胶原酶解离组织

实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育,组织分解后,通过离心去除胶原酶,高浓度接种、培养。 实验材料 胶原酶 DBSS 仪器、耗材 培养基 移液器 皮氏平皿 培养瓶 离心管 手术刀 离心机 实验步骤 1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中,淸洗。2. 转入另一培养皿(9 cm 皮氏......阅读全文

Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别

Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶在来源和底物特异性方面存在差异。1. 来源:Ⅰ型胶原酶来源于动物成纤维细胞,而Ⅱ型胶原酶来源于哺乳动物胚胎组织。2. 底物特异性:Ⅰ型胶原酶可以降解所有的Ⅰ型胶原,并且对其他的蛋白质没有降解作用。然而,Ⅱ型胶原酶可以特异性的降解Ⅱ型胶原,并且只能微弱的降解Ⅰ型胶原。总结来说,Ⅰ

Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别

Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶在来源和底物特异性方面存在差异。1. 来源:Ⅰ型胶原酶来源于动物成纤维细胞,而Ⅱ型胶原酶来源于哺乳动物胚胎组织。2. 底物特异性:Ⅰ型胶原酶可以降解所有的Ⅰ型胶原,并且对其他的蛋白质没有降解作用。然而,Ⅱ型胶原酶可以特异性的降解Ⅱ型胶原,并且只能微弱的降解Ⅰ型胶原。总结来说,Ⅰ

Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别

Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶在来源和底物特异性方面存在差异。1. 来源:Ⅰ型胶原酶来源于动物成纤维细胞,而Ⅱ型胶原酶来源于哺乳动物胚胎组织。2. 底物特异性:Ⅰ型胶原酶可以降解所有的Ⅰ型胶原,并且对其他的蛋白质没有降解作用。然而,Ⅱ型胶原酶可以特异性的降解Ⅱ型胶原,并且只能微弱的降解Ⅰ型胶原。总结来说,Ⅰ

胶原酶的分类

胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。

胶原酶解离组织

实验方法原理切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育,组织分解后,通过离心去除胶原酶,高浓度接种、培养。实验材料胶原酶DBSS仪器、耗材培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中,淸洗。2. 转入另一培养皿(9 cm 皮氏平皿,非组织培养级別),

胶原酶的使用

1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块2.将组织块放入离心管(三角烧瓶)中加入30~50倍体积的胶原酶溶液,旋紧盖子(密封烧瓶)。3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内,每隔3min振摇一次,如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别很有关系,对于某些肿瘤组织或其他较

胶原酶的使用

1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块2.将组织块放入离心管(三角烧瓶)中加入30~50倍体积的胶原酶溶液,旋紧盖子(密封烧瓶)。3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内,每隔3min振摇一次,如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别有关,对于某些肿瘤组织或其他较致密

胶原酶解离组织

            实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育,组织分解后,通过离心去除胶原酶,高浓度接种、培养。 实验材料 胶原酶 DBSS

胶原酶的简介

  胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶,如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶,它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发

胶原酶的制备方法

胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。 胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组

胶原酶解离组织实验

实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育,组织分解后,通过离心去除胶原酶,高浓度接种、培养。实验材料 胶原酶DBSS仪器、耗材 培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤 1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中,淸洗2. 转入另一培养皿(9 cm 皮氏平皿,非组织培养级

胶原酶的基本信息

胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。

胶原酶的使用方法

1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块2.将组织块放入离心管(三角烧瓶)中加入30~50倍体积的胶原酶溶液,旋紧盖子(密封烧瓶)。3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内,每隔3min振摇一次,如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别有关,对于某些肿瘤组织或其他较致密

什么是胶原酶消化法

就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的,所用胶原酶有不同类型:1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分

什么是胶原酶消化法

就是用胶原酶处理消化组织达到分离细胞的目的,所用胶原酶有不同类型:1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细胞,用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3、胶原酶Ⅴ包含至少7种蛋白酶成分

人体内源性胶原酶和药用胶原酶的功能对比

人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶,如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶,它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发酵液中提取、纯化并精制而得的白色或类白色无菌冻干粉针生物制剂。

胶原酶的基本内容介绍

  胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。

胶原酶的作用和化学本质

胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。

胶原酶的类型及消化类型

胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞专用胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。1、胶原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和肾上腺组织细胞的分离。用于消化组织中连接部分使其成为单个细 胞,用于哺乳动细胞的分离。2、胶原酶Ⅳ包含至少7种蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织。3

胶原酶消化用什么浓度edta终止

胶原酶消化用血清或者含血清的培养基终止。胶原酶一般浓度在百分之0.2左右,使用它来消化细胞时,注意它能显著影响pH值,而且在弱碱性条件下才易溶,而且不能被终和。终止是用血清蛋白,血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂。保存于负20度。

小鼠心脏成纤维细胞胶原酶浓度

1mg/ml。小鼠心肌成纤维细胞的组织来源于实验动物的正常心脏组织,分离时采用二型胶原酶分离,浓度为1mg/ml(用无钙台氏液配制),同时酶液里加入牛磺酸,BSA。胶原酶能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。

关于胶原酶的使用情况介绍

  1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块  2.将组织块放入离心管(三角烧瓶)中加入30~50倍体积的胶原酶溶液,旋紧盖子(密封烧瓶)。  3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内,每隔3min振摇一次,如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。  消化时间与组织的类别有关,对于某些肿瘤

组织的分离实验_胶原酶消化分离法

实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶,对胶原有很强的消化作用,适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性,但胶原酶对细胞间质有好的消化作用,可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害,效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性,故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验

胶原酶消化法—培养脐带间充质干细胞

人脐带间充质干细胞具有高度分化潜能,基因稳定、不易突变,不会引起肿瘤;无需配型、无排异,广泛应用于疾病治疗及抗衰老研究。目前,在美容行业及针对亚健康群体的应用,也越来越引人注目。脐带间充质干细胞脐带是由包膜、华通氏胶、脐静脉、脐动脉脐构成。脐带间充质干细胞存在于华通氏胶中。由于存在数量少,用胶原酶消

改良胶原酶化学溶解术治疗巨大椎间盘脱垂

1.病例资料 病人,男,54岁,2015年11月就诊。主诉“腰部及右下肢疼痛15年余,加重10天”,病人15年前无明显诱因痛出现腰痛伴右下肢疼痛,疼痛由臀部向大腿、小腿至足跟呈放射样酸胀痛,平卧休息后缓解。近10天病人疼痛明显加剧,持续性发作,休息后不缓解,无大小便失禁,无会阴区感觉变化。 查体:V

胶原酶和胰酶在细胞原代培养中的区别

  酶的浓度 胰蛋白酶一般采用的浓度为 0.1%-0.25%(活力 1:200 或 1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长。浓度高对细胞有毒性,而较低浓度的胰蛋白酶在培养液中可促进细胞的增殖,若培养液中加入血清,其少量胰蛋白酶可被血清中抗胰蛋白酶因子所清除。  温度 一

胶原酶和胰酶在细胞原代培养中的区别

  酶的浓度 胰蛋白酶一般采用的浓度为 0.1%-0.25%(活力 1:200 或 1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长。浓度高对细胞有毒性,而较低浓度的胰蛋白酶在培养液中可促进细胞的增殖,若培养液中加入血清,其少量胰蛋白酶可被血清中抗胰蛋白酶因子所清除。  温度 一

胶原酶和胰酶在细胞原代培养中的区别

  酶的浓度 胰蛋白酶一般采用的浓度为 0.1%-0.25%(活力 1:200 或 1:250),但遇到难消化的组织时,浓度可适当提高,消化时间适当延长。浓度高对细胞有毒性,而较低浓度的胰蛋白酶在培养液中可促进细胞的增殖,若培养液中加入血清,其少量胰蛋白酶可被血清中抗胰蛋白酶因子所清除。  温度 一

人胶原酶II(Collagenase-II)ELISA试剂盒使用说明

使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本胶原酶II(Collagenase II)含量。试验原理:Collagenase II试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知Collagenase II浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将Collagena

胶原酶和胰酶在细胞原代培养中的区别

胶原酶在上皮类细胞原代培养时经常使用,作用对象是胶原组织,因此不容易对细胞产生损伤。消化原代培养的上皮类细胞用此酶效果更好。胰蛋白酶(简称胰酶)是广泛应用的消化剂.胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质水介而使细胞分散开,在常用的蛋白酶