DAB染色液的使用方法及注意事项
DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。 DAB染色液的使用方法 1.DAB显色液配制 10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用 2. 显色 准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。 3.加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。 4. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。 5.用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。 &n......阅读全文
HRP底物分类及其操作步骤
底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑
辣根过氧化物酶标记试剂的使用
实验概要本实验介绍了辣根过氧化物酶标记试剂对三种底物的使用方法。辣根过氧化物酶标记试剂底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑(AEC)等。实验原理1. DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属
辣根过氧化物酶标记的试剂
底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产
瑞氏(Wright)染色液的配制方法
瑞氏(Wright)染色液 瑞氏染料粉末 0.3g 甘油 3ml 甲醇 97ml 将染料粉末置于干燥的乳缽内研磨,先加甘油,后加甲醇,放玻璃瓶中过夜,过滤即可。
卡诺氏液怎么固定染色体
什么是卡诺氏液?卡诺氏液是一种常用于固定细胞和组织标本的溶液,其中主要成分为甲醛和乙酸。它能够保持细胞和组织的形态和结构,同时还能够使细胞内的蛋白质固定,从而防止它们在染色过程中流失。为什么要用卡诺氏液来固定染色体?对于细胞核和染色体的染色来说,固定是一个非常重要的步骤。在固定之前,由于细胞和组织具
上皮组织特殊染色液的介绍
上皮组织特殊染色液由醋酸、亚甲基蓝、叶酸受体物和蒸馏水组成。大量研究证明,上皮组织特殊染色液被涂抹于上皮组织后,上皮组织的活细胞如有癌变细胞存在,叶酸受体物就会经过这些细胞表面的叶酸受体,迅速进入细胞浆,同时还原型的亚甲基蓝也被带入细胞浆内。叶酸被还原成四氢叶酸,还原型的亚甲基蓝则被癌变细胞内
上皮组织特殊染色液的用途
适用于上皮组织病理学分析前的特殊染色,如宫颈鳞状上皮和柱状上皮组织(如:宫颈异常病变,阴道炎,尖锐湿疣,口腔等)异常病变的临床侦察。
临床物理检查方法介绍phi(φ)小体染色介绍
phi(φ)小体染色介绍: 白血病细胞胞质中的phi(φ)小体与3,3′-二氨基联苯胺(DAB)、过氧化氢基质液作用,以及硝酸酮处理的过氧化氢酶染色,可催化DAB氧化生成蓝色沉淀,定位在胞质内。phi(φ)小体染色正常值: 光镜下phi(φ)小体呈棕色细棒状或纺锤形、大圆颗粒形,1条或多条。phi(
玩转碘液染色:检验工作中碘液的应用
碘液染色操作方法对于粪便、尿液等液体状标本直接滴加卢戈氏碘液后镜检;也可以涂片经甲醇固定后滴加卢戈氏碘液染色 10 分钟,水洗后镜检。碘液染色的应用1. 衣原体鉴定沙眼衣原体在宿主细胞的细胞质内形成包涵体,由密集的颗粒组成,其基质中含有糖原,用碘液染色呈棕褐色斑块,如下图:2. 粪便中的淀粉颗粒与脂
全组织细胞色素氧化酶活性染色试剂盒使用说明
主要用途全组织细胞色素氧化酶活性染色试剂是一种旨在使用细胞色素C催化人工电子供体染料二氨基联苯胺的非酶源性自然氧化,形成棕褐色不溶性产物,来分析全组织样品中细胞色素氧化酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统NADI方法、成功实验证明的。主要适用于各种动物组织的细胞色素氧化酶活性的定性检
免疫组化常见问题及其解决办法
1、 一抗从4度拿出后,为什么要进行37度复温?(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片;(2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。(3)
HRP底物归类以及操作流程
二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最比较敏感、常见的底物。它造成明显的深棕色物质,在水和醇中不融解。大部分状况下,强烈推荐在DAB中添加不一样的金属正离子。当添加金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶能够更为比较敏感。该类反映物质呈暗灰蓝色至灰黑色,且在水及醇中平稳。DAB/金
关于免疫组化法的操作步骤介绍
1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/2 次。 5. 滴加 Ultra
免疫组化(SP法)操作步骤
免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加 Ul
全组织细胞色素氧化酶活性染色试剂盒使用说明
全组织细胞色素氧化酶活性染色试剂盒产品说明书(中文版) 主要用途 全组织细胞色素氧化酶活性染色试剂是一种旨在使用细胞色素C催化人工电子供体染料二氨基联苯胺的非酶源性自然氧化,形成棕褐色不溶性产物,来分析全组织样品中细胞色素氧化酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统NAD
Nature子刊:癌症蛋白Dab2怪异的“双重生活”
生物通报道:有时候蛋白质发挥的作用比我们预期的要多得多。例如,Dab2,一直都被认为与癌症有关。这个分子与一系列的信号蛋白(称为Ras-MAPK通路)相关。在许多癌症中,Ras-MAPK的元件发生突变并开始告诉细胞失控生长。 美国Sylvester综合癌症中心的研究员、迈阿密大学米勒医学院细胞
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤 1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行 2.缓冲液洗 3min/2 次。 3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。 4. 缓冲液洗 5min/
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
免疫组化的具体步骤
免疫组化操作步骤一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
临床化学检查方法介绍脱氧核糖核酸染色介绍
脱氧核糖核酸染色介绍: 脱氧核糖核酸是组成细胞核的成分,与特殊染液作用,被染成浅红色或紫红色。脱氧核糖核酸染色正常值: 幼稚血细胞脱氧核糖核酸颗粒堆积、聚集、染色深、成熟血细胞脱氧核糖核酸颗粒分布均匀,细小,染色浅。脱氧核糖核酸染色临床意义: (1)鉴别细胞的成熟程度,如小原粒细胞与成熟淋巴细
DNA的化学检测项目介绍脱氧核糖核酸染色
脱氧核糖核酸染色介绍: 脱氧核糖核酸是组成细胞核的成分,与特殊染液作用,被染成浅红色或紫红色。脱氧核糖核酸染色正常值: 幼稚血细胞脱氧核糖核酸颗粒堆积、聚集、染色深、成熟血细胞脱氧核糖核酸颗粒分布均匀,细小,染色浅。脱氧核糖核酸染色临床意义: (1)鉴别细胞的成熟程度,如小原粒细胞与成熟淋巴细
Feto-SDSPAGE-染色液使用说明
Feto SDS-PAGE 染色液Feto Protein Staining Buffer产品介绍:本公司研制生产的考马斯亮蓝蛋白胶极速染色液(Feto SDS PAGE 染色液)是一种可以室温下瞬时染色, 不需要脱色,无毒无刺激气味的蛋白染液。本产品适用于各种变性及非变性的蛋白质凝胶染色,可以
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫组化的操作步骤
一 免疫组化(SP法)操作步骤1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2.缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次。5. 滴加
免疫组化实验
实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水
TUNEL细胞凋亡检测程序
实验概要本实验用TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒检测了组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。实验原理其原理是荧光素(fluorescein)标记的dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,可
罗氏公司TUNEL细胞凋亡检测程序
(In situ cell death detection kit-POD法)一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的dU
罗氏TUNEL细胞凋亡检测程序
一、 原理:TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核DNA的断裂情况。其原理是荧光素(fluorescein)标记的 dUTP在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT Enzyme)的作用下,