动物病毒毒力测定实验——TCID50的测定方法
病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一,通常采用测定实验动物的半数致死量(50% lethel dose,LD50)和测定细胞培养物的半数组织(细胞)培养物感染量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)来评估病毒的感染能力(毒力)。用细胞培养物测定病毒的 TCID50 较实验动物的 LD50 简便、经济,且易控制实辁条件,加之细胞系的同质性高,敏感性比较一致,沒:有个体间的遗传差异。所以本实验介绍 TCID50 的测定方法。实验方法原理溶细胞性病毒的毒力与其致细胞病变的能力直接相关,固可用不同含量的病毒液接种敏感的宿主细胞培养物测定毒力。实验中病毒的毒力以其致细胞病变效应(cytopathic effect CPE)的程度确定,即观察病毒致细胞病变的最高和最低量,以半数细胞病变为病毒感染剂量。然而,实验中所能观察到的是不同稀释病毒致细胞病变的定性结果......阅读全文
动物病毒毒力测定实验——TCID50-的测定方法
病毒感染能力测定是评估其毒力的常用方法之一,通常采用测定实验动物的半数致死量(50% lethel dose,LD50)和测定细胞培养物的半数组织(细胞)培养物感染量(50% tissue culture infectious dose,TCID50)来评估病毒的感染能力(毒力)。用细胞培养物测定病
动物病毒毒力测定
实验方法原理 溶细胞性病毒的毒力与其致细胞病变的能力直接相关,固可用不同含量的病毒液接种敏感的宿主细胞培养物测定毒力。实验中病毒的毒力以其致细胞病变效应(cytopathic effect CPE)的程度确定,即观察病毒致细胞病变的最高和最低量,以半数细胞病变为病毒感染剂量。然而,实验中所能
病毒TCID50测定(组织半数感染量)方法
实验概要本实验介绍了病毒TCID50测定(组织半数感染量)方法的操作步骤及注意事项。实验步骤1. 准备细胞取出一块细胞培养板,每个孔大约传8000~10000个细胞(一个T25瓶的细胞消化后加10ml培养液正好传一块96孔板,要传匀)。每个孔的细胞铺成单层大约60%丰度即可接种病毒(下午传好板第二天
怎样测定药剂的毒力
一种有效的药剂作用于生物体后,生物体必然要产生相应的反应。在其他条件固定时,这种反应与该药剂的剂量相关。严格地讲,剂量应该是生物个体或生物单位体重所接受的有效成分的量。但由于种种原因,在一般毒力测定中不易得到准确的剂量,尤其是以生物群体为施药对象时,更是如此。所以,有时生物测定中所用药剂的浓度和处理
杀线虫剂的毒力测定方法有哪些
植物线虫病害在世界范围内广为为害,并严重威胁农业生产。目前防治线虫病害的农药品种少、毒性高、用量大,且主要依赖进口,因此,测定创制化合物的杀线虫活性是发现优秀杀线虫剂的关键。现在的一般筛选方法是用活体筛选。一般步骤是:(一)供试线虫的选择供试植物线虫需满足易培养,繁殖量大,生活史短。其中,根结线虫属
病毒滴度的概念
也即病毒的毒力,或毒价,衡量病毒滴度的单位有最小致死量(MLD)、最小感染量(MID)和半数致死量(LD50),其中以LD50最常用。它是指在一定时间内能使半数实验动物致死的病毒量。然而,病毒对实验动物的致病作用不一定都以死亡为标志,例如以感染发病作指标,则可以半数感染量(ID50)测定;此外,当实
病毒的培养方法实验——动物接种法
实验方法原理注意选择动物种类,年龄。按病毒侵袭部位的不同,选择适宜的接种途径,例如脑炎病毒以注射脑内最敏感。接种后经一定潜伏期,动物发病或死亡即进行解剖。根据动物的症状表现,器官病理改变,受染脏器组织悬液能在同种动物进行连续传代,并排除其他微生物污染的可能性等,即可证明有病毒的增殖。实验材料小白鼠实
动物脂肪含量测定方法比较
EchoMRI体成分分析仪的ZL技术,使其在动物脂肪含量测定、体成分分析研究中优于DXA、CT、MRI、全身电导率发等传统方法。肥胖症发生率正逐年增加,并有加速提高的趋势。肥胖症长伴发糖尿病、脂肪肝、血脂紊乱、高血压、冠心病等多种慢性疾病,是严重影响人们健康和生活质量的疾病之一,已成为世界各国面临的
动物组织中喳诺酮类残留量的测定方法实验
实验材料动物组织试剂、试剂盒乙酸-乙腈正己烷磷酸盐-三乙胺缓冲液仪器、耗材相色谱条件色谱柱离心管注射器实验步骤1. 前处理 称取约2 g解冻试样,切成薄片并放入50 mL离心管中,加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液,均质1 min后放入超声波池中超声3 min, 4500 r/min离 心5 mi
动物组织中喳诺酮类残留量的测定方法实验
实验材料动物组织试剂、试剂盒乙酸-乙腈正己烷磷酸盐-三乙胺缓冲液仪器、耗材相色谱条件色谱柱离心管注射器实验步骤1. 前处理 称取约2 g解冻试样,切成薄片并放入50 mL离心管中,加入20 mL 1%乙酸-乙腈溶液,均质1 min后放入超声波池中超声3 min, 4500 r/min离 心
动物组织中喳诺酮类残留量的测定方法实验
高效液相色谱法 实验材料 动物组织 试剂、试剂盒
艾滋病病毒毒力的进化
一项研究提示,艾滋病病毒的毒力可能随着时间推移而衰退,这可能是由于对抗逆转录病毒疗法(ART)获取的增加,以及让艾滋病病毒规避针对它而产生的最有效的免疫应答的病毒突变的积累。为了评估针对艾滋病病毒的自然免疫以及增加抗逆转录病毒疗法(ART)对艾滋病病毒毒力的影响,R. P. Payne及其同事研
病毒感染力的滴定
实验概要本实验介绍了病毒感染力的滴定(TCID50的测定)。有助于了解病毒感染力测定的几种常用方法,掌握半数细胞培养物感染量TCID50的操作步骤、计算方法及含义。实验原理半数致死量LD50( 50% lethal dose):用动物或鸡胚来检测半数鸡胚感染量EID50(egg 50% infect
白喉棒状杆菌毒力实验_琼脂平板毒力试验
实验方法原理毒素与抗毒素在琼脂内扩散相遇,当其比例适合时可形成肉眼可见的特异性沉淀线。本试验法代替动物皮内试验,其优点为简便,不需动物,且与动物试验结果基本一致。实验步骤取磷酸盐蛋白琼脂11ml加热溶解,待冷却至50 ℃倾入已灭菌的7.5 cm直径的平皿中。 待凝固后,放入37℃温箱约一小时使培养基
实验动物实验标本的采集实验——动物采血方法
实验材料实验动物试剂、试剂盒消毒液仪器、耗材注射器实验步骤(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:适用于少量采血,如制作血涂片、白细胞计数等。动物麻醉后,将尾尖剪去约 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出。小鼠可每次采血约 0. 1 ml, 大鼠约 0.4 ml。
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理 本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料 痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病
动物病毒的鸡胚培养实验
实验方法原理本实验用痘苗病毒和鸡新城疫病毒接种鸡胚。痘苗病毒适宜于在绒毛尿囊膜上生长,经培养后,产生肉眼可见的白色痘疱样病变,似小结节或白色小片云翳状。鸡新城疫病毒适宜接种在尿囊腔和羊膜腔内,生长后,鸡胚全身皮肤出现出血点,以脑后最显著。实验材料痘苗病毒(Vavvinia virus)鸡新城疫病毒(
50%终点法测定病毒滴度实验
实验方法原理50% 终点 (50% endpoint) 法是将病毒悬浮液经一系列稀释后,接种至动物、鸡胚或培养成单层的细胞,将每个稀释度造成的动物、鸡胚致死量或细胞病变做成曲线,找出造成 50% 动物、鸡胚死亡或细胞病变的终点稀释度。 LD50 (50 % Lethal dose) 为造成 50%动
50%终点法测定病毒滴度实验
实验方法原理 实验材料 病毒试剂、试剂盒 含 2%小牛血清的 Eagle's 维持液仪器、耗材 细胞培养箱、细胞培养板实验步骤 1. 制备细胞 先制备好单层细胞培养物,在低倍显微镜下观察,挑选生长良好的细胞,按「传代细胞培养」法进行,将细胞单层洗涤、消化、计数。配制所需浓度的细胞悬液
实验室水分测定方法蒸馏法测定水分的原理
把不溶于水的有机溶剂和样品放入蒸馏式水分测定装置中加热,试样中的水分与溶剂蒸汽一起蒸发,把这样的蒸汽在冷凝管中冷凝,由水分的容量而得到样品的水分含量。
病毒滴度的测定
稀释计数法滴度单位:TU/ml,指每毫升中含有的具有生物活性的病毒颗粒数。”TU”为”transducing units”的缩写,中文为“转导单位”,表示可以感染并进入到靶细胞中的病毒基因组数。第一天 细胞准备将生长状态良好的293T细胞消化计数后稀释至1×105/ml,加入96孔板,100µl/孔
水分测定的测定方法
包括:卡尔·费休水分测定、库仑水分测定、露点水分测定等一.卡尔费休水分测定:卡尔费休法简称费休法,是1935年卡尔·费休(Karl·Fischer)提出的测定水分的容量分拆方法。费休法是测定物质水分的各类化学方法中,对水最为专一、最为准确的方法。经过不断改进,提高了准确度,扩大了测量范围,已被列为许
尿素测定的测定方法
(1)酶偶联速率法(尿素酶法偶联谷氨酸脱氢酶) 适于自动化分析,注意氨污染。 (2)二乙酰一肟显色法(Fearon反应) 尿素与二乙酰一肟热强酸溶液中生成红色复合物,不稳定试剂腐蚀性强现临床少用。
测定动物源性食品中激素残留量实验
HPLC-MS/MS法 实验材料 动物组织 试剂、试剂盒
PFU、MOI、TCID50,你还傻傻搞不清吗?
PFU:plaque forming unit,空斑形成单位。感染性滴度的单位一般表示为PFU/ml。由于测定pfu往往重复性较差,因此近些年许多研究又开始采用TCID50方法来计算病毒的感染单位。因此建议也可使用TCID50法。 MOI :multiplicity of infection,
白喉棒状杆菌毒力实验
实验方法原理 毒素与抗毒素在琼脂内扩散相遇,当其比例适合时可形成肉眼可见的特异性沉淀线。本试验法代替动物皮内试验,其优点为简便,不需动物,且与动物试验结果基本一致。实验步骤 取磷酸盐蛋白琼脂11ml加热溶解,待冷却至50 ℃倾入已灭菌的7.5 cm直径的平皿中。待凝固后,放入37℃温箱约一小时使培养
动物的注射方法实验
实验方法原理 实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 灭菌生理盐水仪器、耗材 注射器(1 ml)6 号针头消毒煮沸器碘酒棉花75% 酒精棉花消毒干棉花实验步骤 1. 注射器的准备与消毒注射器与针头一般用高压蒸气灭菌或干热灭菌比较彻底,而且可以预先准备好,但也可用煮沸消毒法,不过消毒后不能久放。此处主要介绍煮沸
动物实验的常用方法
在医学教学、科研和医学工作中,不论是从事基础医学的还是临床医学、预防医学,都需要用实验动物来进行各种实验。通过对动物的实验的观察和分析,来研究和解决医学上存在的许多问题,动物实验方法已成为医学科学研究和教学工作中必不可少的重要手段。动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一
实验动物的处死方法
实验动物的处死方法很多,应根据动物实验目的、实验动物品种(品系)、以及需要采集标本的部位等因素,选择不同的处死方法。无论采用哪一种方法,都应遵循安乐死的原则。安乐死是指在不影响动物实验结果的前提下,使实验动物短时间无痛苦地死亡。处死实验动物时应注意,首先要保证实验人员的安全;其次要确认实验动物已经死
实验动物的麻醉方法
1.全身麻醉 (1)吸入法 用一块圆玻璃板和一个钟罩或一个密闭的玻璃箱作为挥发性麻醉剂的容器,多选用乙醚作麻药。麻醉时用几个棉球,将乙醚倒可其中,迅速转入钟罩或箱内,让其挥发,然后把待麻醉动物投入,约隔4-6分钟即可麻醉,麻醉后应立即取出,并准备一个蘸有乙醚的棉球小烧杯,在动物麻醚变浅时给套在鼻