整理的PCR资料.供大家分享.

PCR实验技巧增加PCR的特异性:1. prime理想的,只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60%c. 5'端和中间序列要多GC,以增加稳定性d. 避免3'端GC rich, 最后3个BASE不要有GC,或者最后5个有3个不要是GCe. 避免3'端的互补, 否则容易造成DIMERf. 避免3'端的错配g. 避免内部形成二级结构h. 附加序列(RT site, Promoter sequence)加到5'端, 在算Tm值时不算,但在检测互补和二级结构是要加上它们i. 使用兼并引物时, 要参考密码子使用表,注意生物的偏好性,不要在3'端使用兼并引物,并使用 较高的引物浓度(1uM-3uM)j. 最好学会使用一种desig......阅读全文

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PCR实验技巧增加PCR的特异性:1. prime理想的,只同目的序列两侧的单一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些条件a. 足够长,18-24bp,以保证特异性.当然不是说越长越好,太长的引物同样会降低特异性,并且降低产量b. GC% 40%~~~~60%c. 5'端和中间序列要多

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引物设计简介1.寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用

花了2星期系统归纳关于PCR的各位老师旧帖,与大家分享

常规PCR一般注意点:1)PCR模板是关键,引物可以优化。制备模板的时候,一定要注意核酸模板的纯度和量。纯度上要避免杂质和杂蛋白质的混入,同时还要注意添加模板的量,模板很理想的话,不用加太多,加的多了,混进去的杂质机会就多了。当模板的浓度过低,比如低于100个分子时, 引物和模板之间就很难发生反应.

关于色差仪的专业术语整理分享

差仪使用和分析过程中会有很多专业术语,这些术语一般不了解仪器的人不会特别清楚。为了更加熟悉和了解色差仪,我们把这些术语统一整理一下分享给大家看。    CIELABColorSpace(CIELAB色空间)    利用L*、a*及b*三个不同的坐标轴,替颜色在几何坐标图中,指示位置及代号。    C

elisa试剂盒实验基础资料分享

  面对新学期的开始,是不是让不少ELISA实验的新手同学们有点儿手足无措呢?在实验中有些不太懂的地方可以请教师兄或者老师,很多人在实验过程中,难免会遇到各种不同的问题,比如说正态分布及标准差,真值,质控血清如何使用,实验的效果不好等等。今天上海劲马实验室为您分享了elisa试剂盒实验基础资料,一起

简要整理分享直读光谱仪的样品磨样方法

  想必很多人都很少听过光谱仪,只有这个领域的人才知道光谱仪是什么。光谱仪就是以光电倍增管等光探测器测量谱线不同波长位置强度的装置。  光谱仪应用很广,在农业、天文、汽车、生物、化学、镀膜、色度计量、环境检测、薄膜工业、食品、印刷、造纸、喇曼光谱、半导体工业、成分检测、颜色混合及匹配、生物医学应用、

“中国科学家资料整理与研究中心”成立

  6月20日上午,“中国科学家资料整理与研究中心”(以下简称研究中心)成立仪式在中科院自然科学史研究所举行。中国科协党组成员、书记处书记王春法,中国科协调宣部副部长罗晖,中国科协发展研究中心主任、中国科协调宣部副部长王康友,研究所所长张柏春研究员等出席了成立仪式。研究所副所长王扬宗和罗晖分别代表双

定量PCR实验技术分享

1. 如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决?ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。解决办法可以将模板加以浓

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1.  如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决? ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此最好能够把ct值往前移。 解决办法可以将模

定量PCR实验技术分享1

1.  如果扩增曲线ct值比较靠后的话,32左右,一般有什么方法解决没有 ct值比较靠后,对实验有一定的影响,因为经过那么多次的循环,酶的活性有可能有所下降,这时候扩增效率会有所改变(而定量PCR的理论基础就是每次循环的扩增效率我们认为是确定的一个值)。因此zui好能够把ct值往前移。 解决办法可以

普通PCR原理及应用分享

普通 PCR 原理及应用分享

高温电炉产品特性及适用范围介绍给大家分享

 自然空气隔热式,轻巧易搬运。  内部采用耐高温陶瓷板,不易变形,外部采用镀锌加高温烤漆美观,不易掉漆。[1]    炉内两面辐射方式加热,温度分布均匀。    升温速度快1100℃约只须30分内。      温度控制:PID自动控制LED数字显示。  保温:进口耐高温陶瓷棉保温及陶瓷板、高铝棉三重

城镇及工矿供水水文地质勘查中资料综合整理及报告编制

各项实际资料,必须及时认真地进行系统编录、整理、检查、验收,达到资料准确、系统和完整,为编写水源地水文地质勘查报告做好准备。   水源地水文地质勘查报告是勘查成果的系统总结,是制定水源地规划、设计的主要依据,要求内容齐全、重点突出、论据充分、结论准确、简明扼要,一般应包括文字报告、附图、附表三部分。

RTPCR的操做经验分享

在所有RNA实验中,最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶(RNA酶)的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定,一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解,而所制备的RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果,所

长片段PCR技术心得分享

PCR技术自1983Mullis发明以来,给生命科学带来了历史性的变化,现已成为分子遗传学、基因组测序和作图、法医学、系统动物学等各领域内不可缺少的工具。但是,普通的PCR最长只能扩展2-3kb左右的短片段基因,对于5kb以上的长片段基因很难有效的扩增,这使PCR受到了很大限制。故人们一直以来都在尝

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关于固定污染源采样器的相关使用知识分享给大家

 固定污染源采样器由高性能吸气泵、微电脑时控、电池电压显示、流量调节、自动反馈恒流组成,还配有多种粉尘预捕集器。其中用于测定总粉尘浓度的全尘预捕集器;另一种用于测定呼吸性粉尘浓度的冲击式预捕集器,这种预捕搜集器能对危害人体的呼吸性粉尘和非呼吸性粉尘进行分离,能一次采集可兼得呼吸性和非呼吸性二种粉尘样

研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠

  赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来,已推动2000+个课题组加速研究进展,帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系,或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关

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知识分享:PCR仪的原理、分类、常见问题汇总!

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二手定量PCR仪基本技术资料详情

二手定量PCR仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。二手定量PCR仪的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常

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Chip-QPCR定量分析方法分享

相关专题Q-PCR定量分析CHIP最近做了CHIP,用Q-PCR方法进行定量分析,现将我对一些文献资料的总结传上,希望对大家有帮助!i. Normalizeeach ChIP DNA fractions’ Ct value to the Input DNA fraction Ct valuefor

【分享】降落PCR的原理及常见问题解答

提问:降落PCR(Touchdown PCR)的原理?回答:Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度,直至达到“Touchdown”退火温度,然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度之间的任

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沱沱河气象站:在可可西里向全球分享气象资料

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第三代数字PCR技术应用分享

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