蓝白斑筛选及其原理
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有酶活性,但它们同时存在时,可形成具有酶学活性的蛋白质。这样,lacZ基因在缺少近操纵基因区段的宿主细胞与带有完整近操纵基因区段的质粒之间实现了互补,称为α-互补。由α-互补而产生的LacZ+细菌在诱导剂IPTG的作用下,在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落,因而易于识别。然而,当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后,几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段,使得带有重组质粒的细菌形成白......阅读全文
蓝白斑筛选
实验中,通常蓝白筛选是与抗性筛选一同使用的。含X-gal的平板培养基中同时含有一种或多种载体所携带抗性相对应的抗生素,这样,一次筛选可以判断出:未转化的菌不具有抗性,不生长;转化了空载体,即未重组质粒的菌,长成蓝色菌落;转化了重组质粒的菌,即目的重组菌,长成白色菌落。目前很多实验室省去蓝白斑筛选的步
蓝白斑筛选原理
一些载体(如PUC系列质粒)带有β-半乳糖苷酶(lacZ)N端α片段的编码区,该编码区中含有多克隆位点(MCS),可用于构建重组子[1]。这种载体适用于仅编码β-半乳糖苷酶C端ω片段的突变宿主细胞。因此,宿主和质粒编码的片段虽都没有半乳糖苷酶活性,但它们同时存在时,α片段与ω片段可通过α-互补形
蓝白斑筛选及其原理
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法: 是根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。现在使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使
蓝白斑筛选的简介
蓝白斑筛选是重组子筛选的一种方法,是根据载体的遗传特征筛选重组子,主要为α-互补与抗生素基因。蓝白斑筛选在指示培养基上,未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长,重组质粒的菌落是白色的,非重组质粒的菌落是蓝色的,以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法。
重组DNA的转化和蓝白筛选
体外连接的重组DNA分子导入合适的受体细胞才能进行大量复制,增殖和表达,其首要目的是获得大量的克隆基因。虽然PCR技术,体外转录及翻译系统能部分达到大量扩增的目的,但毕竟受到体外操作的许多限制。重组质粒导入宿主细胞最常用的方法之一就是转化(transformation)。转化这一概念来源于遗传学:细
使用QPix400系统自动筛选颜色克隆——蓝白克隆筛选
在分子克隆过程中,筛选含有插入基因片段的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别重组克隆的方法,但是,在克隆挑取过程中,过多的人工操作过程存在主观、速度慢、易出错等问题。 Molecular
膀胱粘膜白斑
在慢性炎症,结石或埃及血吸虫病等刺激下,膀胱中肾盂粘膜发生鳞状化生,出现完全角化的鳞状上皮,使其粘膜呈白色,故称膀胱粘膜白斑。涂片中见多量成熟鳞状细胞,胞质丰富,红染或橘黄色医学教育|网搜集整理。无细胞核,为完全角化的鳞状上皮细胞。 只有通过导尿采集的标本发现完全角化细胞时,才能确诊为粘膜白斑,女
什么是粘膜白斑
粘膜白斑[1]是一种发生在口腔,阴部的疾病,其临床特征是患部出现边界清楚的白色或淡白色斑块。本病发展缓慢,病程长达数年,若治疗不当或延误治疗,疾病最终可导致鳞状细胞癌变。祖国医学认本病与老年体虚,卫外不固,兼感毒邪有关。
怎样预防粘膜白斑
1、消除病因,改善口腔卫生,戒烟,矫正病牙,避免辛辣刺激饮食,保持外阴清洁,避免搔抓,积极治疗外阴,阴道及宫颈炎症。 2、定期的复发,尽早明确损害为良性或原位间变。 3、良性皮损,酌情局部外用止痒,抗增生药物,原位间变损害可采用冷冻,电干燥法,放射性核素,浅层X线或手术治疗。
简述黏膜白斑的检查
1、皮肤检查 点状、片状或条状灰白或乳白的角化性斑片,境界清楚,肥厚浸润。皮损表面早期可有乳白色光泽,呈网状改变,有时可形成白色膜,黏着较牢,强行剥去可出血。 2、组织病理变化 表皮有角化过度,角质突出于表面(常类似毛状),角化不全,棘层肥厚,且在角化不全下方的棘层上部有体积大、淡染、核固
如何治疗黏膜白斑?
去除局部刺激因素,如戒烟,改善口腔卫生,治疗病牙,少吃过冷过热的食物,会阴保持清洁,治疗其他阴道疾患。 1.全身治疗 口服维生素A、维生素E、维A酸(维甲酸)等。 2.局部药物治疗 (1)皮损处 可用皮质类固醇软膏如新霉素软膏,莫匹罗星软膏等。 (2)女阴发生萎缩性改变可用性激素软膏,
粘膜白斑的临床症状
1、口腔粘膜白斑多发于40-70岁的男性,好发于沿牙齿咬合线的颊粘膜,舌背,硬腭和下唇,外观和范围不一,为界限清楚的白色光滑斑点,斑片,呈乳白色肥厚性斑块者,表面可粗糙,无光泽触之较硬,角化明显时发生裂腺,出血,继而可发生溃疡,一般无自觉症状,偶见轻微疼痛或针刺感,若除去局部刺激因素,部分可恢复
α互补筛选的原理
载体带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息.在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β-半乳糖苷酶的氨基端而不影响功能,这种载体适用于可编码β-半乳糖苷酶C端部分序列的宿主细胞.因此
关于粘膜白斑的病理介绍
大多数损害为良性,表现为角化过度好或角化不全,棘层肥厚和真皮慢性炎症细胞浸润,少数有不同程度的原位间变,约3%-10%发生发展为浸润性鳞癌。 原位间变的粘膜白斑,重要的特征是:胞核多形性和非典型性,核大而不规则,染色深;粘膜上皮细胞丧失极性,排列紊乱,表皮可出现角化不良细胞,上皮脚不规则向下延
分析黏膜白斑疾病的病因
黏膜白斑病是指发生于口腔或外阴等处黏膜的白色角化性疾病。口腔黏膜白斑病多见于中年以上男性,外阴黏膜白斑病多见于闭经后的妇女。临床以病损部的点状、片状或条状灰白或乳白的角化性斑片为特征,具有恶变为鳞状细胞癌的倾向。据估计其恶变率极低,最高不过4%~6%。临床宜采用局部与全身的综合治疗方法,癌变者应
宫颈白斑的检查诊断介绍
一、检查 1.局部视诊 通过宫颈局部仔细观察,可发现白色斑块区域,但肉眼不能辨别出不全角化病变。 2.阴道镜检查 应用阴道镜观察宫颈病变。 3.碘液试验 由于上皮角化或不全角化缺乏贮存糖原能力,涂碘局部不着色,借此能发现病变的范围。但碘试验为非特异性,如宫颈糜烂、外翻或癌前病变等亦呈
治疗宫颈白斑的方法介绍
1.宫颈电熨或电灼 2.宫颈冷冻治疗 冷冻疗法即应用低温技术产生超低温造成病变组织冻结、继发性坏死,脱落而达到治疗目的。一般妇科治疗所需温度为-60℃~-196℃,目前以液体氮应用最多。如冷冻使用得当,其冷冻深度可达5-6mm,使病变区组织坏死、脱落,重新生长健康的上皮。 3.宫颈锥形切除
关于粘膜白斑的概述介绍
粘膜白斑是指发生在口腔和外阴粘膜的增生性,白色角化性损害,因可继发鳞癌,通常认为是一种癌前病变。 既往粘膜白斑是指组织学上呈早期原位间变的口腔和女性粘膜的角化白色斑变,而白色角化性斑片,而白色角化病是指组织学上呈良性,而外观相似的粘膜损害,目前,粘膜白斑的概念仅为临床性描述,因此病理学检查显得
关于粘膜白斑的病因介绍
可能为口腔及阴部粘膜长期受到外界慢性刺激所引起的一种非特异性增生反应,常与诱因有吸烟,不合适的义齿,残齿,牙齿咬合不良,热而辛辣刺激饮食,口腔及阴部卫生不良等,此外,念珠菌感染,慢性唇炎,女阴萎缩,萎缩硬化苔藓等皮肤粘膜疾患,亦与本病的发生有关。
如何预防口腔白斑病
保持口腔清洁:定期刷牙、使用牙线和漱口水可以有效清除口腔中的细菌和食物残渣,减少口腔感染的风险。 戒烟限酒:吸烟和饮酒是导致口腔白斑病的主要因素之一,因此应该尽量戒烟限酒。 均衡饮食:多吃新鲜蔬菜水果,少吃辛辣刺激性食物,有助于维持口腔黏膜的健康。 避免过度刺激:避免过度刷牙、使用过硬的牙
粘膜白斑病的概述
例如白癜风也可发生在粘膜上,但其组织学改变以色素脱失为主,一般无角化过度等表现,故不属于粘膜白斑病。皮肤科的粘膜白斑包括了口腔和外阴两个部位的病变,过去许多医学家把粘膜白斑病看成是癌前期病变,但经过大量的观察与研究证明了粘膜白斑大多数属于良性病变。
粘膜白斑病的简介
白斑的好发部位是颊、舌背、舌腹、唇、腭、口底、牙龈等部位的口腔粘膜,但有时也可发生在其它部位。某些类型具有比较特定的部位:颗粒状白斑多见于口角区颊粘膜;皱纸状白斑多见于口底舌腹;疣状白斑多见于牙龈。白斑发病部位与白色角化病的好发区域不同,而且在形态和质地上也无共同之处。 白色念珠菌白斑除了微脓
白斑病会遗传吗?
白斑病是一种常见的色素失调性疾病,其发病原因目前尚不清楚,但遗传因素可能与其发病有关。据研究表明,白斑病的遗传因素可能与多个基因有关,包括HLA基因、T细胞受体基因等。 具体来说,HLA基因是人类免疫系统中的一种重要基因,它与人体对外界病原体的免疫反应密切相关。一些研究表明,HLA基因的某些变
白斑的遗传性如何?
白斑,又称为白癜风,是一种皮肤色素减退或消失的病症。从中医的角度来看,白斑的发生与遗传、体质、情志、饮食等多种因素有关。关于白斑的遗传性,我们可以从以下几个方面来分析: 遗传因素:中医认为,白斑的发生与遗传因素有一定关系。如果家族中有白斑患者,那么后代患白斑的风险会相对较高。但这并不意味着遗传
关于粘膜白斑的病因介绍
可能为口腔及阴部粘膜长期受到外界慢性刺激所引起的一种非特异性增生反应,常与诱因有吸烟,不合适的义齿,残齿,牙齿咬合不良,热而辛辣刺激饮食,口腔及阴部卫生不良等,此外,念珠菌感染,慢性唇炎,女阴萎缩,萎缩硬化苔藓等皮肤粘膜疾患,亦与本病的发生有关。
NooneLost2000型全自动菌落计数系统主要用途
1、全皿计数:全自动菌落计数、荧光菌落识别、显色致病菌识别、蚀斑、噬菌斑计数、螺旋平板计数AMES分析;2、特征菌筛选:菌落形态筛选、彩色菌落分类、蓝白斑筛选、菌落特征数字化;3、多区域统计:SBA、OPKA、多孔板克隆计数;4、霉菌研究:菌丝生长速率一键测量、平皿对峙培养分析、防霉检测;
关于重组子筛选的介绍
根据载体的遗传特征筛选重组子,如α-互补、抗生素基因等。至今使用的许多载体都带有一个大肠杆菌的DNA的短区段,其中有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的调控序列和前146个氨基酸的编码信息。在这个编码区中插入了一个多克隆位点(MCS),它并不破坏读框,但可使少数几个氨基酸插入到β -半乳糖苷酶的氨基
全球成熟的现代分子生物学技术有哪些
PCR分子克隆核酸电泳、琼脂糖凝胶电泳测序DNA,RNA 提取转化外源DNA体外转录、逆转录cDNA文库构建原位杂交、酵母双杂交、差减杂交、扣除杂交蓝白斑筛选、抗生素筛选基因工程技术大部分都是依据分子生物学原理设计出来的.
全自动菌落计数仪主要应用于哪些领域?
1、全皿计数:荧光菌落识别、显色致病菌识别、蚀斑、噬菌斑计数、螺旋平板计数AMES分析; 2、双圈筛选分析:抑菌圈、水解圈、透明圈、变色圈、溶钙圈、溶血圈、排油圈、溶磷圈、生长圈; 3、特征菌筛选:菌落形态筛选、彩色菌落分类、蓝白斑筛选、菌落特征数字化; 4、多区域统计:SBA、OPKA、
肝上长白斑病理分析
核心提示: 肝脏疾病在生活当中是很常见的,很多人通过检查发现肝上长了白斑,大部分人会认为是肝癌,其实肝上长白斑的情况不一定就是肝癌,也有可能是别的病症,比如肝脏钙化,胆管结石,脂肪肝等,这几种症状也有可能会出现肝上长白斑的症状,所以建议到医院进行进一步的检查来明确病情。