Nature子刊：首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
生物大分子标记技术是生物分子成像的关键。在科学历史上，人们利用荧光蛋白“点亮”细胞内蛋白质, 实现了生命动态过程中蛋白质分子的可视化。荧光蛋白技术是当代生物科学研究中最重要的研究工具之一；在短短十余年内，其研究即被授予诺贝尔奖。RNA同样具有独特的结构、种类繁多的生物学功能以及复杂的时间空间分布。 与蛋白质相比，RNA种类更多，大部分种类结构功能尚未鉴定，被称为基因组中的“暗物质”。不同种类的RNA及其修饰形式的鉴定、功能与调控研究现已经成为了国际前沿。RNA研究也迫切需要一种类似于荧光蛋白这样的颠覆性标记技术，这是深入研究RNA功能机制极为有用的工具。 国际权威学术期刊《Nature Biotechnology》杂志以“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fluorescent RNAs”为题，在线报道了华东理工大学生物反应器工程......阅读全文
RNA标记
RNA labeling (Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes 32P-pCp 3' End-labeling
RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性 3. 不影响RN
新型RNA标记技术颠覆以往干细胞研究
干细胞研究大多是在实验室的培养皿中开展的。然而，斯坦福大学的研究人员近日在《Cell Reports》上发表文章称，体内的干细胞和培养皿中的干细胞在基因表达谱上大相径庭。 研究人员认为，若人们对分离后的干细胞开展研究，并得出干细胞功能的结论，那么这些结论需要重新考虑，因为细胞在分离过程中发生了
miRNA研究之RNA标记
RNA标记RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求：1. 操作简单，灵敏度高2. 不影响碱基配对的特异性3. 不影响R
常用RNA标记方法介绍
RNA标记方法：按反应机制分如下四类：直接标记法，加尾标记法，基于逆转录反应的标记方法，基于RNA克隆扩增的标记方法。常用于RNA标记的方法按标记物性质分为：放射性同位素标记：32P、35S、3H非放射性标记：半抗原荧光素化学发光物质地高辛地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DI
RNA－放射性标记
实验材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml 10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶 (γ32P)ATP
RNA－放射性标记
实验材料 [α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml10mCi ml) UTP 或 CTP T4 多核苷酸激酶(γ32P)ATP 牛小肠磷酸酶T4RNA 连接酶 [32P]pCpATP2Oumol L 无 tRNA 酶的牛血清白蛋白试剂、试剂盒 10XT4 多核苷酸激酶缓冲液 DEPC 处理的
RNA抽提和标记实验
实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞 在组织培养中的细胞 冻存的整个组织
地高辛标记RNA常用的方法介绍
地高辛标记RNA常用的方法是将DIG与UTP共价结合形成DIG-UTP，以DIG-UTP、ATP、CTP、GTP为底物通过RNA聚合酶T7、SP6经体外转录合成标记RNA。此法多用于RNA探针的制备，一般每20~25个核苷酸可引入一个地高辛分子。5'末端标记法5'末端标记法是通过化学
RNA抽提和标记实验
实验材料从组织培养收获的细胞在组织培养中的细胞冻存的整个组织试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液（PBS）TRIzol 试剂乙醇乙酸钠EDTANaOHTris-ClTE 缓冲液固定化的 oligo-dT 引物仪器、耗材组织匀浆器热循环仪荧光扫描仪实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1a.
RNA抽提和标记实验
实验方法原理 实验材料 从组织培养收获的细胞在组织培养中的细胞冻存的整个组织试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液（PBS）TRIzol 试剂乙醇乙酸钠EDTA NaOHTris-ClTE 缓冲液固定化的 oligo-dT 引物仪器、耗材 组织匀浆器热循环仪荧光扫描仪实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材
3.4－RNA－放射性标记
转录过程中的 RNA 分子内标记，转录后利用 T4 多核苷酸激酶的 RNA5＇端标记和利用 T4RNA 连接酶的 RNA3＇端标记。实验材料[α32P]UTP 或 CTP(800Ci ml10mCi ml)UTP 或 CTPT4 多核苷酸激酶(γ32P)ATP牛小肠磷酸酶T4RNA 连接酶[32P]
Nature子刊：首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
生物大分子标记技术是生物分子成像的关键。在科学历史上，人们利用荧光蛋白“点亮”细胞内蛋白质, 实现了生命动态过程中蛋白质分子的可视化。荧光蛋白技术是当代生物科学研究中最重要的研究工具之一；在短短十余年内，其研究即被授予诺贝尔奖。RNA同样具有独特的结构、种类繁多的生物学功能以及复杂的时间空间分
科学家首次实现活细胞RNA标记与无背景成像
图为《自然—生物技术》11月期封面图片。它显示了利用荧光RNA可对单细胞中mRNA的翻译过程进行定量研究。癌细胞中mRNA水平与其编码蛋白质水平之间存在较低相关性，提示癌细胞的翻译调控显著失调，这为癌症的诊疗提供一种全新的思路。 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室的杨弋、朱麟勇等教授历经7年
国际首次|我国学者实现活细胞RNA标记与无背景成像
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室的杨弋、朱麟勇等教授历经7年合作研究，在荧光RNA及活细胞RNA成像领域获突破性进展。他们原创的系列高性能荧光RNA，在国际上首次实现了不同种类RNA在动物细胞内的荧光标记与无背景成像。11月5日，该成果以封面论文形式发表于《自然—生物技术》。 荧光蛋白
常用标记RNA的生物素有哪些？
用生物素标记RNA的方法常见的是用生物素与UTP结合形成Biotin-UTP，以Biotin-UTPATP、CTP、GTP为底物通过RNA聚合酶SP6、T7等经体外转录合成标记RNA。
基本方案2－RNA－抽提和标记
试剂、试剂盒TRIzol 试剂PBS氣仿乙醇乙酸钠引物Superscript Ⅱ RNase H反转录酶10 X low-T dNTP 混合物EDTATE 缓冲液仪器、耗材RNeasy Maxi 试剂盒组织匀浆机圆底离心管圆锥底离心管水平离心机薄壁 PCR 管热循环仪荧光扫描仪实验步骤展
理想的RNA标记方法应符合哪些要求？
1. 操作简单，灵敏度高2. 不影响碱基配对的特异性3. 不影响RNA活性4. 对酶促反应活性无影响或影响不大5. 检测方法具有高度灵敏性和高度特异性6. 标记物对人体无害
【锐赛小课堂】miRNA研究之RNA标记
RNA标记是将标记物（如放射性同位素、荧光素或酶）共价地连接到RNA，通过检测标记物，进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛，在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求： 1. 操作简单，灵敏度高 2. 不影响碱基配对的特异性
用[32P]磷酸标记细胞实验_标记单层培养细胞
实验材料HeLa 细胞试剂、试剂盒FCS磷酸盐仪器、耗材无磷酸培养基实验步骤1. 在含 10% FCS 的培养基中单层培养 HeLa 细胞至铺满 50% 左右。2. 倒掉完全培养基，加入新鲜的无磷酸培养基，培养 3~4 小时以耗尽胞内的磷酸储备。3. 换新鲜的无磷酸培养基，并加 32P 磷酸盐至 2
独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对...
独特无标记细胞分析技术无需荧光染料标记细胞也可对其进行成像分析简介基于细胞成像的分析技术一般需要使用荧光染料进行标记，一些荧光标记可能对活细胞具有毒性或者只能用于固定过的细胞进行染色。无标记细胞分析技术使得研究者既无需耗时耗力的染色流程也无需担心染料对正常细胞活力的影响，就可以计算出细胞数目和细胞汇
标记裂解培养细胞实验
基本方案 温和去垢剂裂解法（对贴壁细胞）基本方案 温和去垢剂裂解法（对非贴壁细胞）SDS煮沸法裂解细胞实验方法原理实验材料待标记的培养细胞 试剂、试剂盒37℃标记培养液
用[32P]磷酸标记细胞实验_标记悬浮培养的HeLa细胞
实验材料细胞试剂、试剂盒磷酸仪器、耗材无磷酸培养基实验步骤1. 培养细胞至对数期，600 g 离心 5 分钟。2. 弃上清，用无磷酸培养基悬浮细胞。3. 培养细胞 3~4 小时以耗尽它们的磷酸储备。4. 再次离心，弃上清，用无磷酸培养基悬浮，加 32P 磷酸盐至 20 μCi/ml 培养液，培养 1
以－RNA－为靶目标－FISH－探针的标记实验
标记的 RNA、DNA 或者核酸类似物可以通过荧光原位杂交（FISH) 的方法检测细胞标本内的 RNA。目标 RNA 通常是由基因组 DNA 转录来的信使 RNA(mRNA)。由于髙特异的核酸碱基互补配对原则，特定的 RNA 分子可以从众多共表达的 mRNA 分子中筛选出来。对选择的 mRNA 分子
以－RNA－为靶目标－FISH－探针的标记实验
标记的 RNA、DNA 或者核酸类似物可以通过荧光原位杂交（FISH) 的方法检测细胞标本内的 RNA。目标 RNA 通常是由基因组 DNA 转录来的信使 RNA(mRNA)。由于髙特异的核酸碱基互补配对原则，特定的 RNA 分子可以从众多共表达的 mRNA 分子中筛选出来。对选择的 mRN
提取悬浮细胞RNA
提取RNA器械：离心管2支，吸管4个，酒精灯，打火机，记号笔，200ul,1000UL枪，DEPC泡过的枪头EP管，紫外照过的手套。滤纸，DEPC纯水（750ml无水乙醇＋150mlDEPC水,剧烈振荡，使劲的摇晃，直至混匀），氯仿，75％酒精，异丙醇，Trizol，预冷的离心机（两种），EP管架（
细胞RNA含量检测
实验步骤展开
细胞RNA含量检测
细胞RNA含量检测 实验步骤
细胞RNA含量检测
实验步骤 展开
RNA提取心得（组织RNA提取和培养细胞的RNA提取）
一.组织RNA提取 1.最好新鲜组织，这样RNA提取的效果比较好，这是肯定的。 2. 如果不是新鲜的（最好在半年之内，-80℃或者液氮中冻存的）组织，注意不要反复冻融，从冰冻状态拿到0-4℃，注意不要拿到常温，待组织解冻后，用 DEPC泡过的剪刀剪一小块组织，称重后，放到预冷的匀浆器中，然后