硝酸纤维素膜(NC膜)的简介和生产原理

概念硝酸纤维素膜(nitrocellulose filter membrane,简称NC膜),在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处。NC膜是生物学试验中最重要的耗材之一。NC膜的生产原理匀浆配比购买回来的原料硝酸纤维素粒子是一种非常普遍的有机化学物,溶解形成混浆,在该浆体内,通过加入一定比例的试剂来调整最后形成的膜的性质,一般主要包含表面活性剂/高分子聚合物/盐离子/成型剂等溶解的一个缓冲体系内。不同的厂家加入的溶液配方不一样,导致了产品的差异。滚筒铺膜配好的匀浆通过滚筒,形成了一张薄膜,平摊在十分光滑的平面载体上。过程与造纸非常相似。成型当匀浆内的成型剂开始挥发,膜逐步干燥成型。同时在这个过程中由于温度比较高,有些厂家在这个过程采取了在密闭腔体内成型,同时补充配方溶液的形式,来避免一些有效成分的蒸发。切割通过以上步骤生产出来的膜是呈一个宽度极大的产品,宽度的大小直接和滚筒的大小相关,滚筒越大生产越方便,......阅读全文

影响蛋白与硝酸纤维素膜结合的四个主要方面

1、用于溶解捕获试剂的缓冲液2、膜本身3、捕获试剂本身4、蛋白结合时的周围环境(主要指湿度) 缓冲液的使用合适的缓冲液必需能够溶解捕获蛋白以达到应用所需浓度,并能保持稳定(换言之,即溶解蛋白并维持其结合能力)。要获得最佳的结合意味着创造利于蛋白分散于固相的最佳条件。随着捕获蛋白不同,蛋白与膜结合的优

Western-bloting-技术

一、实验目的与原理Western bloting技术是用来检测蛋白表达的特定的灵敏的方法,由蛋白质的SDS-PAGE、电转及杂交几部分组成。杂交技术主要有NC膜封闭,靶蛋白与第一抗体的反应,结合靶蛋白的一抗和二抗的反应,显色等组成。将凝胶上的蛋白质转移到NC膜上,用其他蛋白作为封闭液,将膜上余下的其

关于Southern杂交的转膜的介绍

  即将凝胶中的单链DNA片段转移到固相支持物上。而此过程最重要的是保持各DNA片段的相对位置不变。DNA是沿与凝胶平面垂直的方向移出并转移到膜上,因此,凝胶中的DNA片段虽然在碱变性过程已经变性成单链并已断裂,转移后各个DNA片段在膜上的相对位置与在凝胶中的相对位置仍然一样,故而称为印迹(blot

western-blot的实验原理

Western Blot与Southern印迹杂交或Northern印迹杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品(跑PAGE 胶的原理你懂吧~~~),转移到固相载体(硝酸纤维素膜NC膜)上

Southern-Blot杂交的原理、步骤及应用

原理Southern印迹杂交技术是分子生物学领域中最常用的具体方法之一。其基本原理是:具有一定同源性的两条核酸单链在一定的条件下,可按碱基互补的原 则形成双链,此杂交过程是高度特异的。由于核酸分子的高度特异性及检测方 法的灵敏性,综合凝胶电泳和 核酸内切限制酶分析的结果,便可绘制出DNA分子的限制图

关于斑点杂交的基本信息介绍

  斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

什么是斑点杂交?

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

斑点杂交的技术特点和应用

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

斑点杂交的技术特点

斑点杂交是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜、NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。

转膜时甲醇的作用

  转膜  将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如 NC 膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白转移,所

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧(二)

不同秒数的膜对反应有什么影响呢?首先,我们分析一下液体在膜上的运动过程. 一张长度为4cm的膜, 每隔1cm做一个标记, 当液体运动过标记处时记录时间点. 那么你将会发现液体在膜上的运动是呈减速前行的. 而两张不同秒数的膜(例如135s, 180s)在同一时间标记点处的运动速度不同.这个试验

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧1

硝酸纤维素膜又称为NC膜, 在胶体金试纸中用做C/T线的承载体,同时也是免疫反应的发生处.所以NC膜成为该试验中最重要的耗材,而由于其属于非标准器件,基本上每个项目开始阶段都会遇到如何选择合适的NC膜的问题.同时也存在是否要对NC膜进行后期处理及如何处理的讨论. 一. NC膜的生产原理这个虽然看上去

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧2

五.膜的深入探讨和应用技巧从本节开始,我们开始对膜进行深入讨论和谈一些应用技巧.1. 蛋白与膜的结合原理蛋白与膜的结合原理, 已知的结合力包括疏水作用力\H键\静电作用力等,确切的结合原理并不明确,主要靠假说来支撑.主要有两种假说:1) 首先两者靠静电作用力结合, 然后靠H键和疏水作用来维持长时间结

制作胶体金试纸的硝酸纤维素膜选择及应用技巧(三)

2. 膜对结合的影响1)膜孔径有些技术人员倾向使用膜孔径来区分不同的膜,但是请注意这只仅仅限于同一厂家的产品,如果是不同厂家的产品,这种比较是无意义的. 膜孔径与层析速度的关系,已在上文描述. 随着膜孔径减小,膜的实际可用表面积递增,膜结合蛋白的量也递增. 估量表面积的参数为表面积比率(实际可用表面

蛋白质的电转实验

很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80 μg/cm2。实验方法基本方案 实验材料 蛋白质  试剂、试剂盒 转移缓冲液 甲醇 电极缓冲液 

蛋白质的电转

实验概要很多膜可作为蛋白质电转移的固相支持物,如重氮化纤维素膜(DPT,DBM)、DEAE-纤维素膜、尼龙膜等,但用的最多的还是硝酸纤维素膜(NC膜),该膜与蛋白质以非共价的疏水作用形式结合,结合能力约为80μg/cm2。与其它膜相比,NC膜具有不要预先活化,对转移物质生物活性影响不大,能应用多种染

旋涡气泵的简介和原理

  旋涡气泵是高压鼓风机的一种,也叫环形风机,其工作原理于早在第二次工业革命时代,为顺应工业对流体控制及气动原件的的需要,在德国,日本,美国前后泛起了轻松的离心式高压风机,早期人们对此界说为离心风泵  旋涡气泵的叶轮由数数片叶片组成,它类似庞大的气轮机的叶轮。叶轮叶片中间的空气受到了离心力的作用,向

照度仪的简介和原理

  照度仪是用来测量光线强弱等级的专用设备。在某些特定的环境对光的照度是有严格要求的,如用人工对药品的检验就对光的照度有严格的要求。  照度仪的原理  用锗光电池作探头,由于光的强度不同光电池产生的电流就不同,再把这个电流进行直流放大,再经过数模转换电路把直流信号变成直截反应光照强弱的数字信号显示出

冰点仪的简介和原理

  定义   冰点(凝固点)(freezing point)是在一定非固体物质,一定压力下等条件,变为固态,称之为冰点或凝固点.  淡水在0℃结冰,叫做冰点。生牛乳的冰点是一个不确定的温度。因为,生乳中含有大量的无机盐,蛋白、脂肪。所以牛乳的冰点的变化与牛乳中的成份和密度有密切的关系,正常牛奶的冰点

普通晶闸管的简介和原理

  普通晶闸管是一种半可控大功率半导体器件,出现于70年代。是pnpn四层半导体结构,普通晶闸管它有三个极:阳极,阴极和门极; 晶闸管具有硅整流器件的特性,能在高电压、大电流条件下工作,它的出现使半导体器件由弱电领域扩展到强电领域。  基本工作原理  普通晶闸管t在工作过程中,它的阳极a和阴极k与电

膜性肾病的简介

  膜性肾病是一个病理形态学诊断名词,是导致成人肾病综合征的一个常见病因,其特征性的病理学改变是肾小球毛细血管袢上皮侧可见大量免疫复合物沉积。临床表现为肾病综合征(大量蛋白尿、低蛋白血症、高度水肿、高脂血症),或无症状、非肾病范围的蛋白尿。

葡萄膜病的简介

   葡萄膜病  葡萄膜包括包括三部分虹膜、睫状体及脉络膜。虹膜为围绕黑色瞳孔的彩色膜,瞳孔尤如照相机的光圈,可以开大和缩小。睫状体内的肌肉,可使晶状体变厚或变薄,因此远处和近处的物体都能看清楚。脉络膜衬于眼球内面,前方起于睫状体,向后延伸至眼底后极部的视神经。葡萄膜疾病以炎症最多见,称葡萄膜炎,分

膜脂的功能简介

  ◆构成膜的基本骨架,去除膜脂,则使膜解体;  ◆是膜蛋白的溶剂,一些蛋白通过疏水端同膜脂作用,使蛋白镶嵌在膜上,得以执行特殊的功能;  ◆膜脂为某些膜蛋白(酶)维持构象、表现活性提供环境,一般膜脂本身不参与反应(细菌的膜脂参与反应);  ◆膜上有很多酶的活性依赖于膜脂的存在。有些膜蛋白只有在特异

胶体金免疫层析法快速检测腹泻性贝毒软海绵酸的研究-1

摘 要:腹泻性贝毒是一类分布较广的赤潮毒素,严重威胁到人类的健康和安全。本文用胶体金标记利用细胞融合技术制备的抗软海绵酸单克隆抗体,使用卵清蛋白合成高偶联比的包被抗原,以硝酸纤维素膜为载体,利用免疫层析技术原理,建立了快速检测软海绵酸的免疫层析试纸条方法。方法检出限12 ng/ mL (0

Southern-Blot实验原理及方法

实验原理:Southern Blot是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上,经干烤或者紫外线照射固定,再与相对应结构的标记探针进行杂交,用放射自显影或酶反应显色,

简介喷射泵的简介和工作原理

  喷射泵是一种流体动力泵。流体动力泵没有机械传动和机械工作构件,它藉由另一种工作流体的能量做动力源来输送低能量液体,用来抽吸易燃易爆的物料很安全。喷射式真空泵是利用通过喷嘴的高速射流来抽除容器中的气体以获得真空的设备,又称射流真空泵。在化工生产中,常以造成真空为目的。工业用的喷射泵,又称 射流泵和

抗体的生产原理

抗体产生于体液免疫过程。首先是体外异物进入体内,穿过机体的前两层防御(非特异性免疫,就是皮肤、黏液,溶菌酶)。然后异物被巨噬细胞的吞噬,并且经巨噬细胞处理在表面暴露出抗原活性物质。经过巨噬细胞的呈递,B细胞与抗原接触并且B细胞表面的抗原受体受到异物表面的抗原活性物质的刺激。B细胞开始大量增殖分化,一

生物膜简介

生物被膜是微生物有组织生长的聚集体。细菌不可逆的附着于惰性或活性实体的表面,繁殖、分化,并分泌一些多糖基质,将菌体群落包裹其中而形成的细菌聚集体膜状物。单个生物被膜可由一种或多种不同的微生物形成。通过对微生物在固体表面定植中起支配作用的特殊现象进行了大量研究,逐渐认识到这些微生膜的形成包含复杂的理化

膜厚仪简介

  膜厚仪又名膜厚测试仪,分为手持式和台式二种,手持式又有磁感应镀层测厚仪,电涡流镀层测厚仪,荧光X射线仪镀层测厚仪。手持式的磁感应原理是,利用从测头经过非铁磁覆层而流入铁磁基体的磁通的大小,来测定覆层厚度。也可以测定与之对应的磁阻的大小,来表示其覆层厚度。

吸热膜和反射膜的区别

吸热膜的吸热胶可以将热能(太阳光谱中的红外线)吸收,但是吸热胶吸收的热量很容易达到饱和,当吸热胶吸收的热量饱和以后,吸热胶会将吸收是热量重新以远红外的方式辐射到车内,使人感觉到更加燥热。而反射膜是将红外线反射到车外,不存在二次辐射的问题,从而在根本上解决隔热的问题。