用ReadyMixTMPCRReactionMix进行拟南芥SSLP
用ReadyMix TM PCR Reaction Mix 进行拟南芥SSLP （32 个样品+3 个对照）一、PCR采用SIGMA REDTaq® ReadyMixTM PCR Reaction Mix提供的 试剂 （包括20 mM Tris-HCl, pH 8.3, 100 mM KCl, 3 mM MgCl2, 0.002% gelatin, 0.4 M dNTP mix (dATP, dCTP, dGTP, dTTP), stabilizers, 0.06 unit/µl Taq DNA Polymerase）。用CER456772 SSLP Marker, Col 348 bp, Ler 291 bp. All primer stocks: 100 µM. 90 µl H2O + 10 µl primer stocks = 10 µM primer.32 Samples + 2 ......阅读全文
糖的呈色反应（color－reaction）和定性鉴定(1)
目的要求(1) 学习鉴定糖类及区分酮糖和醛糖的方法。(2) 了解鉴定还原糖的方法及其原理。Ⅰ. Molish反应——α-萘酚反应实验原理糖在浓硫酸或浓盐酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物与α-萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环，因此又称紫环反应。自由存在和结合存在的糖均呈阳性反应
测序反应实验
要得到合适的信号强度，可根据 DNA 片段的大小调节 DNA 的用量。适用于 ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 和 GeneAmp PCR System9700(Applied Biosystems
用PCR扩增cDNA库中的特异序列
最常用的基因分离方法需要建立组织或细胞RNA的cDNA库，然后用抗体或 DNA探针筛选出感兴趣的基因。虽然这个方法已成功地克隆了大量基因，但建立和筛 选CDNA库是一项非常耗时．费力的工作，而且用寡聚核苷酸作探针进行筛选需大量蛋 白质序列结构的资料。聚合酶链的反应（PCR）方法可使一种特
PCR扩增后的片段用什么方法检测
聚合酶链式扩增反应。通过电泳进行产物定量只是相对的大概估算，一般的marker都有这样的功能，比如你的产物小于2000bp的话，你在泳道加入5ul 的TAKARA的DL2000marker，其中最亮的一条带750bp含量约为150ng，其他的条带约为50ng，根据你的条带的明暗和marker进行比较
用PCR识别不同的噬菌体抗体克隆
。不过，也可以先用PCR筛选方法估计所出现的不同克隆的数目。使用位于scFv基因旁侧的引物，直接从包含了噬菌粒的细菌克隆中扩增scFv。然后，用能多次切割V基因的限制性酶（如BstNI）消化PCR产物。尽管这对于来自非免疫文库的scFv很有效，但对于多样性受到更多限制的抗体文库效果较差。这是因为这些
测序反应－－实验
试剂、试剂盒 循环测序试剂盒引物和模板仪器、耗材 薄壁 PCR 管热循环仪GeneAmpPCRSystem9700 仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液ABI PRISM Big Dye Terminator Ready Reaction mix(Applied Biosystems) 或其他循环
Standard－RTPCR
RT-PCR or reverse transcription PCR refers to PCR that uses product of an RT reaction as template. In effect, the PCR amplifies cDNA fragments. In one
测序反应实验
试剂、试剂盒 循环测序试剂盒 引物和模板 仪器、耗材 薄壁 PCR 管 热循环仪
Taq酶PCR实验方法介绍
General AdvicePCR allows the production of more than 10 million copies of a target DNA sequence from only a few molecules. The sensitivity of this tec
PCR实验指导与常见问题分析1
CONTENTPCR guide: a discussion of the main parameters influencing the outcome of the PCR and multiplex PCR reaction in 16 pages/sections and using ove
基于－PCR－的基因分型实验——用末端标记的引物－PCR－扩增－SSLP
试剂、试剂盒正向和反向引物10 X T4 多聚核苷酸激酶缓冲液ATPT4 多聚核苷酸激酶模板DNA10 X PCR 扩增缓冲液4dNTP 混合液Taq DNA 聚合酶轻矿物油2 X 甲酰胺载样液仪器、耗材96孔微量板热循环仪用旧的X光胶片或者 Whatman 3MM 的过滤纸实验步骤展
SemiQuantitative－RTPCR
The RT-PCR method can be used not only to detect specific mRNAs but also to semi-quantitate their levels. Thus, one can compare levels of transcripts
用－PCR－分析连接反应的底物和产物
试剂、试剂盒 ddH2O Vent 缓冲液 Vent DNA 聚合酶 dNTP 引物 质粒 DNA
实时定量PCR时用的ROXrefence有什么作用
ROX是一种荧光染料，能够作为qRT-PCR的基准，也就是说在进行qRT-PCR时，扩增片段的荧光信号（一般用SYBR-Green）要根据ROX的荧光信号作标准化。ROX能够消除由于蒸发等原因导致的反应体系的变化造成的误差。
chipseq－扩增用的PCR引物是什么
PCR引物说通俗点就是一段基因片段，一般是在NCBI上查找的
用－PCR－分析连接反应的底物和产物
由 PCR 产生的合成 DNA 文库，可以经过酶切消化，连接到线性化的表达载体系统上。在这里所列的方案中，文库的 5’（NotⅠ）和 3'(ClaⅠ) 末端是不同的酶切位点，也用同样的酶切位点克隆进载体。可以用 PCR 分析线性化反应和连接反应的效率。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版）
刚合成的引物用降落PCR的原因分析
因为理论计算的TM值用来确定退火的温度只是一个参考呀,最合适的退火温度会因为各种原因而有所差异,就连PCR仪都会有影响的,我们实验室就是,好多都是在一台能拉出条带,而在另一台上就拉不出条带,或者相反的。降落(TD)PCR代表了一种完全不同的PCR优化方法。由于开始时的退火温度选择高于估计的Tm值,随
用－PCR－分析连接反应的底物和产物
试剂、试剂盒 ddH2OVent 缓冲液Vent DNA 聚合酶dNTP引物质粒 DNA仪器、耗材 琼脂糖凝胶电泳所需的试剂和设备热循环仪实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂ddH2O2. 酶和酶缓冲液10X Vent 缓冲液Vent DNA 聚合酶3. 核酸和寡核苷酸dNTP，各 20 mm
PfuDNA聚合酶PCR实验方法介绍
General AdvicePCR allows the production of more than 10 million copies of a target DNA sequence from only a few molecules. The sensitivity of this tec
标准PCR
· What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not onl
标准PCR
What's PCR? (Michael Blaber's Lab)Illustrated introduction to usr/localious aspects of PCR technique. It's very valuable not only for thos
PCR实验指导与常见问题分析2
Fig. 11. Example of the influence of extension temperature. Multiplex PCR with mixtrues A-B using two different PCR programs. Reactions on the right s
RNAi实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程
RNAi 实验中双链短RNA（dsRNA）制备过程，本实验方法来自于加州大学Jim教授实验，很权威！Procedure for the Generation of dsRNA for use in RNAi1. Design polymerase chain reaction (PCR ) prim
PCR实验指导与常见问题分析5
MgCl2 concentrationRelationship between MgCl2 and dNTP concentrationdNTP concentrations of about 200µM each are usually recommended for the Taq polyme
PCR实验指导与常见问题分析4
Fig. 25. Multiplex PCR of mixtures A-D comparing PCR programs with 2 (green) and 1 (yellow) minute extension time at 54° C annealing temperature. Comp
Basic－PCR
实验概要The following basic protocol serves as a general guideline and a starting point for any PCR amplification. Optimal reaction conditions (incubati
PCR实验指导与常见问题分析3
Influence of annealing temperature and number of loci amplifiedLike any other PCR, multiplex reactions should be done at a stringent enough temperatur
Colony－PCR－Protocol
1. Pull out eight glycerol stock plates from the –80oC freezer and set on bench top to thaw. Be sure to remove the foil seal before leaving the plates
PCR的下游应用
· Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products (Robert H. Cruickshank)· Agarose Gel Electrophoresis of PCR Products (Immunology Resourc
其它PCR方法
· Standard PCR Protocol (Molecular Biology Techniques Manual)The followings are described in detailRecommended Reagent ConcentrationsRecommend