MDCK细胞培养
本人具有数年的细胞培养经验，期间经历了无数次的失败和成功，回想起来有苦也有甜，现在把中国疾病预防控制中心和我自己的经验结合起来，制作成MDCK细胞培养SOP，欢迎大家参阅：一、目的MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二、适用范围适用于疾控中心所有技术人员 。三、程序（一）生物安全要求实验室生物安全级别：BSL-1所有操作必须在BSL-1实验室的生物安全柜里进行。（二）材料1. 生长成片的MDCK细胞2. 无菌的T25细胞培养瓶3. D-MEM培养液（含有L-谷氨酰胺）4. 青、链霉素母液（10000 U/mL青霉素G；10000µg/mL硫酸链霉素），分装后保存于-20℃5. HEPES缓冲液，1M母液6. 胎牛血清7. EDTA-胰酶（0.05%胰酶，0.53mM EDTA-4Na），分装后保存于-20℃8. 7.5%牛血清白蛋白组分V......阅读全文
MDCK细胞培养
本人具有数年的细胞培养经验，期间经历了无数次的失败和成功，回想起来有苦也有甜，现在把中国疾病预防控制中心和我自己的经验结合起来，制作成MDCK细胞培养SOP，欢迎大家参阅：一、目的MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二
MDCK细胞培养所需材料和操作步骤
MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员，必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二、适用范围适用于疾控中心所有技术人员 。三、程序（一）生物安全要求实验室生物安全级别：BSL-1所有操作必须在BSL-1实验室的生物安全柜里进行。（二）材料1. 生长成片的MDCK
MDCK（NBL2）细胞，正常，狗肾细胞
MDCK(NBL-2)细胞，正常，狗肾细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室 环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养 基配制是减低污染之方法。2.如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（二）
用于MDCK和 Vero细胞的生物反应器 WAVE Bioreactor 系统由一个带有一次性塑料细胞培养袋的摇动平台组成，配备CO2 气体混合器 (CO2MIX20) 或WAVEPOD™控制塔用于控制pH、温度、氧气和混合。MDCK细胞在Cellbag-10 L和Cellbag-50
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（一）
摘要 WAVE Bioreactor 系统多用于悬浮细胞的培养。然而，用于细胞治疗和疫苗生产的多种细胞为贴壁依赖型的，需要一个可贴附的生长表面。在本研究中，Cytodex 微载体被应用在 CellbagTM 生物反应器中以扩增 Madine-Darby Canine Kidney
动物病毒毒力测定
实验方法原理 溶细胞性病毒的毒力与其致细胞病变的能力直接相关，固可用不同含量的病毒液接种敏感的宿主细胞培养物测定毒力。实验中病毒的毒力以其致细胞病变效应（cytopathic effect CPE）的程度确定，即观察病毒致细胞病变的最高和最低量，以半数细胞病变为病毒感染剂量。然而，实验中所能
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（五）
MDCK细胞的生长和放大（2% FBS） 为了研究在 Cellbag 生物反应器中 MDCK细胞扩增的可放大性，在两种不同大小的袋子之间比较最大细胞密度和细胞生长速率 Cellbag-10 L和 Cellbag-50 L。 袋子的工作培养体积采用最大工作体积的40%（即Cellbag-1
动物病毒毒力测定实验——TCID50－的测定方法
病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一，通常采用测定实验动物的半数致死量（50％ lethel dose，LD50）和测定细胞培养物的半数组织（细胞）培养物感染量（50％ tissue culture infectious dose，TCID50）来评估病毒的感染能力（毒力）。用细胞培养物测定病
生物工程中的无血清细胞培养
无血清培养基的出现是培养基发展历程上的一个里程碑，其一般是在合成培养基的基础上，引入成分完全明确的或部分明确的血清替代成分，使培养基能满足动物细胞培养的要求，又可有效的克服因使用血清所引发的问题。进入20世纪80年代后，新的无血清培养基不断问世，人们经过研究发现，只要在培养基中增加某些适于细胞生长的
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（四）
微载体用量为3 g/l的 Cytodex3，接种细胞密度为0.3×106细胞/ml。培养条件为37℃，pH 7.3，5% CO2，采用光纤溶氧电极监测溶氧水平。培养基含有 2% FBS。每小时取样并用结晶紫染色测定总细胞密度，上清中的悬浮细胞和死细胞用台盼蓝染色。MDCK细胞在接种后1 h
培养流行性感冒病毒的特性
常用鸡胚接种培养，初次分离接种羊膜腔为最佳，传代适应后可移种尿囊腔。细胞培养一般用原代猴肾细胞（PMK）或犬肾传代细胞（MDCK）。利用红细胞凝集试验确定病毒的存在。
关于Vero细胞的基本信息介绍
非洲绿猴肾细胞(Vero细胞）是非洲绿猴肾细胞，是一种异倍体细胞，经猕猴肾细胞培养衍化后产生的，和著名的Hela细胞系、犬肾细胞(MDCK细胞)一样是常用的细胞系。
流感病毒实验室检查技术
一、标本的采集与处理（一）标本的采集1、病毒分离标本的采集病毒分离成功与否很大程度上取决于采集标本的质量，及其保存、运输等环节。多数标本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次为气管和支气管分泌物，有时也采用肺活检材料等。标本采集后应立即放入适当的采样液中低温保存，常用的采样液为：普通肉汤，pH7.4-7.6的
两款重磅大单品疫苗获临床批件－戈美疫苗抢占创新高点
艾美疫苗作为国产疫苗身体力行的创新先行者，在密集申报大年的岁尾，再传捷报。据公司12月19日公告，公司的两个大单品疫苗新技术路线悬浮培养MDCK细胞流感疫苗、第二代高效价吸附破伤风疫苗，均已获得国家药品监督管理局《药物临床试验批准通知书》。这两款产品，均具有创新技术优势，彰显了艾美疫苗领跑创新疫
WAVETM－生物反应器中的－Cytodex™－微载体细胞培养工艺（三）
结果和讨论 微载体培养的最佳工作体积和混合速度的确定当我们使用 20%到 80%的Cellbag最大工作体积时，微载体培养可以产生均匀的微载体混合分布（图 2）。图 2. 微载体培养的最佳工作体积 在工作体积小于 20%的 Cellbag 最大工作体积时，部分微载体有可能粘在 Cel
细胞培养知识（二）
4. 配制培养基之生长测试 4.1. 材料： 4.1.1. MDCK cell (ATCC CCL-34 或CCRC 60004) 4.1.2. 6-well TC plate (or 35 mm TC dish) 4.1.3. methanol 4.1.4. glacial acetic acid
细胞培养实验——悬浮细胞培养
实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶／EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安
无血清细胞培养基是怎么出现的？
无血清细胞培养基，顾名思义，就是培养基中没有添加血清，在使用时也不需要添加血清或血清替代物就可直接用于细胞培养的培养基。有人说，DMEM、MEM、DMEM/F12、1640、，难道不是无血清培养基吗？它们里面也没有添加血清啊？这就有点抬杠了。尽管它们没有添加血清，但它们不加血清细胞也不长啊！那无血清
细胞培养实验——贴壁细胞培养
实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶／EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒，打开安瓿，用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm
细胞培养技术的细胞培养方式
高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（in vivo）的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外（in vitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动，特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格，稍有不
动物细胞培养——细胞培养介绍
实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性；在复苏、传代、冻存前培养状况的评估；对新的或实验性情形反应的评估；确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观；数码或胶片相机的使用；灭菌物品和污染物间的区别，健康的和不健康的培养物间的区别；培养物生长阶段的评估。监
细胞营养产品在制备无血清/低血清培养基中的应用
基础培养基 + 超滤植物源营养物 = 个性化低成本无血清/低血清培养基 如此简单高效！CHO细胞专用复合添加物Sheff-CHO系列专为CHO细胞优化研发；全球独家非动物源复合添加物系统；独家超滤系统过滤；有添加微量元素、无蛋白等多种产品，满足不同工艺需求；全面改善细胞表现，增强细胞活力，提高蛋白
细胞培养
细胞培养是一种常用的实验室技术，其中原核或真核细胞在受控条件下生长。大规模哺乳动物细胞培养被广泛用于生物技术中，特别是用于生产疫苗，蛋白质，酶，抗体和激素。细胞培养还用于许多研究**域，特别是在制药**域，其中将细胞用作研究许多疾病（例如癌症或心脏病）的模型。细胞用于靶标鉴定和验证，基于细胞的测定法
小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术
实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步，是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研
巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍
常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好，无毒，利于细胞粘附和生长的材料，常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶：用于储存各种配制好的培养液、血清等液体，常用规格有500ml、250ml、100ml等几
细胞培养细胞培养的具体步骤
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中，加入10ml预热的DMEM完全培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmX2min，弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗，弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基，轻轻吹打，接种于10cm盘中，在含5
细胞培养基本技术概述（二）
培养基 1. 液体培养基贮存于4 oC 冰箱，避免光照，实验进行前放在37 oC 水槽中温热。 2. 液体培养基(加血清) 存放期为六个月，期间glutamine 可能会分解，若细胞生长不佳，可以再添加适量glutamine。 3. 粉末培养基配制(以1 升为例)： 3.1. 细胞培
骨骼肌细胞培养和肌细胞培养
骨骼肌细胞培养 1．杀死动物，无菌取大腿肌组织，切成0.3～0.5厘米小块。 2．用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25％胰蛋白酶消化，无菌纱网或纱布滤过，合成培养基加10％小牛血清培养，为促进分化可加1％的胎汁。 3．细胞接种量为2×106/皿，接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化
细胞培养细胞培养的一般过程
一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌
特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验
实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质，如细胞长成片之后，让细胞片与底物脱离，更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时，则细胞片能卷聚成球体形，成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1. 琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶，每