Nature子刊:首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
生物大分子标记技术是生物分子成像的关键。在科学历史上,人们利用荧光蛋白“点亮”细胞内蛋白质, 实现了生命动态过程中蛋白质分子的可视化。荧光蛋白技术是当代生物科学研究中最重要的研究工具之一;在短短十余年内,其研究即被授予诺贝尔奖。RNA同样具有独特的结构、种类繁多的生物学功能以及复杂的时间空间分布。 与蛋白质相比,RNA种类更多,大部分种类结构功能尚未鉴定,被称为基因组中的“暗物质”。不同种类的RNA及其修饰形式的鉴定、功能与调控研究现已经成为了国际前沿。RNA研究也迫切需要一种类似于荧光蛋白这样的颠覆性标记技术,这是深入研究RNA功能机制极为有用的工具。 国际权威学术期刊《Nature Biotechnology》杂志以“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”为题,在线报道了华东理工大学生物反应器工程......阅读全文
BrdU标记法检验细胞增殖
1、细胞以1.5×105 /ml细胞数接种于直径35ml培养皿中(内放置一盖玻片),培养1天,用含0.4%FCS培养液同步化3天,使绝大多数细胞处于G0 期。 2、终止细胞培养前,加入BrdU(终浓度为30μg/L),37℃,孵育40min。 3、弃培养液,玻片用PBS洗涤3次。 4、甲
细胞表面标记的检测技术
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP(Al
细胞表面标记的检测技术
碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化染色技术检测淋巴细胞表面标记 活细胞免疫荧光技术-流式细胞仪标本的制备 实验方法原理 APAAP(Al
什么是细胞学标记?
细胞遗传标记(Cytological Genetic Markers )是指对处理过的动物个体染色体数目和形态进行分析,主要包括:染色体核型和带型及缺失、重复、易位、倒位等。一个物种的核型特征即染色体数目、形态及行为的稳定是相对的,故可作为一种遗传标记来测定基因所在的染色体及在染色体上的相对位置
用核糖核酸酶和放射性标记的RNA探针对RNA作图
核糖核酸酶保护分析用于度量特异性 mRNA 的丰度以及为它们的拓扑异构特征作图。这种方法包括测试 RNA 与互补的放射标记的 RNA 探针(核糖探针)杂交,然后未杂交的序列被一种或几种单链特异性的核糖核酸酶裂解。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理核糖核酸酶保护分析用于度量特
免疫荧光共标记怎么计算共标记的细胞个数
共定位的定义:共定位是对样品内两种荧光标记的信号共同分布的位置进行分析。 共定位就如字面意思上所说的,只能够表明蛋白A和B都在此细胞有表达,并且在同样的细胞内位置/细胞器。相关短语:共定位通道 PDM Channel 细胞共定位 Cellular co localization 细胞内共定位信息 c
特定细胞类型标记的细胞核分离
从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因,如癌细胞与正常细胞,或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell),人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,
细胞化学词汇互补RNA
中文名称:互补RNA英文名称:complementary RNA定 义:能与另一条核酸(DNA或RNA)链互补的RNA分子。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA沉默
中文名称:基因沉默外文名称:RNA silencing定 义:基因沉默是指在真核生物(植物、动物、真菌)中保守的由双链RNA诱导的鉴定和破坏其细胞质中异常变异或过表达的RNA的一种机制。
细胞化学词汇RNA靶向
中文名称:RNA靶向英文名称:RNA targeting定 义:(1)针对RNA分子设计的一种定向作用技术。包括一些小分子化合物(如抗生素)、反义核酸、反式作用核酶、适配体、干扰小RNA等的应用。(2)由于RNA分子本身具有较大的柔性,能专一地与RNA、DNA和蛋白质相互作用,而成为一种特异的靶向
细胞化学词汇分支RNA
中文名称:分支RNA英文名称:branched RNA定 义:通过直链RNA中特定部位的2′-羟基与另一直链RNA(或同一RNA分子)的末端5′-磷酸基形成磷酸酯键而得到的RNA,见于Ⅱ型内含子自剪接和真核信使核糖核酸(mRNA)内含子剪接的中间体。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸
细胞化学词汇RNA复制
中文名称:RNA复制外文名称:RNA replication定 义:RNA复制是以RNA为模板合成RNA的过程,是除了逆转录病毒以外的其他RNA病毒的复制方式。有些生物,像某些病毒的遗传信息贮存在RNA分子中,当它们进入宿主细胞后,靠复制而传代,当它们以RNA模板时,在RNA复制酶作用下
细胞化学词汇微RNA
中文名称:微RNA外文名称:microRNAs别 名:又译小分子RNA解 释:内生的长度约20-24个核苷酸小RNA所属分类:真核生物定 义:微RNA(microRNAs;miRNA,又译小分子RNA)是真核生物中广泛存在的一种长约21到23个核苷酸的RNA分子,
细胞化学词汇核RNA
中文名称:核RNA英文名称:nuclear RNA定 义:细胞核内的RNA。如核内不均一RNA、核小RNA、核仁小RNA等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA输出
中文名称:RNA输出英文名称:RNA export定 义:真核生物RNA从细胞核输送到细胞质的过程。游离RNA及其前体是不能直接通过核孔的,需要与许多RNA结合蛋白生成核糖核蛋白复合体,才能输出到细胞质行使功能。不同种类RNA需要不同的结合蛋白。核内的信使核糖核酸在切除内含子后才能输出。应用学科:
细胞化学词汇间隔RNA
中文名称:间隔RNA英文名称:spacer RNA定 义:初级转录物中由基因间序列编码产生的RNA序列。如哺乳动物核糖体核糖核酸(rRNA)的初级转录物位于18S rRNA和28S rRNA间的一段序列,这些序列不出现在成熟的rRNA中。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级
细胞化学词汇RNA重组
中文名称:RNA重组英文名称:RNA recombination定 义:RNA分子内或分子间发生的共价重新组合。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
细胞化学基础转移RNA
转移RNA(tRNA)在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%,绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在,Zamecnik和 Hoagland于1957年鉴定。1.tRNA一级结构具有以下特点:①是一类单链小分子RNA,长
细胞化学词汇RNA构象
中文名称:RNA构象英文名称:RNA conformation定 义:RNA分子的空间结构,构象改变并不导致共价键的断裂和生成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA运输
中文名称:RNA运输英文名称:RNA trafficking定 义:将RNA引导到细胞的特定区域。细胞内的RNA运输对细胞的生理功能至关重要。核内RNA运输影响RNA的加工成熟和核输出;胞质RNA运输影响RNA的定位、运输和基因表达的水平。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二
细胞化学词汇核仁RNA
中文名称:核仁RNA英文名称:nucleolar RNA定 义:核仁中的RNA。包括核糖体核糖核酸(rRNA)前体、核仁小RNA等。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇反义RNA
中文名称:反义RNA外文名称:antisense RNA概 念:与mRNA互补的RNA分子作 用:抑制mRNA的翻译分 类:三类反义RNA是指与mRNA互补后,能抑制与疾病发生直接相关基因的表达的RNA。它封闭基因表达,具有特异性强、操作简单的特点,可用来治疗由基因突变或过度表达导
细胞化学词汇RNA折叠
中文名称:RNA折叠英文名称:RNA folding定 义:新合成的或变性的RNA转变为特定的、成熟的三维结构构象的过程。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA包装
中文名称:RNA包装英文名称:RNA packaging定 义:特指病毒RNA通过其顺式作用元件被病毒核衣壳蛋白识别和包裹的过程。广义指核糖核蛋白颗粒的形成。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇RNA定位
中文名称:RNA定位英文名称:RNA localization定 义:RNA特异定位在细胞不同区域的过程。尤其是信使核糖核酸(mRNA)的定位对生长和发育是重要的。细胞质中RNA定位起始于细胞核,在核中被特异RNA结合蛋白识别,生成核糖核蛋白复合体,然后输出到细胞质。应用学科:生物化学与分子生物学
细胞总RNA的提取
提取细胞RNA的步骤:1) 六孔板每孔细胞中加入1ml Trizol,冰上放置5min,枪头吹打。2) 将各孔裂解液吸到1.5 ml EP管中,加入氯仿0.2ml/管,用力振摇15s。15-30℃下孵育2-3min,离心(4℃,12,000g,15min)。3) 离心后液体分为三层(上层-无色
细胞化学词汇RNA干扰
中文名称:RNA干扰外文名称:RNA interference定 义:RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。分 类:基因沉
细胞化学词汇RNA转运
中文名称:RNA转运英文名称:RNA transport定 义:RNA分子从一个细胞区室或区域移动到另一个细胞区室或区域的过程。各类不同RNA(如信使RNA、核小RNA、核糖体RNA和转移RNA)的转运遵循不同的机制。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
细胞化学词汇卫星RNA
中文名称:卫星RNA外文名称:satellite RNA别 名:卫星核酸类 别:植物病毒RNA常见种类:黄瓜花叶病毒定 义:卫星RNA是一类小的非编码RNA,基因组大小为200-1500nt,通常不编码蛋白,是一类存在于某专一病毒粒即辅助病毒的衣壳内并完全依赖于辅
细胞化学基础信使RNA
信使RNA(mRNA)最早发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。 1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。 2.种类多,可达105种。不同基因表达不同的mRNA。 3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。细菌mRNA的平均半