蓝白斑筛选原理

一些载体(如PUC系列质粒)带有β-半乳糖苷酶(lacZ)N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点(MCS),可用于构建重组子[1]。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性,但它们同时存在时,α片段与ω片段可通过α-互补形成具有酶活性的β-半乳糖苷酶。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地破坏α片段的编码,使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选,称为蓝白斑筛选。......阅读全文

蓝白斑筛选原理

  一些载体(如PUC系列质粒)带有β-半乳糖苷酶(lacZ)N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点(MCS),可用于构建重组子[1]。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性,但它们同时存在时,α片段与ω片段可通过α-互补形

蓝白斑筛选及其原理

蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使

蓝白斑筛选

实验中,通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素,这样,一次筛选可以判断出:未转化的菌不具有抗性,不生长;转化了空载体,即未重组质粒的菌,长成蓝色菌落;转化了重组质粒的菌,即目的重组菌,长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步

蓝白斑筛选的简介

  蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为α-互补与抗生素基因。蓝白斑筛选在指示培养基上,未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法。

重组DNA的转化和蓝白筛选

体外连接的重组DNA分子导入合适的受体细胞才能进行大量复制,增殖和表达,其首要目的是获得大量的克隆基因。虽然PCR技术,体外转录及翻译系统能部分达到大量扩增的目的,但毕竟受到体外操作的许多限制。重组质粒导入宿主细胞最常用的方法之一就是转化(transformation)。转化这一概念来源于遗传学:细

使用QPix400系统自动筛选颜色克隆——蓝白克隆筛选

在分子克隆过程中,筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法,但是,在克隆挑取过程中,过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。 Molecular

谷物筛选器筛选原理

    谷物筛选是指根据粮食颗粒大小的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。因为筛选和重力分选的主要对象是谷物,其介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器就是一款专门检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,确定其品质等级的仪器。  

谷物筛选原理以及筛选仪器

筛选是指根据物料粒度的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。由于筛选和重力分选的主要对象是谷物,就其性质而言,介于固体和液体之间而被称为散粒体。散粒体具有流动性和自动分级性能。谷物筛选器检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,确定其品质等级的一种检验仪器,确定其害虫密

膀胱粘膜白斑

在慢性炎症,结石或埃及血吸虫病等刺激下,膀胱中肾盂粘膜发生鳞状化生,出现完全角化的鳞状上皮,使其粘膜呈白色,故称膀胱粘膜白斑。涂片中见多量成熟鳞状细胞,胞质丰富,红染或橘黄色医学教育|网搜集整理。无细胞核,为完全角化的鳞状上皮细胞。 只有通过导尿采集的标本发现完全角化细胞时,才能确诊为粘膜白斑,女

谷物筛选器的筛选原理是什么?

    说到筛选其实我们都不会太陌生,其实它就是根据物料粒度的不同,利用一层或数层静止的或运动的筛面对物料进行分选的方法。在种子检验领域,筛选仪器的代表就是谷物筛选器,它的作用就是用于检验颗粒粮食、油料试样的含杂率及大米中、糠粉含量,由于这些检测指标与谷物的品质息息相关,因此如果要确定谷物的品质等级

全球成熟的现代分子生物学技术有哪些

PCR分子克隆核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序DNA,RNA 提取转化外源DNA体外转录、逆转录cDNA文库构建原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交蓝白斑筛选、抗生素筛选基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的.

α互补筛选的原理

载体带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息.在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞.因此

如何治疗黏膜白斑?

  去除局部刺激因素,如戒烟,改善口腔卫生,治疗病牙,少吃过冷过热的食物,会阴保持清洁,治疗其他阴道疾患。  1.全身治疗  口服维生素A、维生素E、维A酸(维甲酸)等。  2.局部药物治疗  (1)皮损处 可用皮质类固醇软膏如新霉素软膏,莫匹罗星软膏等。  (2)女阴发生萎缩性改变可用性激素软膏,

简述黏膜白斑的检查

  1、皮肤检查  点状、片状或条状灰白或乳白的角化性斑片,境界清楚,肥厚浸润。皮损表面早期可有乳白色光泽,呈网状改变,有时可形成白色膜,黏着较牢,强行剥去可出血。  2、组织病理变化  表皮有角化过度,角质突出于表面(常类似毛状),角化不全,棘层肥厚,且在角化不全下方的棘层上部有体积大、淡染、核固

大豆螺旋筛选机原理

通过活动连杆与电动机带动的曲轴或偏心轮协调工作从而完成了精选除杂的全过程。大豆进入道工序层分级振动筛,层将石块砖块及大的物料从上层分离从出杂口出来,层为分好级的物料下入下粮口,达到高纯度的商品粮物料上到机器筛面后。由于作用于鱼鳞筛面的反向风,使物料由于比重的不同,产生了截然不同的两个运动方向,比重重

单克隆筛选的原理

细胞单克隆筛选细胞单克隆筛选是根据细胞所具有的特性将单个细胞从混合的细胞样品中分离出来的一种技术,是抗体制备细胞株优化、稳转细胞株构建、药物靶点筛选等应用中重要的一环,优质的单克隆细胞能够更好地为不同领域科学研究和药物研发提供支持。通俗的讲:就是将混合细胞通过3D打印技术(更精准高效)/直接用96孔

蓝相液晶的工作原理

蓝相液晶的工作原理是基于Kerr效应。将蓝相液晶置于两平行电极板之间就构成一个Kerr盒,外加电场通过平行电极板作用在蓝相液晶上,在外电场作用下,蓝相液晶就变为光学上的单轴晶体,其光轴方向与电场方向平行。当线偏振光以垂直于电场的方向通过蓝相液晶时,将分解为两束线偏振光,一束的光矢量沿着电场方向,另一

分析黏膜白斑疾病的病因

  黏膜白斑病是指发生于口腔或外阴等处黏膜的白色角化性疾病。口腔黏膜白斑病多见于中年以上男性,外阴黏膜白斑病多见于闭经后的妇女。临床以病损部的点状、片状或条状灰白或乳白的角化性斑片为特征,具有恶变为鳞状细胞癌的倾向。据估计其恶变率极低,最高不过4%~6%。临床宜采用局部与全身的综合治疗方法,癌变者应

治疗宫颈白斑的方法介绍

  1.宫颈电熨或电灼  2.宫颈冷冻治疗  冷冻疗法即应用低温技术产生超低温造成病变组织冻结、继发性坏死,脱落而达到治疗目的。一般妇科治疗所需温度为-60℃~-196℃,目前以液体氮应用最多。如冷冻使用得当,其冷冻深度可达5-6mm,使病变区组织坏死、脱落,重新生长健康的上皮。  3.宫颈锥形切除

宫颈白斑的检查诊断介绍

  一、检查  1.局部视诊  通过宫颈局部仔细观察,可发现白色斑块区域,但肉眼不能辨别出不全角化病变。  2.阴道镜检查  应用阴道镜观察宫颈病变。  3.碘液试验  由于上皮角化或不全角化缺乏贮存糖原能力,涂碘局部不着色,借此能发现病变的范围。但碘试验为非特异性,如宫颈糜烂、外翻或癌前病变等亦呈

谷物筛选器的工作原理

    在农业育种中,对粮食、油料等进行筛选测定是其中必须要进行的一项工作,而过去采用人工筛选,不仅效率低,而且粮食、油料等与杂质的分离效果也不好,明显影响了农业育种的品质和效率,因此为了适应现代农业育种对粮食、油料等等筛理分级的工作需要,人们开始采用筛选效果更好的谷物筛选器来替代传统的人工操

甲苯胺蓝的染色原理

甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不仅含

MTT(噻唑蓝)原理、用途、实验步骤

什么是MTT,什么是MTT法MTT,商品名称噻唑蓝全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo(z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,一种黄颜色的染料,由于应用于细胞存活率的检

NooneLost2000型全自动菌落计数系统主要用途

1、全皿计数:全自动菌落计数、荧光菌落识别、显色致病菌识别、蚀斑、噬菌斑计数、螺旋平板计数AMES分析; 2、特征菌筛选:菌落形态筛选、彩色菌落分类、蓝白斑筛选、菌落特征数字化; 3、多区域统计:SBA、OPKA、多孔板克隆计数; 4、霉菌研究:菌丝生长速率一键测量、平皿对峙培养分析、防霉检

关于重组子筛选的介绍

  根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。至今使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β -半乳糖苷酶的氨基

肝上长白斑病理分析

核心提示: 肝脏疾病在生活当中是很常见的,很多人通过检查发现肝上长了白斑,大部分人会认为是肝癌,其实肝上长白斑的情况不一定就是肝癌,也有可能是别的病症,比如肝脏钙化,胆管结石,脂肪肝等,这几种症状也有可能会出现肝上长白斑的症状,所以建议到医院进行进一步的检查来明确病情。  

电动筛选器(新国标)使用原理

电动筛选器(新国标)是根据GB5494-85《粮食油料检验杂质、不完善粒检验法》国家标准研制生产的一种专业设备。该设备与谷物选筛配套后,广泛适用于粮食、油料的筛选测定,是农业育种所必需的筛理分级设备。电脑筛选器工作原理:该设备选用台式结构,由蜗轮蜗杆作变速传动,筛体由三点平面支撑,通过偏心连杆机构作

全自动菌落计数仪主要应用于哪些领域?

  1、全皿计数:荧光菌落识别、显色致病菌识别、蚀斑、噬菌斑计数、螺旋平板计数AMES分析;  2、双圈筛选分析:抑菌圈、水解圈、透明圈、变色圈、溶钙圈、溶血圈、排油圈、溶磷圈、生长圈;  3、特征菌筛选:菌落形态筛选、彩色菌落分类、蓝白斑筛选、菌落特征数字化;  4、多区域统计:SBA、OPKA、

简述蓝瓶子实验的实验原理

  静置此溶液时,有一部分溶解的氧气逸出,亚甲基蓝(蓝色)被葡萄糖还原为还原亚甲基蓝(无色);振荡此无色溶液时,溶液与空气接触面积增大,溶液中氧气溶解量就增多,氧气把还原态亚甲基蓝(无色)氧化为亚甲基蓝(蓝色),溶液又呈蓝色。若重复振荡和静置溶液,其颜色交替出现蓝色—无色—蓝色—无色……的现象,这称

简述甲苯胺蓝的染色原理

  甲苯胺蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌亚胺染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色。甲苯胺蓝不