特定细胞类型标记的细胞核分离
从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因，如癌细胞与正常细胞，或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell)，人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection, LCM)或者荧光激活细胞分类(fluorescence-activated cell sorting, FACS)方法。LCM使用激光和显微镜来直接从组织中轻快地挑出单个细胞到容器里。这就像是在玩挑圆片游戏一样，但是每次实验需要挑出上千个单独细胞，因而这是件非常烦恼的事。与FCAS一样，LCM也需要昂贵的设备。来自Fred Hutchinson癌症研究中心的Roger Deal和Steven Henikoff已经开发了一种便宜且又简单的方法，即特定细胞类型标记的细胞核分离(isolation of nuclei tagged in s......阅读全文
特定细胞类型标记的细胞核分离
从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因，如癌细胞与正常细胞，或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell)，人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,
原代细胞核膜的分离
1. DNA酶Ⅰ；2. KCl（1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4）；3. MgCl2（1mol/L储存液）；4. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；5. 纯化的细胞核；6. 缓冲液：2mmol/L Tris-HCl，pH7.4；7. 膜悬浮缓
原代细胞核膜的分离
试剂和器材： 1. DNA酶Ⅰ；2. KCl（1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4）；3. MgCl2（1mol/L储存液）；4. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；5. 纯化的细胞核；6. 缓冲液：2mmol/L Tris-HCl，pH7.4；
细胞核的预先分离
实验材料细胞试剂、试剂盒PBSRSB 缓冲液仪器、耗材医用台式离心机Dounce 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 清洗细胞，用一医用台式离心机低速离心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 缓冲液悬浮沉淀。每 107 个细胞用 1 ml 缓冲液。用 0.002 英寸间隙的 D
LSCM组织切片的细胞核标记
组织切片的细胞核标记目前仍然采用 DAPI(4，6-联脒-2-苯基吲哚，ex 359 nm / em 461 nm)，其特点是专一性强、灵敏度高、稳定性好、毒性小，且可被405nm激光器有效地激发，获取明亮的核标记荧光图像。PI(碘化丙啶 ex 536nm / em 617nm)也可以用于核标记，因
原代细胞核膜分离实验
实验概要本实验介绍了原代细胞核膜分离的实验操作流程。主要试剂1. DNA酶Ⅰ；2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl，pH7.4)；3. MgCl2(1mol/L储存液)；4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液)；5. 纯化的细胞核；6. 缓冲液：
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中，反复
细胞核的分级分离实验
实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1. 用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯
细胞核的分离提取操作步骤
一、操作步骤1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后，迅速剖开腹部取出肝脏，剪成小块（去除结缔组织）尽快置于盛有0.9％NaCl的烧杯中，反复洗涤，尽量除去血污，用滤纸吸去表面的液体。2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中，用量筒量取8ml预冷的0.25mol／L蔗糖一0.003mol／L氯化钙溶液，先加少量
细胞核的分级分离实验
实验材料小白鼠 试剂、试剂盒蔗糖 氯化钙溶液
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要通过细胞匀浆和离心的方法分级分离细胞的组分，以了解其原理及过程。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过
细胞核与线粒体的分级分离
一、所需试剂及设备小白鼠、冰块、玻璃匀浆器、普通离心机、台式高速离心机、普通天平、光学显微镜、载玻片、盖玻片、刻度离心管、高速离心管、滴管、10ml量筒、25m1烧杯、玻璃漏斗、解剖剪、镊子、吸水纸、纱布、蜡盘、平皿、牙签。0.25moL/L蔗糖一0.003mol/L CaCl2溶液、1%甲苯胺
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究亚细胞成分的化
细胞核与线粒体的分级分离
一、原理 细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。 分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级分离和分析三步，这种方法已成为研究
细胞核与线粒体的分级分离
实验概要掌握细胞核与线粒体的分级分离的实验技术。实验原理细胞内不同结构的比重和大小都不相同，在同一离心场内的沉降速度也不相同，根据这一原理，常用不同转速的离心法，将细胞内各种组分分级分离出来。分离细胞器最常用的方法是将组织制成匀浆，在均匀的悬浮介质中用差速离心法进行分离，其过程包括组织细胞匀浆、分级
原代细胞核孔复合物的分离
试剂和器材： 1. 肝素；2. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（溶于乙醇中配制成1mol/L储存液）；3. 纯化的核膜；4. 提取缓冲液（EB）：含1%（体积分数）Triton X-100的10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）、0.1mmol/L苯甲基磺酰氟；5. Tris缓冲液：2mmol
四膜虫细胞核的分离实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 辛醇PMSF仪器、耗材 搅拌机光学显微镜实验步骤 1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时，在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇，混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF，即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml
四膜虫细胞核的分离实验
四膜虫细胞核的分离 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
四膜虫细胞核的分离实验
四膜虫细胞核的分离 实验材料 细胞 试剂、试剂盒
四膜虫细胞核的分离实验
实验材料细胞试剂、试剂盒辛醇PMSF仪器、耗材搅拌机光学显微镜实验步骤1. 检测所用细胞数量。2. 收获细胞前在冷环境中强力搅拌时，在所有溶液中加入蛋白酶抑制剂。3. 在培养基 A 中加入辛醇，混合均匀。在培养基 A 中加入辛醇和 PMSF，即为培养基 B。4. 用吊桶式转头在 250 ml 的圆锥
差速离心分离植物（动物）细胞核
线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来。（差速离心技术）线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆，在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中（选用离心机的一定转
差速离心分离植物（动物）细胞核
线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来。（差速离心技术）线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆，在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中（选用离心机的一定转
植物（动物）细胞核差速离心分离
线粒体和细胞核的制备与观察利用细胞核与线粒体在一定介质中的沉降速度的差异，可采取分级差速离心的方法，将细胞核与线粒体逐级分离出来。（差速离心技术）线粒体是真核细胞特有的进行能量转换的重要细胞器。将动植物组织制成匀浆，在适当的悬浮介质中差速离心法可以分离细胞线粒体。在一定的离心场中（选用离心机的一定转
分离核仁实验——HeLa细胞细胞核或核仁的制备
实验材料HeLa细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液：PBSRSB-8 10 mmol/L Tris；10 mmoI/L NaCl，8 mmoI/L 乙酸镁，pH 7.4RSB 10 mmol/L Tris；10 mmol/L NaCl，1.5 mmol/L
多色流式细胞术分析细胞内特定的细胞类型
多色流式细胞术是一种强大的技术，用于分析细胞内特定的细胞类型中表达的蛋白质。对于许多类型的细胞，如Th17细胞，细胞表面和细胞内标记物的结合使用是必要的明确的表型鉴定。表征信号响应于特定的靶细胞的性质，可用于表面标志物的同时分析和信号转导蛋白。 细胞表面染色的技术是比较标准的，往往依赖于目标蛋白的
分析细胞内特定的细胞类型中表达的蛋白质
多色流式细胞术是一种强大的技术，用于分析细胞内特定的细胞类型中表达的蛋白质。对于许多类型的细胞，如Th17细胞，细胞表面和细胞内标记物的结合使用是必要的明确的表型鉴定。表征信号响应于特定的靶细胞的性质，可用于表面标志物的同时分析和信号转导蛋白。 细胞表面染色的技术是比较标准的，往往依赖于目标蛋白的
细胞分离离心机类型
细胞分离离心机类型有多种。1、按分离功能可分：分析型细胞分离离心机和制备型细胞分离离心机。2、按结构可分：台式细胞分离离心机和落地式细胞分离离心机。3、按温控可分：冷冻细胞分离离心机和常温细胞分离离心机。4、按使用范围可分：专用型细胞分离离心机和普通型细胞分离离心机。5、按容量可分：微量细胞分离离心
如何选择适合特定组织或细胞类型的解离酶？
选择适合特定组织或细胞类型的解离酶可以考虑以下几个方面：了解组织和细胞特性研究目标组织或细胞类型的细胞间连接方式、细胞外基质成分。例如，某些组织富含胶原蛋白，可能需要胶原酶进行解离；上皮组织可能需要蛋白酶来分离细胞。参考前人研究查阅已有的相关文献，了解类似组织或细胞类型在解离时常用的酶及其组合。供应
DNA结合染料对细胞核的多色标记技术的多种应用
DNA结合染料对细胞核的多色标记技术 细胞核是动物细胞器中最大的。在哺乳动物细胞中，核的平均直径约为6μm，约占总细胞体积的10％。核包含细胞的大部分遗传物质，组织成多个长线性DNA分子，与多种蛋白质（例如组蛋白）复合形成染色体。这些染色体内的基因是细胞的核基因组。核的功能是维持这些基因的完整性，并