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特定细胞类型标记的细胞核分离

从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因,如癌细胞与正常细胞,或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell),人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection, LCM)或者荧光激活细胞分类(fluorescence-activated cell sorting, FACS)方法。LCM使用激光和显微镜来直接从组织中轻快地挑出单个细胞到容器里。这就像是在玩挑圆片游戏一样,但是每次实验需要挑出上千个单独细胞,因而这是件非常烦恼的事。与FCAS一样,LCM也需要昂贵的设备。来自Fred Hutchinson癌症研究中心的Roger Deal和Steven Henikoff已经开发了一种便宜且又简单的方法,即特定细胞类型标记的细胞核分离(isolation of nuclei tagged in s......阅读全文

特定细胞类型标记的细胞核分离

从大量的植物或动物组织中分离出特异性的细胞类型是费力和棘手的。为了研究表观遗传学上的改变和在不同细胞系中不同表达的基因,如癌细胞与正常细胞,或者拟南芥中两种类型的表皮细胞(epidermal cell),人们通常必须采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,

细胞核的预先分离

实验材料细胞试剂、试剂盒PBSRSB 缓冲液仪器、耗材医用台式离心机Dounce 匀浆器实验步骤1. 在 4℃ 用 PBS 清洗细胞,用一医用台式离心机低速离心。然后用含 Tween 40 和 DOC 的 RSB 缓冲液悬浮沉淀。每 107 个细胞用 1 ml 缓冲液。用 0.002 英寸间隙的 D

原代细胞核膜的分离

试剂和器材: 1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L储存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);5. 纯化的细胞核;6. 缓冲液:2mmol/L Tris-HCl,pH7.4;

原代细胞核膜的分离

1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L储存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);5. 纯化的细胞核;6. 缓冲液:2mmol/L Tris-HCl,pH7.4;7. 膜悬浮缓

LSCM组织切片的细胞核标记

组织切片的细胞核标记目前仍然采用 DAPI(4,6-联脒-2-苯基吲哚,ex 359 nm / em 461 nm),其特点是专一性强、灵敏度高、稳定性好、毒性小,且可被405nm激光器有效地激发,获取明亮的核标记荧光图像。PI(碘化丙啶 ex 536nm / em 617nm)也可以用于核标记,因

细胞核的分级分离实验

实验材料小白鼠                                                          试剂、试剂盒蔗糖                                                                  氯化钙溶液      

细胞核的分级分离实验

实验材料 小白鼠试剂、试剂盒 蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材 玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤 1.  用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯

细胞核的分级分离实验

实验材料小白鼠试剂、试剂盒蔗糖氯化钙溶液甲苯胺兰染液詹纳斯绿B染液NaCl溶液仪器、耗材玻璃匀浆器离心机天平光学显微镜载玻片盖玻片离心管滴管量筒烧杯玻璃漏斗解剖剪镊子实验步骤1.  用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中,反复

细胞核的分离提取操作步骤

一、操作步骤1.用颈椎脱位的方法处死小白鼠后,迅速剖开腹部取出肝脏,剪成小块(去除结缔组织)尽快置于盛有0.9%NaCl的烧杯中,反复洗涤,尽量除去血污,用滤纸吸去表面的液体。2.将湿重约1g的肝组织放在小平皿中,用量筒量取8ml预冷的0.25mol/L蔗糖一0.003mol/L氯化钙溶液,先加少量

原代细胞核膜分离实验

实验概要本实验介绍了原代细胞核膜分离的实验操作流程。主要试剂1. DNA酶Ⅰ;2. KCl(1mol/L溶于20mmol/L Tris-HCl,pH7.4);3. MgCl2(1mol/L储存液);4. 苯甲基磺酰氟(PMSF)(无水乙醇配制的1mol/L储存液);5. 纯化的细胞核;6. 缓冲液: