旷场实验原理和方法步骤

【实验目的】观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。【实验器材】实验装置由旷场反应箱和数据自动采集和处理系统两部分组成,由上海欣软信息科技有限公司提供。大鼠旷场反应箱高30~40cm,底边长100cm,内壁涂黑,底面平均分为25个4cm×4cm小方格,正上方2 m处架一数码摄像头,其视野可覆盖整个旷场内部。旷场光照为全人工照明,可人为设定“白天”和“黑夜”,白天由两侧墙壁的4只节能灯发出约2001ux照度来模拟,夜晚由一侧墙的红外光源提供照明。实验人员和计算机等设备位于另一房间以减小对动物的干扰,实验室背景噪音控制在65dB以下。小鼠旷场反应箱高25~30cm,底边长72cm,内壁涂黑,底面(软件)平均分为64个小方格。数据自动采集和处理系统同上。【实验原理】旷场实验(open field test)又称敞箱实验,是评价实验动物在新异环境中自主行为、探究行为与紧张度的一种方法。以实验动物在新奇环境之中某些行为的发生......阅读全文

PCR技术原理、实验步骤和应用

 一、实验目的1.掌握聚合酶链式反应的原理。2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。二、实验原理PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术可在试

PCRDHPLC实验原理和步骤

【实验目的】1.了解PCR-DHPLC技术的原理。2.了解并熟悉PCR-DHPLC技术的步骤。【实验原理】DHPLC技术也称为WAVE核苷酸片段分析系统。利用高效液相色谱原理,PCR扩增后的DNA片段与缓冲液(TEAA)混合形成液相,流动相被高压驱动,通过一个DNA分离柱——DNA Sep柱

PCR技术原理、实验步骤和应用

一、实验目的1.掌握聚合酶链式反应的原理。2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。二、实验原理PCR技术,即聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年(1993年获诺贝尔化学奖)建立的。这项技术

DNA的定量实验原理和步骤

一、 实验原理核酸分子(DNA或RNA)由于含有嘌吟环和嘧啶环的共轭双键,在260 nm波长处有特异的紫外吸收峰,其吸收强度与核酸的浓度成正比,这个物理特性为测定核酸溶液浓度提供了基础。1 OD260相当于dsDNA 50 ug/ml,ssDNA 33 ug/ml和ssRNA 40 ug/ml。可以

年龄及性别对小鼠新物体再认能力和旷场行为的影响-一

摘要目的[ 研究年龄、性别对小鼠新物体再认(novel-object recognition)能力和旷场活动的影响,了解两类行为间的关系。方法[ 实验于2004-05在安徽省老年病研究所行为学实验室完成。入组的47只昆明小鼠被分成两组:青年组(七八月龄,12雄、11 雌)和老年组(17、

年龄及性别对小鼠新物体再认能力和旷场行为的影响-二

2结果2.1实验动物数量分析由于周期短,实验几乎不对动物造成应激、饥饿方面的影响及体力消耗,全部47只小鼠无中途脱失及死亡,所有动物的数据都进入了结果分析。2.2旷场实验结果  老年雌鼠和雄鼠的平均周边时间比各自的青年鼠显著性延长[F(1,21)=9.96,P<0.01;F(1,21)=8.42

贫血实验诊断方法和步骤

(1)确定有无贫血:根据RBC、Hb和Hct确定,以Hb和Hct最常用。1)成人诊断标准。2)小儿诊断标准:根据世界卫生组织资料和1986年联合国儿童基金会的建议为:出生10天内新生儿Hb小于l45g/L;1个月以上Hb小于90g/L;4个月以上Hb小于100g/L;6个月~6岁者Hb小于l10g/

长期高脂饮食对大鼠掠食行为(旷场实验)的影响及机制-一

[摘要] 目的:研究大鼠长期高脂饮食对其掠食行为的影响及机制。方法:将10只4周龄雌性SD大鼠随机均分为对照组和高脂组。对照组常规饲料饲养,高脂组以高脂饲料饲养,15周之后进行旷场实验、掠食行为观察,行为学观察结束后立即处死动物,采用免疫组织化学技术检测c-Fos蛋白在大鼠前扣带皮质的表达情况。

高架十字迷宫、明暗箱、旷场实验相关:高盐饮食对更年...

高架十字迷宫、明暗箱、旷场实验相关-高盐饮食对更年期焦虑小鼠海马表达的影响高盐饮食对更年期焦虑小鼠海马钾离子 - 氯离子共转运体 2、钠 - 钾 - 氯离子失转运体 1 表达的影响【摘 要】目的 研究高盐饮食对更年期焦虑症小鼠钾离子-氯离子共转运体 2( KCC2) 、钠-钾-氯离子共转运体 1(

长期高脂饮食对大鼠掠食行为(旷场实验)的影响及机制-二

1.2 方法1.2.1 高脂饮食模型建立将10只雌性大鼠随机分成两组,每组5只。对照组用普通饲料喂养15周,高脂组用自制高脂饲料喂养15周。所有大鼠在造模期间自由摄食和饮水,饲料和水每2日更换1次。1.2.2 行为学检测1.2.2.1 旷场实验旷场实验箱(长×宽×高:100 cm×100 cm×50

PCRSSP分析实验原理和步骤

PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端第一

PCRSSP分析实验原理和步骤

 PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质,设计3′端

PCRDGGE实验原理和操作步骤

【实验目的】 1.了解PCR-DGGE技术的原理。 2.了解并熟悉PCR-DGGE技术的步骤。 【实验原理】 变性梯度凝胶电泳(DGGE)是一种根据DNA片段的熔解性质而使之分离的凝胶系统。核酸的双螺旋结构在一定条件下可以解链,称之为变性。核酸50%发生变性时的温度称为熔解温度(Tm

减数分裂实验原理和步骤

 一、目的    学习生殖细胞的取材和染色体制片,认识减数分裂各时期的形态特征。二、原理 生物秀细胞实验论坛交流    减数分裂是形成生殖细胞的一种特殊方式的细胞分裂。它是遗传学中一个特别重要的事件,是维持大多数动植物品种染色体数目世代稳定传递的根本机制。同时,基因的分离、自由组合以及交换无不是

PCRSSP分析实验原理和步骤

PCR 序列特异性引物(sequence specific primer,SSP)分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法,也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。 [实验原理] 根据决定某等位基因的碱基性质,

PCRSSCP实验原理和操作步骤

【实验目的】1.了解PCR-SSCP技术的原理。2.了解并熟悉PCR-SSCP技术的步骤。 【实验原理】 PCR-SSCP是1989年日本Orita等创建的筛查突变的新技术。它是一种简单、快速、经济的点突变筛查手段。PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA,

免疫组化实验原理和步骤

  实验原理:   抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性,免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来,以此作为抗原或半抗原,通过免疫动物后获得特异性的抗体,再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的,因此还必须借助于组织化学的方法将抗原

DNA的重组连接实验原理和步骤

一、实验目的 用T4DNA连接酶将载体pBR322 EcoR Ⅰ-CIP处理的DNA片段,与目的基因5.4KbEcoR Ⅰ片段连接起来,构建体外重组DNA分子,同时学习几种DNA连接的方法。 二、实验原理 重组的DNA分子是在T4DNA连接酶的作用下,有Mg

cDNA的合成实验原理和操作步骤

一、实验目的掌握植物cDNA合成的原理和方法二、实验原理反转录酶主要用于体外cDNA的合成。目前最常用的反转录酶(reverse transcriptase) 有SuperscriptII、M-MLV和AMV等。它们具有依赖于RNA或DNA的DNA聚合酶活性和RNaseH酶活性,可以以RNA分子

噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤(二)

四、实验步骤 1、噬菌体的诱导和裂解液的制备 ( 1 ) 供菌体的活化与培养:取一环供体菌,接种于盛有 5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中, 37 ℃培养 16 h 后,吸 0.5 ml 菌液,接种于盛有 4.5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中,继续培养 4-6 h 。 (

噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤(一)

一、实验目的 以局限性转导为例来说明转导的基本原理,进一步验证 DNA是遗传物质,并初步掌握转导实验的基本方法。 二、实验原理与意义 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展,转导已成为基因精细结构分析的常用方法。 转导实验中常用的是λ噬菌

强迫游泳、悬尾、旷场实验相关抗郁丸对CUMS抑郁症大鼠行..

强迫游泳、悬尾、旷场实验相关-抗郁丸对CUMS抑郁症大鼠行为学及机理的影响摘要:目的 研究抗郁丸对慢性温和不可预见性应激(CUMS)抑郁症大鼠行为学及血清中甲状腺激素、细胞因子的影响,探讨抗郁丸治疗抑郁症的作用机理。方法 采用慢性温和不可预见性应激结合孤养方法构建CUMS大鼠模型。60只雄性大鼠随机

重组DNA分子的转化实验原理和实验步骤(一)

1实验原理DNA重组分子在体外构建完成后,必须导入特定的受体细胞,使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状,这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞,往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和H

重组DNA分子的转化实验原理和实验步骤(二)

1.1.4接合转化接合(Conjugation)是指通过细菌细胞之间的直接接触导致DNA从一个细胞转移至另一个细胞的过程。这个过程是由结合型质粒完成的,它通常具有促进供体细胞与受体细胞有效接触的接合功能以及诱导DNA分子传递的转移功能,两者均由接合型质粒上的有关基因编码。在DNA重组中常用的绝大多数

基因的PCR扩增实验原理、实验材料和操作步骤

实验原理单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下,可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA,寡聚核苷酸片段称为引物(Primer),合成的互补DNA称为产物DNA。双链DNA分子经高温变性后成为两条单链DNA,它们都可作为单链模板DNA,在相应的引物引导下,用

肿瘤细胞侵袭试验原理和实验步骤2

(3)NE+IFN-DMEM(-6M,50ng)NE---A液(1μg/μl,1mg/ml) 20.5μlIFN-γ(25ng/μl) 25 μlDMEM UP TO 100 ml过滤消毒,4℃保存(4)低血清DMEM培养基(上室)(5)20%FBS-DMEM培养基(下室)2、准备(1)溶胶,4℃过

Western-免疫印迹实验原理和操作步骤

[实验原理]Western免疫印迹(Western Blot)是将蛋白质转移到膜上,然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白,可用相应抗体作为一抗进行检测,对新基因的表达产物,可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶

免疫组化实验原理和步骤(二)

免疫组化问题解答1、染色过强 a 抗体浓度过高戒孵育时间过长 。降低抗体滴度、抗体孵育时间:室温1小时、或4度过夜 b 孵育温度过高超过37度。 一般在室温20-28度 c DAB显色时间过长戒浓度过高 显色时间不超过5-12分钟,以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a 操作过程中冲洗不充分 :

肿瘤细胞侵袭试验原理和实验步骤1

一、原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分,含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖,铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上,能在DMEM培养基中重建形成膜结构,这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um,而且膜孔都被Matrigel覆盖,细胞不能自由穿过,必须分泌