二、变性和杂交1. 滴加探针:在组织中央滴加探针(约法10-15 μl),将盖玻片轻轻的盖在组织上,避免产生气泡。2. 将玻片放在原位杂交仪或原位PCR仪上,如没有......阅读全文

HER2显色原位杂交法

一、预处理1. 脱蜡至水(1)二甲苯5分钟,2次(2)100%酒精1分钟,2次(3)95%酒精1分钟,1次(4)85%酒精1分钟,1次(5)双蒸水1分钟,3次2. 加热预处理(1)热预处理液(试剂盒内带)加热至98-100℃时,放入切片,15-20分钟。(2)双蒸水洗1分钟,3次3. 胃蛋白酶消化(

HER2基因检测法的意义

  实验室人员可通过HER2基因检测法,在少量乳腺癌标本中,计算第17号染色体上HER2基因的拷贝数。通过化学染色,标本中的HER2基因和第17号染色体拷贝的颜色发生改变。HER2基因的拷贝呈现黑色,第17号染色体拷贝呈现红色。在标准显微镜下可观察到这些颜色变化。  这些特征能使检验人员在同一片子上

HER2基因检测法的简介

  可检测肿瘤组织中HER2基因的拷贝数。  HER2基因拷贝数不多于正常的病人,通常不适合接受赫赛汀治疗。确定病人是HER2阳性,对医师是一个有用的工具,医师可考虑用赫赛汀治疗这些乳腺癌病人。

病理学中的显色原位杂交和-FISH-实验

荧光原位杂交(FISH) 技术能够快速检测各种组织,包括新鲜和存档标本中的染色体异常。这些技术已经为临床细胞遗传学和研究机构所广泛接受。然而,这些方法却并非常用于非细胞遗传学诊断的病理学服务,部分是因为 FISH 图像设备不能普遍地为负责组织学诊断的诊断医生(外科病理学家)所用。因此,各种原位杂交探

病理学中的显色原位杂交和-FISH-实验

试剂、试剂盒 Tris-EDTA 溶液PBSDigest-All 3福尔马林磷酸缓冲液二甲苯乙醇生物素和地高辛标记的DNA探针CAS-block (Zymed Laboratories)链霉亲和素仪器、耗材 石蜡切片烤箱微波炉染色缸热循环仪潮湿烤箱实验步骤 一、杂交前玻片处理1.于 60°C 烤箱中

病理学中的显色原位杂交和-FISH-实验

            试剂、试剂盒 Tris-EDTA 溶液 PBS Digest-All 3 福尔马林磷酸缓冲液 二甲苯 乙醇 生物素和地高辛标

薄层色谱法显色方法介绍

显色方法1 、光学检出法a自然光(400~800nm)b紫外光(254nm或365nm)c荧光一些化合物吸收了较短波长的光,在瞬间发射出比照射光波长更长的光,而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点(灵敏度高、专属性高)2  、蒸汽显色法多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点,这种反应有可逆

罗氏新款双原位杂交伴随诊断试剂盒-致力个性化医疗

  罗氏(Roche)近日宣布推出新的VENTANA HER2 Dual ISH DNA Probe Cocktail assay(VENTANA HER2双原位杂交DNA探针鸡尾酒检测法),用于检测乳腺癌和胃癌中的HER2生物标志物。HER2(人表皮生长因子受体2)是乳腺癌和胃癌的重要生物标志物,

薄层色谱法主要的显色方法

1、加热显色;2、碘蒸气熏显色;3、喷显色剂(如香草醛浓硫酸)

薄层色谱法的显色方法介绍

  A 光学检出法  a自然光(400~800nm)  b紫外光(254nm或365nm)  c荧光一些化合物吸收了较短波长的光,在瞬间发射出比照射光波长更长的光,而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点(灵敏度高、专属性高)  B 蒸汽显色法  多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点,这种

tunel法荧光和显色法原理的区别

TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;3.PBS漂洗2次;4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6

tunel法荧光和显色法原理的区别

TUNEL法检测细胞凋亡操作步骤操作步骤1.用二甲苯浸洗2次,每次5min;2.用梯度乙醇(100、95、90、80、70%)各浸洗1次,每次3min;3.PBS漂洗2次;4.用Proteinase K工作液处理组织15-30 min 在21–37°C或者加细胞通透液8min;5.PBS漂洗2次;6

关于薄层色谱法的显色方法介绍

  A、光学检出法  a自然光(400~800nm)  b紫外光(254nm或365nm)  c荧光一些化合物吸收了较短波长的光,在瞬间发射出比照射光波长更长的光,而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点(灵敏度高、专属性高)  B、蒸汽显色法  多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点,这种

薄层色谱法显色方法有哪几种?

显色1 、光学检出法a自然光(400~800nm)b紫外光(254nm或365nm)c荧光一些化合物吸收了较短波长的光,在瞬间发射出比照射光波长更长的光,而在纸或薄层上显出不同颜色的荧光斑点(灵敏度高、专属性高)2  、蒸汽显色法多数有机化合物吸附碘蒸气后显示不同程度的黄褐色斑点,这种反应有可逆及不

TLC显色

显色展开后的薄层,可直接检视或显色后检视。显色方式有喷雾显色、浸渍显色和蒸气显色。喷雾显色是将显色剂用喷雾的方法均匀撒于薄层板上,操作时要尽可能控制液滴细微,同时使板各部位的喷雾密度尽可能一致。显色剂的量要适当,太多则烘干时间延长,使斑点显色时间延长,多余显色剂流向板下方,容易产生斑点变形;太少则斑

荧光原位杂交法检查Down综合征

  以21号染色体的相应部位序列作探针,与外周血中的淋巴细胞或羊水细胞进行杂交,唐氏综合征患者的细胞中可呈现3个21号染色体的荧光信号。若选择唐氏综合征核心区的特异序列作为探针,进行FISH杂交分析,可以对21号染色体的异常部位进行精确定位,提高检测21号染色体数目和结构异常的精确性。

用于检测植物组织RNA的原位杂交法

用于检测植物组织RNA的原位杂交法(一)组织切片制备l      植物组织的甲醛固定和包埋1.将植物组织切成小块,立即放入一个装有10~50ml固定剂溶液的烧杯中,把烧杯放到真空脱水机内。调节真空度以形成一个温和的真空,然后慢慢恢复常压。微量便于固定剂渗入组织,必须反复真空和非真空状态。待固定剂充分

蛋白质印迹法的显色的方法介绍

Western Blot显色的方法主要有以下几种:i. 放射自显影ii. 底物化学发光ECLiii. 底物荧光ECFiv. 底物DAB呈色现常用的有底物化学发光ECL和底物DAB呈色,体同水平和实验条件的是用第一种方法,发表文章通常是用底物化学发光ECL。只要买现成的试剂盒就行,操作也比较简单,原理

wb免疫印迹法的主要显色方法有哪些

  Western免疫印迹(WesternBlot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。  western显色的方法主要有以下几种:  i.放射自显影  ii.底物化学发光ECL  iii.底物荧光E

HER2靶向药物联合化疗治疗HER2阳性涎腺导管癌病例...1

HER2靶向药物联合化疗治疗HER2阳性涎腺导管癌病例分析涎腺导管癌(SDC)是一种罕见的涎腺恶性肿瘤,占所有涎腺肿瘤的10%,它的组织学特征与乳腺导管癌高度相似。由于SDC的罕见性,其临床病理学特征的数据很少。SDC的标准治疗方法是手术联合放疗,但预后较差。人生长因子受体2(HER2)阳性表达的S

HER2靶向药物联合化疗治疗HER2阳性涎腺导管癌病例...2

2018-11-11患者因“左颌下腺癌术后2年余,多线抗肿瘤治疗后,咳嗽、憋喘2周”第2次入我院。入院查体无明显阳性体征。2018-11-13胸部CT示双肺多发转移瘤,较之前明显增大(图3)。头颈部CT、ECT,腹部CT、ECT,颅脑MRI无异常。查血:癌胚抗原(CEA)结果为212.17ng/mL

原位杂交与荧光原位杂交

 一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛

原位杂交与荧光原位杂交

 一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛

原位杂交与荧光原位杂交

一、原位杂交( In Situ Hybridization,ISH) 是用标记的核酸探针,使用非放射检测系统或放射自显影系统,在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法,具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一,广泛应

为什么分光光度法要进行显色反应

分光光度计分几种,有可见光、原子吸收、红外、紫外、荧光等,你所指为可见光的。可见光分光光度法的特点就是能【对有色溶液的色泽深度进行对比】,从而测定待测物的含量,理论基础是“朗伯-比尔定律”。这样做其实就是把过去只靠眼睛进行的“比色”进行精度提升。

荧光原位杂交的荧光原位杂交

荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。探针首先与某种介导分子(reporter molecule)结

原位杂交仪—原位杂交实验(二)

  原位杂交第二天  1.  1)将探针回收,放于-20C保存(通常探针可重复使用十次左右)。  2)加入50%甲酰胺/2XSSCT溶液1毫升,60℃,放置30分钟,重复一次。  3)置换2XSSCT1ml,60℃,放置15分钟。  4)置换0.2XSSCT1ml,60℃,放置30分钟,重复一次。 

原位杂交仪原位杂交的意义

  原位杂交:在研究DNA分子复制原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 双键分子的特点,应用带有标记的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、荧光素生物素、地高辛等非放射性物质)DNA或R

原位杂交仪—原位杂交实验(三)

  原位杂交第三天  1) 用1ml含10%热灭活血清的MABT溶液置换抗体溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlMABT置换,25分钟,再用1mlMABT溶液置换,一小时以上,最后用1mlMABT溶液置换,25分钟。  2) 用1ml 1mM左旋米睉的Staining buffer洗三次,每次放置

原位杂交仪—原位杂交试验(一)

  收集斑马鱼的胚胎,在Holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%多聚甲醛固定,在4℃保存,二十四小时后用50%甲醇2%多聚甲醛溶液洗,然后换成甲醇,在-20C 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用双氧水处理,去除色素。或者使用苯锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成)