DAB染色液的使用方法及注意事项

DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。 DAB染色液的使用方法 1.DAB显色液配制 10mM Tris-HCl (pH7.6) 9mL +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V) NiCl2 或CoCl2 1mL ,显色时加入5-10mL 30%H2O2 混匀后立即使用 2. 显色 准备好含有待测蛋白的固相膜:包括电泳、转印、封阻、一抗(或生物素)处理、辣根过氧化酶(HRP)标记的二抗(或链霉亲和素)处理、清洗等步骤。 3.加入适量的DAB显色液,铺满整个固相膜表面(可按比例增减)。 4. 置于平式摇荡仪上,在室温下孵育2至5分 钟,避免光照(暗室操作),直至棕褐色沉淀出现。 5.用镊子夹起固相膜,放进无离子水里清洗。 &n......阅读全文

DAB染色的原理,方法

DAB显色中,DAB与跟过氧化物反应生成棕色不溶于水,不溶于酒精等有机溶剂的产物,易于看到的颜色,在WB和IHC中都是常用的显色方法。

DAB染色液的使用方法及注意事项

DAB染色液用于免疫组化染色,应用在Dako 自动染色系统上。 DAB染色液的使用方法 1.DAB显色液配制 10mM Tris-HCl (pH7.6)   9mL  +DAB (diaminobezidin 3,3-二氨基联苯胺) +0.3%(W/V)  NiCl2 或CoCl2

DAB显色时间如何把握

2. �0�2DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间。 3. �0�2此外,若很短时间就出现背景很深,还有可能你前面的封闭非特异性蛋白不全,需要延长封闭时间。

DAB显色时间如何把握?

(1)DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现浅棕色本底时即可冲洗; (2)DAB显色时间很短(如几秒或几十秒)就出现很深的棕褐色,这很可能说明你的抗体浓度过高或抗体孵育时间过长,需要下调抗体浓度或缩短你的抗体孵育时间; (3)此外,若很短时间就出现背景很深,

革兰氏染色液染色法

  1.葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液。    2.结晶紫染色液。    3.革兰氏碘液。    4.95%酒精。    5.番红染液。    6.载玻片。方   法     一、涂片标本的制备(见实验一)    二、革兰氏染色法     1.初染:在上述已固定的涂片上,滴加结晶紫染液,染色1分钟,水洗

常见染色液的配制

实验概要常见染色液的配制实验步骤  一、吕氏(Loeffler)碱性美蓝染液   A液:美蓝(methylene blue) 0.6g  95%酒精 30ml  B液:KOH 0.01g  蒸馏水 100ml  分别配制A液和B液,配好后混合即可。  二、齐氏(Ziehl)石炭酸复红染色液  A液:

尼氏染色液和硫堇染色液是一个产品吗

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏

尼氏染色液和硫堇染色液是一个产品吗

神经元细胞体包括一个具有皱褶核膜的大细胞核、稀疏的染色质和一个明显的核仁。在细胞体中细胞质是尼氏颗粒,即能够代表粗面内质网并在很多神经元中产生特异的斑点状嗜碱性表现的嗜碱性颗粒。尼氏颗粒可以用很多染色来显示如中性红、亚甲基蓝、甲苯胺蓝和甲基紫等。染色的变异、pH和分化的时间使一些染色既可以仅突出尼氏

微生物染色液配制及染色法

 1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色

微生物染色液配制及染色法

2.1 美蓝染色法2.1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝           0.3g95%乙醇          30mL0.01%氢氧化钾溶液    100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。2.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.

微生物染色液配制及染色法

1、美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g 95%乙醇 30mL 0.01%氢氧化钾溶液100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合.1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷.滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检.1.3 结果菌体呈蓝色. 2、革兰氏染色法2.1 结晶紫染色液

鞭毛染色液的配制方法

鞭毛染色液   A液:单宁酸 5g  FeCl3 1.5g  蒸馏水 100ml  福尔马林(15%) 2.0ml  NaOH(1%) 1.0ml  配好后,当日使用,次日效果差,第三日则不宜使用。  B液:AgNO3 2g  蒸馏水 100ml  待AgNO3溶解后,取出10ml备用,向其余的90

荚膜染色液的配制方法

荚膜染色液   1.黑色素水溶液  黑色素 5g  蒸馏水 100ml  福尔马林(40%甲醛) 0.5ml  将黑色素在蒸馏水中煮沸5分钟,然后加入福尔马林作防腐剂。  2.番红染液  与革兰氏染液中番红复染液相同。

芽孢染色液的配制方法

芽孢染色液   1.孔雀绿染液  孔雀绿(malachite green) 5g  蒸馏水 100ml  2.番红水溶液  番红 0.5g  蒸馏水 100ml  3.苯酚品红溶液  碱性品红 11g  无水酒精 100ml  制法取上述溶液10ml与100ml5%的苯酚溶液混合,过滤备用。  4.

DAPI染色液使用说明

    DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是经过精心优化几乎适用于所有常见细胞和组织细胞核染色的染色液。   DAPI,即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride,也称DAPI dihydrochlor

蛋白染色液说明书

储存条件常温贮存,开封后一年有效。如4℃贮存,会有结晶形成,37℃温浴融化后可继续使用。● 产品简介FastBlue蛋白染色液是以考马斯亮蓝G-250为主要成分,采用新配方配置而成。可用于SDS-PAGE或非变性PAGE胶(native gel)的快速染色。特点:方便快捷-不用漂洗,不用加热,不用脱

EB染色液使用说明

产品简介:EB染色液是EB的水溶液,浓度为10mg/ml。EB(溴化乙锭)能与核酸分子特异结合,用于观察琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶中DNA或RNA分子。广泛应用于核酸电泳前后的染色以及流式细胞仪的样品染色处理等。溴化乙锭(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量为394.32)含有

背景染色较深的原因

(1)抗体浓度过高:一抗浓度过高是常见的原因之一。解决办法是,每次使用新抗体前应当对其工作浓度进行测试,使每一抗体个体化,找到适合自己实验室的理想工作浓度,既使是即用型的抗体也应如此,不能只简单的按说明书进行染色。(2)抗体孵育时间过长或温度较高:解决办法是,严格执行操作规程,最好随身佩带报时表或报

不同浓度Van-Gieson染色液对细胞染色的研究

【摘要】  目的 不同浓度VG 氏染色液对细胞培养后的染色效果的研究,寻求理想的配置浓度。方法 大鼠肝星状细胞(HSC-T6)培养,细胞爬片,经乙醛刺激细胞活化后,通过HE、VG 氏染色,观察胶原纤维和肌源性成分的染色效果。结果 VG染液:A液(1%酸性品红水溶液)、B液(苦味酸饱和水溶

微生物检验染色液的配制及染色方法

1 美蓝染色法1.1 吕氏碱性美蓝染色液美蓝 0.3g95%乙醇 30mL0.01%氢氧化钾溶液 100mL将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。1.2 染色法将涂片在火焰上固定,待冷。滴加染液,染1~3min,水洗,待干,镜检。2.1.3 结果菌体呈蓝色。 检验地带网2 革兰氏染色法2.1

免疫组化实验中DAB显色的原理

DAB是过氧化物酶重要的显色底物之一,能被催化生成水不溶性的棕黄色产物,能直观地观察到,适用于各种斑点检测和免疫组化中的染色步骤。建议可以直接选用absin品牌的DAB试剂盒,试剂盒里的选色液都是配置好直接用的,可以根据实验需要选择不同的颜色

免疫组化实验DAB显色时间如何把握

DAB显色时间不是固定的,主要由显微镜下控制显色时间,到出现浅棕色本底时即可冲洗;

免疫组织化学(HRPDAB系统)

1. 溶液准备:PBS ( pH7.4 ) :10mM Na2HPO4 ,1.8mM KH2PO4 , 50mM NaCl , 2.7mM KCl封闭缓冲液:3%BSA-PBS2. 程序:1 ) 对石蜡切片进行脱蜡和水化:3×10min 二甲苯,5min 100%乙醇,5min 95%乙醇,5min

特殊染色及酶组织化学染色液怎么用

特殊染色及酶组织化学染色液是利用冻结或固定的切片,在一定的条件下(具有酶的底物等)全酶进行催化作用,产生一种可见产物,沉淀在酶所在的部位,最终通过显微镜对酶的活性进行定位或定量研究。特殊染色是为了显示与确定组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的异常物质、病变及病原体等,需要分别选用相应的显示这些成

凋亡相关基因-Bax的表达产物的检测

操作: 1、 培养细胞(96孔板,每组3正常、3损伤、3损伤恢复) 2、 PBS洗,5min X 3次 (小心) 3、 甲醇固定10min 4、 PBS洗,5min X 3次 5、 加入封闭液(1:10) 25µl,37 ℃,30min,吸去上清液,滤纸吸干 6、 加一抗(1

常用染色液和试剂的配制

一、埃利希(Ehrlich)氏苏木精染液 先将苏木精2g溶于100mL乙醇中,再加冰醋酸10mL,混合后加蒸馏水100mL和100mL甘油,然后加硫酸铝钾(约10g)至饱和,搅拌均匀,倒入瓶中。将瓶口用1层纱布包着小块棉花塞上,放在暗处通风的地方,并经常摇动促进“成熟”,直到液体颜色变为深红色为止。

结晶紫染色液使用说明

产品内容:1. 结晶紫染色液(Crystal Violet Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。2. 结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA结合,从而产生细胞核染色。3. 一个包装的本染色液至少可以染色200个样品。4. 室温避光保存

革兰氏(Gram)染色液的配制方法

革兰氏(Gram)染色液  1.草酸铵结晶紫染液  A液:结晶紫(crystal violet) 2g  95%酒精 20ml  B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g  蒸馏水 80ml  混合A、B二液,静置48小时后使用。  2.卢戈氏(Lugol)碘液  碘片 1.0g 

免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策1

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

HRP底物分类及其操作步骤

底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑