胶原酶解离组织实验
实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育，组织分解后，通过离心去除胶原酶，高浓度接种、培养。实验材料 胶原酶DBSS仪器、耗材 培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤 1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中，淸洗2. 转入另一培养皿（9 cm 皮氏平皿，非组织培养级別），切除多余组织，如脂肪或坏死组织。3. 将组织转移至第三个平皿中，用交叉的手术刀细切成大约 1 mm3 大小。4. 用 10~20 ml 广口移液管将组织移入 15 ml 或 25 ml 无菌离心管或常用的容器， 中（先用 DBSS 湿润移液管，否则组织块易贴壁）。5. 让组织块沉降。6. 用 DBSS 重悬清洗组织，组织块沉降后，去除上清液，重复此步骤两次以上。7. 将 20~30 个组织块接种于一个 25 cm2 的培养瓶中，另一瓶中接种 100~200 块。8. 吸净 DBSS，每瓶中加入 4.5 ml ......阅读全文
胶原酶解离组织实验
实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育，组织分解后，通过离心去除胶原酶，高浓度接种、培养。实验材料 胶原酶DBSS仪器、耗材 培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤 1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中，淸洗2. 转入另一培养皿（9 cm 皮氏平皿，非组织培养级
胶原酶解离组织
实验方法原理切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育，组织分解后，通过离心去除胶原酶，高浓度接种、培养。实验材料胶原酶DBSS仪器、耗材培养基移液器皮氏平皿培养瓶离心管手术刀离心机实验步骤1. 将组织移人新鲜、无菌的 DBSS 中，淸洗。2. 转入另一培养皿（9 cm 皮氏平皿，非组织培养级別），
胶原酶解离组织
实验方法原理 切碎的组织放于含有胶原酶的完全培养基中孵育，组织分解后，通过离心去除胶原酶，高浓度接种、培养。 实验材料 胶原酶 DBSS
组织的分离实验_胶原酶消化分离法
实验方法原理胶原酶是一种由细菌中提取出的酶，对胶原有很强的消化作用，适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织等。上皮细胞本身对胶原酶有一定耐性，但胶原酶对细胞间质有好的消化作用，可使上皮细胞与胶原成分脱离而不受伤害，效果甚好。此酶在钙和镁离子存在情况下仍有活性，故可用BSS和含有血清的培养液配制。实验
温胰蛋白酶解离组织
实验方法原理 组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时，每隔半小时收集已分离的细胞，离心后加入含血清的培养基。 实验材料 组织 DBSS
温胰蛋白酶解离组织
实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时，每隔半小时收集已分离的细胞，离心后加入含血清的培养基。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶D-PBSA试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶离心管瓶子磁力搅拌机镊子移液管血球计数仪实验步骤1. 将组织（1~5 g）移入加有新配制的无菌 DBSS （5
冷胰蛋白酶解离组织
实验方法原理 剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。 实验材料 组织 DBSS
冷胰蛋白酶解离组织
经验交流（0）实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织 DBSS
温胰蛋白酶解离组织
方案12.5 温胰蛋白酶解离组织实验方法原理组织切碎后于胰蛋白酶中搅拌数小时，每隔半小时收集已分离的细胞，离心后加入含血清的培养基。实验材料组织 DBSS
冷胰蛋白酶解离组织
实验方法原理 剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料 组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒 生长培养基皮氏平皿仪器、耗材 培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤 1. 将组织（1~5 g，预先称重）移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮
冷胰蛋白酶解离组织
实验方法原理剪碎的组织放在胰蛋白酶中于4°C 放置16~18h ，去除胰蛋白酶后温育并于温培养基中分散细胞。实验材料组织DBSS粗制胰蛋白酶试剂、试剂盒生长培养基皮氏平皿仪器、耗材培养瓶镊子移液管锥形瓶剪刀冰浴实验步骤1. 将组织（1~5 g，预先称重）移入加有新配制的无菌 DBSS 的皮氏培养皿中
醋酸解离度和解离常数的测定实验原理
实验原理：HAc为一元弱酸，在水溶液中存在如下解离平衡。HAc＝H+＋Ac- Ka。起始浓度（molL-1) c 0 0。平衡浓度（mol?L-1) c–cαcαcα。Ka表示HAc的解离常数，α为解离度，c为起始浓度。
如何选择适合特定组织或细胞类型的解离酶？
选择适合特定组织或细胞类型的解离酶可以考虑以下几个方面：了解组织和细胞特性研究目标组织或细胞类型的细胞间连接方式、细胞外基质成分。例如，某些组织富含胶原蛋白，可能需要胶原酶进行解离；上皮组织可能需要蛋白酶来分离细胞。参考前人研究查阅已有的相关文献，了解类似组织或细胞类型在解离时常用的酶及其组合。供应
Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别
Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶在来源和底物特异性方面存在差异。1. 来源：Ⅰ型胶原酶来源于动物成纤维细胞，而Ⅱ型胶原酶来源于哺乳动物胚胎组织。2. 底物特异性：Ⅰ型胶原酶可以降解所有的Ⅰ型胶原，并且对其他的蛋白质没有降解作用。然而，Ⅱ型胶原酶可以特异性的降解Ⅱ型胶原，并且只能微弱的降解Ⅰ型胶原。总结来说，Ⅰ
Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别
Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶在来源和底物特异性方面存在差异。1. 来源：Ⅰ型胶原酶来源于动物成纤维细胞，而Ⅱ型胶原酶来源于哺乳动物胚胎组织。2. 底物特异性：Ⅰ型胶原酶可以降解所有的Ⅰ型胶原，并且对其他的蛋白质没有降解作用。然而，Ⅱ型胶原酶可以特异性的降解Ⅱ型胶原，并且只能微弱的降解Ⅰ型胶原。总结来说，Ⅰ
Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶有什么区别
Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶在来源和底物特异性方面存在差异。1. 来源：Ⅰ型胶原酶来源于动物成纤维细胞，而Ⅱ型胶原酶来源于哺乳动物胚胎组织。2. 底物特异性：Ⅰ型胶原酶可以降解所有的Ⅰ型胶原，并且对其他的蛋白质没有降解作用。然而，Ⅱ型胶原酶可以特异性的降解Ⅱ型胶原，并且只能微弱的降解Ⅰ型胶原。总结来说，Ⅰ
胶原酶的简介
胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶，如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶，它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发
胶原酶的制备方法
胶原酶（collagenase）是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的，主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬，内含较多结缔组织或胶原成分时，用胰蛋白酶解离细胞的效果较差，这时可采用胶原酶解离细胞法。 胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组
有哪些常用的细胞解离酶？
以下是一些常用的细胞解离酶：胶原酶（Collagenase）主要用于消化细胞外基质中的胶原蛋白，常用于解离实体组织，如肝脏、心脏、肺等。胰蛋白酶（Trypsin）常用于消化细胞间连接，使细胞彼此分离，适用于上皮细胞、成纤维细胞等的解离。木瓜蛋白酶（Papain）可用于多种组织和细胞的解离，如神经组织
胶原酶的分类
胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。
胶原酶的使用
1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块2.将组织块放入离心管（三角烧瓶）中加入30~50倍体积的胶原酶溶液，旋紧盖子（密封烧瓶）。3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内，每隔3min振摇一次，如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别有关，对于某些肿瘤组织或其他较致密
胶原酶的使用
1.将漂洗、修剪干净的组织剪成1~2mm3左右小块2.将组织块放入离心管（三角烧瓶）中加入30~50倍体积的胶原酶溶液，旋紧盖子（密封烧瓶）。3.将烧瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱内，每隔3min振摇一次，如能放在37℃的恒温震荡水浴箱中则更好。消化时间与组织的类别很有关系，对于某些肿瘤组织或其他较
酶法组织消化技术：从粗制的胶原酶到高纯度消化产品一
酶法组织消化中常用的胶原酶（Collagenase），能特异性地降解胞外胶原蛋白，使胶原蛋白和纤维粘连蛋白的网状结构解离，而不损坏细胞表面结构的完整性。由于细胞外基质的成分复杂，除胶原蛋白外，还含有弹性蛋白，糖蛋白等其他大分子结构。而且不同组织类型，不同物种来源，不同年龄的组织中胞外基质组份不同。所
酶法组织消化技术：从粗制的胶原酶到高纯度消化产品二
罗氏高纯度研究级别酶混合物Liberase Research Grade Enzyme BlendsLiberase Research Grade Enzyme Blends包含了一系列酶混合物，它们由不同比例的中性蛋白酶（非梭菌蛋白酶）和高纯度Collagenase I + Collage
怎样计算醋酸的解离常数和解离度
醋酸是一元弱酸,在水溶液中存在以下电离平衡：HAC==H++AC-在一定的温度下,这个过程很快达到了平衡,平衡常数的表达式为：K=[H+][AC-]/[HAC]此时,电离度 α％＝[H+]/c式中 [H+]、[AC-]、[HAC]分别为H+、AC-、HAC的平衡浓度.严格地说,离子浓度应该用活度来代
电离（电离常数）和解离（解离常数）的区别
一、概念不同1、电离常数：弱电解质在一定条件下电离达到平衡时，溶液中电离所生成的各种离子浓度以其在电离方程式中的计量数为幂的乘积，跟溶液中未电离分子的浓度以其在化学方程式中的计量数为幂的乘积的比值。即溶液中的电离出来的各离子浓度乘积（c（A+）*c（B-））与溶液中未电离的电解质分子浓度（c（AB）
优化胰蛋白酶解离效果的方法
优化胰蛋白酶解离效果的方法：优化浓度通过预实验确定针对特定组织或细胞的最佳胰蛋白酶浓度范围。控制温度和 pH保持反应体系在 37°C 左右和 pH 7.6 - 8.0 之间，可使用恒温设备和适当的缓冲液来维持稳定条件。精确控制作用时间在解离过程中，定期观察细胞状态，根据细胞的分离情况及时终止反应，例
细胞培养过程中消化液的相关介绍
消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞悬液，传代培养时也需要将贴壁细胞从瓶壁上消化下来，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有时也用胶原酶（collagenase）溶液。 1.胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常见有1：125和1：250，即一
单细胞悬液制备方法介绍
01取样→预处理 取样是原代单细胞悬液制备非常重要的一步，其质量会直接影响到后续处理效果。 操作时，首先根据不同实验需求麻醉或处死动物后进行消毒、固定并切开相应位置皮肤暴露目的组织。 其次操作过程中有以下几点也需要注意： 严格无菌操作，快速处理； 针对不同组织类型控制环境温度； 保证
胶原酶的基本信息
胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase)，它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构，而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质，因此，它对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感，极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。