辣根过氧化物酶标记的试剂

底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产物呈暗蓝灰色至黑色,且在水及醇中稳定。DAB/金属盐染色应用的组织染色范围较广。 1.需要的溶液和特殊设备 DAB,0.05mol/LTris缓冲液(pH7.6); 0.3%(W/V)氯化镍/水贮存液; 30%过氧化氢; DPX。 光学显微镜(通常带有照相机以便于记录结果) 2.操作步骤 (1)用9ml 0.05mol/LTris缓冲液(pH7.6)溶解6mgDAB; (2)加lml0.3%(W/V)氯化镍/水贮存液(也可以用等量的氯化钴替代); (3)加0.1 m1 3%过氧化氢。过氧化氢一般......阅读全文

辣根过氧化物酶标记的试剂

底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑等。 二氨基联苯胺/金属盐 DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属离子。当加入金属盐如钴、镍至底物液中,辣根过氧化物酶可以更加敏感。此类反应产

辣根过氧化物酶标记试剂的使用

实验概要本实验介绍了辣根过氧化物酶标记试剂对三种底物的使用方法。辣根过氧化物酶标记试剂底物范围较广,包括二氨基联苯胺(DAB)、氯萘酚和氨乙基咔唑(AEC)等。实验原理1. DAB是辣根过氧化物酶最敏感、常用的底物。它产生强烈的棕色产物,在水和醇中不溶解。多数情况下,推荐在DAB中加入不同的金属

辣根过氧化物酶(HRP)标记试剂盒的应用

活化的过氧化物酶是辣根过氧化物酶(HRP),其天然碳水化合物(糖)已被高碘酸盐轻度氧化以产生胺反应性醛基。 活性过氧化物酶的这些羰基自发地、有效地与抗体或其它蛋白质上的伯胺交联。该方法比其它胺反应性化学试剂,如戊二醛偶联更有效,戊二醛偶联常常导致聚合反应和更高程度的偶联失活。 预活化的酶消除

非同位素标记探针酶法检测实验——辣根过氧化物酶法检测

实验材料探针试剂、试剂盒PBS链亲和素HRPODAB双氧水甘油二氨基联苯胺仪器、耗材盖玻片水浴锅实验步骤1.  以生物素酰化探针与载玻片上样品杂交并洗片(“荧光原位杂交实验”基本方案1~6步)。2.  由1×SSC中取出玻片,尽可能吸去残留玻片上的缓冲液,但不要使玻片干涸。加200 μl 封阻液于玻

果蝇类标本的辣根过氧化物酶标记试剂染色检测

(1)样品洗毕后(见前),悬于含1%正常羊IgG的中。在1.5ml锥形管中胚胎或其他样品所占体积应少于50txl,或在5mlap-top管中应少于200/A。摇动孵育1h。 (2)用洗2次。 (3)加一抗:用含蛋白质的溶液,如含羊IgG的制备不同稀释度的抗体。单克隆抗体最好来自杂交瘤细胞培养

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测

实验概要间接法是用未标记的一抗和标记有辣根过氧化物酶(HRP)的二级试剂,经过简单孵育后,进行酶促反应。将抗体直接加入细胞中就可以使一抗与细胞上的抗原结合,在加入不同抗体或同一抗体不同稀释度的溶液时,注意不要发生交叉污染,每一张盖玻片或样品管只能用于某一抗体溶液。抗体能够与相应抗原发生特异性结合,而

辣根过氧化物酶标记试剂对果蝇类标本的染...

实验概要本实验介绍了果蝇类标本的辣根过氧化物酶标记试剂染色检测操作流程。实验原理果蝇类标本被固定及透化处理后,可加入抗体。如同其他免疫组化技术一样可以直接用标记的一抗,或者通过标记的二级试剂(能与一抗特异性结合)进行检测。一般而言,直接标记一抗产生的信号更为清晰,背景较低。不足之处在于如检测多种抗原

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测

实验概要间接法是用未标记的一抗和标记有辣根过氧化物酶(HRP)的二级试剂,经过简单孵育后,进行酶促反应。将抗体直接加入细胞中就可以使一抗与细胞上的抗原结合,在加入不同抗体或同一抗体不同稀释度的溶液时,注意不要发生交叉污染,每一张盖玻片或样品管只能用于某一抗体溶液。抗体能够与相应抗原发生特异性结合,而

辣根过氧化物酶标记试剂对果蝇类标本的染色检测

实验概要本实验介绍了果蝇类标本的辣根过氧化物酶标记试剂染色检测操作流程。实验原理果蝇类标本被固定及透化处理后,可加入抗体。如同其他免疫组化技术一样可以直接用标记的一抗,或者通过标记的二级试剂(能与一抗特异性结合)进行检测。一般而言,直接标记一抗产生的信号更为清晰,背景较低。不足之处在于如检测多种抗原

辣根过氧化物酶标记凝聚素的组织化学染色程序

1.组织切片脱蜡处理等同前; 2.流水冲洗5分钟,3%H2O2孵育10分钟(阻断内源性过氧化物酶,避免假阳性); 3.漂洗3次,每次5分钟; 4.1%牛血清白蛋白孵育,室温20分钟,移去多余液体; 5.加入稀释的辣根过氧化物酶—凝集素,置湿盒内孵育。室温1.5小时; 6.漂洗3次

豆壳过氧化物酶作为标记酶

在1966年,Avrameans等把辣根过氧化物酶与人血清清蛋白交联后,制成“血清清蛋白-HRP”酶标记物和与抗人血清清蛋白抗体交联制成的“抗血清清蛋白-HRP”酶标记物,在免疫电泳和免疫扩散试验中,分别检测抗清蛋白抗体和清蛋白。1971年,Engvall等人分别以纤维素和聚苯乙烯试管作为固相载体吸

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测的实验步骤

(1)将盖玻片、载玻片或培养板置于水平面上;如为1h或1h以下的短程孵育,则勿需湿孵,可将盖玻片或载玻片直接放置在实验台上。多个盖玻片则需置于Parafilm膜上,因为Parafilm膜有弹性,能够防止抗体溢出盖玻片边缘,也便于镊子操作。但如果圆形盖玻片数量过多,最好将其置于细胞生长与固定的2

辣根过氧化物酶的用途

(1) RZ>3 活性 >250u/mg, 主要应用于免疫学,是高纯度的过氧化酶。采用特殊色谱纯化技术以除去会影响免疫学反应的同工酶B .(2) RZ>2 活性 >180u/mg ,主要应用于临床化学,我们的客户也有将这个规格的产品应用于免疫学研究的。此时,一个标准化的分析方法就变得尤为重要。(3)

辣根过氧化物酶的用途

用途(1) RZ>3 活性 >250u/mg, 主要应用于免疫学,是高纯度的过氧化酶。采用特殊色谱纯化技术以除去会影响免疫学反应的同工酶B .(2) RZ>2 活性 >180u/mg ,主要应用于临床化学,我们的客户也有将这个规格的产品应用于免疫学研究的。此时,一个标准化的分析方法就变得尤为重要。(

什么是辣根过氧化物酶?

  过氧化物酶(HRP)广泛分布于植物中,辣根中含量最高,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个氨基酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的最适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此

用辣根过氧化物酶标记的试剂进行间接检测及常见问题

间接法是用未标记的一抗和标记有HRP的二级试剂,经过简单孵育后,进行酶促反应。将抗体直接加入细胞中就可以使一抗与细胞上的抗原结合,在加入不同抗体或同一抗体不同稀释度的溶液时,注意不要发生交叉污染,每一张盖玻片或样品管只能用于某一抗体溶液。抗体能够与相应抗原发生特异性结合,而未结合的抗体通过洗涤被去除

辣根过氧化物酶的制备方法

实验原理过氧化物酶催化以下反应:2 H2O2 →O2+2H2O这一类酶以铁卟啉为辅基,所以属血红素蛋白质类(hemeProteins)。过氧化物酶在生物界分布极广,在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。本实验是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冷冻干燥,最

辣根过氧化物酶的实验原理

  过氧化物酶催化以下反应:  2 H2O2 →O2+2H2O  这一类酶以铁卟啉为辅基,所以属血红素蛋白质类(hemeProteins)。过氧化物酶在生物界分布极广,在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。  本实验是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冷冻

辣根过氧化物酶的基本信息

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。

辣根过氧化物酶的简介和用途

  辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。  辣根过氧化物酶(Horseradish Per

什么是辣根过氧化物酶?有什么作用?

辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。过氧化物酶作为多个试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。

辣根过氧化物酶的实验方法和原理

实验原理过氧化物酶催化以下反应:2 H2O2 →O2+2H2O这一类酶以铁卟啉为辅基,所以属血红素蛋白质类(hemeProteins)。过氧化物酶在生物界分布极广,在细胞代谢的氧化还原过程中起重要的作用。本实验是以辣根为原料,经过水的抽提,硫酸铵和丙酮分级分离,再经锌离子纯化,透析除盐,冷冻干燥,最

辣根过氧化物酶实验的HRP的活力测定

  1、活力测定:测定k4值的方法操作如下:  取2个比色池(带盖,光程1厘米),按下表加入反应物  *酶液:将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。  加好反应物,摇匀,在470nm 读出OD值,为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中,即刻摇匀并记时

酶标记抗体

酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(

辣根过氧化物酶的仪器和试剂的相关介绍

  仪器  离心机、干燥器、分光光度计。  试剂  ⒈ 硫酸铵:工业纯和化学纯;  ⒉ 丙酮。  ⒊ 10mM pH7.0磷酸盐缓冲液:称取243.5毫克磷酸二氢钠(NaH2PO4·2H2O)和857毫克磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),溶于400毫升水中。  ⒋ 20mM愈创木酚溶液:取0

酶联免疫吸附试验—辣根过氧化物酶试验相关

  过氧化物酶(HRP)广泛分布于植物中,辣根中含量最高,从辣根中提取的称辣根过氧化物酶(HRP),是由无色酶蛋白和深棕色的铁卟啉构成的一种糖蛋白(含糖量18%),分子量约40 000,约由300个氨基酸组成,等电点为pH 3-9,催化反应的最适pH值因供氢体不同而稍有差异,一般多在pH 5左右。此

辣根过氧化物酶实验的HRP的制备的简介

  ⒈水提取:  称取 10斤用水冲刷干净的鲜辣根(辣根皮中亦含有丰富的HRP),用菜刀切成小碎块,在搅肉机中搅碎1~2次。碎渣浆用1倍体积的水在低温下搅拌提取过夜(亦可采用高速抽提法)。次日用甩干机(或离心机)甩干,收集滤液,碎渣再用1/4倍体积水浸泡提取一次,合并两次滤液,量总体积和度,0。  

免疫斑点试验的原理

  硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜具有很强的静电吸附力,在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。因而,将抗原吸附于纤维素膜后,就可利用纤维素膜作为固相进行抗原抗体反应。当加入抗体后(即可与膜上的抗原结合,犎;后再加入带有标记物的抗体,使标记通过抗抗体和相应抗体的结合间接地交联于纤维素膜上。加入标记

关于辣根过氧化物酶的HRP的活力测定的介绍

  1、活力测定:测定k4值的方法操作如下:  取2个比色池(带盖,光程1厘米),按下表加入反应物  *酶液:将1毫克蛋白/毫升的酶液用磷酸盐缓冲液稀释10倍后应用。  加好反应物,摇匀,在470nm 读出OD值,为t=0 的读数。立即加0.01毫升40mM过氧化氢溶液于2个比色池中,即刻摇匀并记时

POD辣根过氧化物酶的溶解性及分类说明

本篇文章由专业生化试剂供应商索莱宝为您提供。说明:POD是一种具有氧化还原酶性质的血红素蛋白。用于生化研究,是酶标记法所用的一种主要酶。也用于生物液体中葡萄糖和半乳糖的测定。别名:Donor: hydrogen-peroxide oxidoreductase;Horseradish peroxida