蓝白斑筛选

实验中,通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素,这样,一次筛选可以判断出:未转化的菌不具有抗性,不生长;转化了空载体,即未重组质粒的菌,长成蓝色菌落;转化了重组质粒的菌,即目的重组菌,长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步骤,造成IPTG和X-Gal滞销主要是蓝白斑筛选存在假阳性的情况,IPTG和X-Gal的购买、配制、涂布也增加了实验的步骤针对这个情况,我们现在推出一个新品相:Ready to use LB Agar,这种粉末里面已经添加了IPTG和X-Gal,同LB Agar的使用方法完全相同,称量、溶解,高温高压灭菌,使用前加入相应抗生素即可如单独购买IPTG和X-Gal,则配制好的X-Gal需要避光保存Ready to use LB Agar(含X-gal,IPTG) 1.(LB Broth加上Agar就是LB Agar)MDBio ......阅读全文

蓝白斑筛选

实验中,通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素,这样,一次筛选可以判断出:未转化的菌不具有抗性,不生长;转化了空载体,即未重组质粒的菌,长成蓝色菌落;转化了重组质粒的菌,即目的重组菌,长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步

蓝白斑筛选原理

  一些载体(如PUC系列质粒)带有β-半乳糖苷酶(lacZ)N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点(MCS),可用于构建重组子[1]。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性,但它们同时存在时,α片段与ω片段可通过α-互补形

蓝白斑筛选的简介

  蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为α-互补与抗生素基因。蓝白斑筛选在指示培养基上,未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法。

蓝白斑筛选及其原理

蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使

重组DNA的转化和蓝白筛选

体外连接的重组DNA分子导入合适的受体细胞才能进行大量复制,增殖和表达,其首要目的是获得大量的克隆基因。虽然PCR技术,体外转录及翻译系统能部分达到大量扩增的目的,但毕竟受到体外操作的许多限制。重组质粒导入宿主细胞最常用的方法之一就是转化(transformation)。转化这一概念来源于遗传学:细

使用QPix400系统自动筛选颜色克隆——蓝白克隆筛选

在分子克隆过程中,筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法,但是,在克隆挑取过程中,过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。 Molecular

膀胱粘膜白斑

在慢性炎症,结石或埃及血吸虫病等刺激下,膀胱中肾盂粘膜发生鳞状化生,出现完全角化的鳞状上皮,使其粘膜呈白色,故称膀胱粘膜白斑。涂片中见多量成熟鳞状细胞,胞质丰富,红染或橘黄色医学教育|网搜集整理。无细胞核,为完全角化的鳞状上皮细胞。 只有通过导尿采集的标本发现完全角化细胞时,才能确诊为粘膜白斑,女

如何治疗黏膜白斑?

  去除局部刺激因素,如戒烟,改善口腔卫生,治疗病牙,少吃过冷过热的食物,会阴保持清洁,治疗其他阴道疾患。  1.全身治疗  口服维生素A、维生素E、维A酸(维甲酸)等。  2.局部药物治疗  (1)皮损处 可用皮质类固醇软膏如新霉素软膏,莫匹罗星软膏等。  (2)女阴发生萎缩性改变可用性激素软膏,

简述黏膜白斑的检查

  1、皮肤检查  点状、片状或条状灰白或乳白的角化性斑片,境界清楚,肥厚浸润。皮损表面早期可有乳白色光泽,呈网状改变,有时可形成白色膜,黏着较牢,强行剥去可出血。  2、组织病理变化  表皮有角化过度,角质突出于表面(常类似毛状),角化不全,棘层肥厚,且在角化不全下方的棘层上部有体积大、淡染、核固

分析黏膜白斑疾病的病因

  黏膜白斑病是指发生于口腔或外阴等处黏膜的白色角化性疾病。口腔黏膜白斑病多见于中年以上男性,外阴黏膜白斑病多见于闭经后的妇女。临床以病损部的点状、片状或条状灰白或乳白的角化性斑片为特征,具有恶变为鳞状细胞癌的倾向。据估计其恶变率极低,最高不过4%~6%。临床宜采用局部与全身的综合治疗方法,癌变者应

治疗宫颈白斑的方法介绍

  1.宫颈电熨或电灼  2.宫颈冷冻治疗  冷冻疗法即应用低温技术产生超低温造成病变组织冻结、继发性坏死,脱落而达到治疗目的。一般妇科治疗所需温度为-60℃~-196℃,目前以液体氮应用最多。如冷冻使用得当,其冷冻深度可达5-6mm,使病变区组织坏死、脱落,重新生长健康的上皮。  3.宫颈锥形切除

宫颈白斑的检查诊断介绍

  一、检查  1.局部视诊  通过宫颈局部仔细观察,可发现白色斑块区域,但肉眼不能辨别出不全角化病变。  2.阴道镜检查  应用阴道镜观察宫颈病变。  3.碘液试验  由于上皮角化或不全角化缺乏贮存糖原能力,涂碘局部不着色,借此能发现病变的范围。但碘试验为非特异性,如宫颈糜烂、外翻或癌前病变等亦呈

α互补筛选的原理

载体带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息.在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞.因此

NooneLost2000型全自动菌落计数系统主要用途

1、全皿计数:全自动菌落计数、荧光菌落识别、显色致病菌识别、蚀斑、噬菌斑计数、螺旋平板计数AMES分析; 2、特征菌筛选:菌落形态筛选、彩色菌落分类、蓝白斑筛选、菌落特征数字化; 3、多区域统计:SBA、OPKA、多孔板克隆计数; 4、霉菌研究:菌丝生长速率一键测量、平皿对峙培养分析、防霉检

全球成熟的现代分子生物学技术有哪些

PCR分子克隆核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序DNA,RNA 提取转化外源DNA体外转录、逆转录cDNA文库构建原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交蓝白斑筛选、抗生素筛选基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的.

关于重组子筛选的介绍

  根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。至今使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β -半乳糖苷酶的氨基

肝上长白斑病理分析

核心提示: 肝脏疾病在生活当中是很常见的,很多人通过检查发现肝上长了白斑,大部分人会认为是肝癌,其实肝上长白斑的情况不一定就是肝癌,也有可能是别的病症,比如肝脏钙化,胆管结石,脂肪肝等,这几种症状也有可能会出现肝上长白斑的症状,所以建议到医院进行进一步的检查来明确病情。  

全自动菌落计数仪主要应用于哪些领域?

  1、全皿计数:荧光菌落识别、显色致病菌识别、蚀斑、噬菌斑计数、螺旋平板计数AMES分析;  2、双圈筛选分析:抑菌圈、水解圈、透明圈、变色圈、溶钙圈、溶血圈、排油圈、溶磷圈、生长圈;  3、特征菌筛选:菌落形态筛选、彩色菌落分类、蓝白斑筛选、菌落特征数字化;  4、多区域统计:SBA、OPKA、

限制性内切酶质量控制

 单位定义限制性内切酶的一个活性单位是指,在50μl 的反应体系里,采用随酶提供的 NEBuffer,用1个小时的时间,彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量。 酶切反应应在带盖的Eppendorf 管中进行,选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前,浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1,

限制性内切酶质量控制

单位定义 限制性内切酶的一个活性单位是指,在50μl 的反应体系里,采用随酶提供的 NEBuffer,用1个小时的时间,彻底消化1μg底物DNA所需要的酶量。 酶切反应应在带盖的Eppendorf 管中进行,选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前,浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀

关于宫颈白斑的疾病的病因分析

  宫颈白斑,系指在子宫颈阴道部出现的一种灰白色不透明的斑块状病变。临床肉眼所见白斑仅表示有不同程度的上皮增生。随着对宫颈癌前病变和早期癌的深入研究及阴道镜的广泛应用,此病已逐渐被引起重视。  1.内分泌失调  雌激素可以刺激卵泡发育,其血浓度的高低可以促进或抑制促性腺激素的释放,从而间接影响卵巢功

关于黏膜白斑的临床表现介绍

  1.口腔黏膜白斑  (1)好发人群及部位 以中老年男性多见,好发于颊部黏膜咬合线区域,舌部次之,唇、前庭沟、腭、牙龈也有发生。  (2)症状 口腔黏膜病损为白色或灰白色黏膜改变,表面粗糙,质地柔软,周围黏膜较正常。可分为均质性与非均质型两大类;前者如斑块状、皱纹纸状;而颗粒状、疣状及溃疡状等属于

关于口腔白斑的临床表现介绍

  见于约5%的成年人口腔中,吸烟者的发病率高达20%以上。其发生与慢性刺激(特别是长期摩擦)或吸烟有关。若除去刺激,停止吸烟3个月,白斑仍未减轻或消失,则更应注意随访。在病理学上白斑有两大类,一是良性过角化,为良性病变;二是上皮异常增生性白斑,是癌前病变。白斑在临床上有两型:一是均质型,白斑均匀白

关于粘膜白斑病的基本简介

  白斑的好发部位是颊、舌背、舌腹、唇、腭、口底、牙龈等部位的口腔粘膜,但有时也可发生在其它部位。某些类型具有比较特定的部位:颗粒状白斑多见于口角区颊粘膜;皱纸状白斑多见于口底舌腹;疣状白斑多见于牙龈。白斑发病部位与白色角化病的好发区域不同,而且在形态和质地上也无共同之处。  白色念珠菌白斑除了微脓

如何精确控制反应釜的温度

  一、简介   X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色,因此常用于转基因筛选试验中,如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。   分子 式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63,

XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法

  一、简介   X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色,因此常用于转基因筛选试验中,如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。   分子 式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63,

XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法

  一、简介   X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色,因此常用于转基因筛选试验中,如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。   分子 式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63,

XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法

一、简介X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色,因此常用于转基因筛选试验中,如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。 分子 式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63,CAS Number 7240-90-6。

XGal的作用机理及IPTGXgal平板制作方法

一、简介X-Gal在β-半乳糖苷酶的催化下水解后呈蓝色,因此常用于转基因筛选试验中,如蓝白斑筛选或β-半乳糖苷酶的原位染色检测实验。蓝白斑试验中主要根据菌落呈现的颜色即可简单的挑选出哪些是转化子。分子 式为C14H15BrClNO6,分子量为408.63,CAS Number 7240-90-6。X

重组子筛选的原理和实验方法

  根据载体的遗传特征筛选重组子,如a-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段, 中有β半乳糖苷酶基因(acZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。  在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β半乳糖苷酶的氨基端而